EFFICACY OF POLYMERASE CHAIN REACTION IN DIFFERENTIATING PATHOGENIC AND NONPATHOGENIC STRAINS OF ENTAMOEBA HISTOLYTICA AND IN STUDYING THE EPIDEMIOLOGY OF AMOEBIASIS

用福尔马林固定粪便标本，从中抽提ＤＮＡ。采用两对可区别溶组织内阿米巴致病与非致病的引物进行ＰＣＲ扩增。３２例经镜检证实的溶组织内阿米巴带囊者均呈ＰＣＲ阳性反应，其中６例（１８．８％）仅对致病性引物、２５例（７８．１％）仅对非致病性引物显示阳性反应，１例（３．１％）则对致病及非致病引物均呈阳性反应。致病性ＰＣＲ阳性者与受试者的临床表现（腹泻或痢疾粪便）密切相关（ＯＲ＝３１．５）。所有对照者（粪便中无溶组织内阿米巴）均呈ＰＣＲ阴性反应。用ＰＣＲ，镜检及ＥＬＩＳＡ方法对一组人（４０例）进行阿米巴流行病学检测。粪检阳性率７．６％、ＰＣＲ阳性率２０％、ＥＬＩＳＡ阳性率２５％，由于ＥＬＩＳＡ阳性者尚包括既往感染，故在３种方法中ＰＣＲ是确定现症感染最敏感和特异的方法。ＰＣＲ技术也是鉴别溶组织内阿米巴致病性、诊断阿米巴病和进行流行病学研究的有效工具。     

用PCR诊断不同虫荷量的大鼠卡氏肺孢子虫肺炎的价值

目的　评价在不同虫荷量条件下用 PCR诊断大鼠卡氏肺孢子虫肺炎 (PCP)的价值。　方法　将 PCP大鼠随机分为药物治疗组及未治疗组 ,测定其肺虫荷量 ,收集其支气管灌洗液 (BAL F)和血清标本 ,用 PCR和半套式 (Sn) PCR检测标本中的卡氏肺孢子虫基因 ,比较 PCR和环六亚甲基四胺银 (GMS)染色结果 ,及与病鼠肺虫荷量的关系。　结果　虫荷量高的未治疗组病鼠的 BAL F标本 PCR、Sn PCR及 GMS染色阳性率分别为 10 0 %、10 0 %和 92 .6 % ,差异无显著性 (P>0 .0 5 ) ;而虫荷量低的治疗组的 PCR(88.1% )、Sn PCR(94 .9% )阳性率均显著高于 GMS染色镜检阳性率 (30 .5 % ) (P<0 .0 5 )。肺虫荷量 >5 0 0个 /mg肺的 PCP大鼠 ,血清 PCR阳性率显著高于≤ 5 0 0者 (分别为 4 2 .9%和 1.7% )。　结论　PCR可用于虫株负荷量较低时的 PCP诊断 ,对判断 PCP病情及疗效考核亦有一定的帮助。     

非艾滋病病毒感染临床病例肺孢子菌肺炎的流行病学研究

目的 了解非HIV感染临床病例肺孢子菌肺炎(PCP)的流行现状.方法 用六亚甲基四胺银(GMs)染色镜检和PCR对851例非HIV感染肺炎患者进行检测,从患者痰液或支气管肺泡灌洗液中查到肺孢子菌包囊或DNA为确诊PCP的依据.结果 851例肺炎患者中,肺孢子菌GMS阳性123例(14.5%),PCR阳性202例(23.7%);有免疫功能低下表现的肺炎患者肺孢子菌检出率最高,GMS和PCR阳性率分别高达28.2%和39.4%;在高龄慢性病患者和无明确免疫受损史、肺感染原因待查患者中亦检出PCP患者,GMS阳性率分别为8.7%和10.9%,PCR阳性率分别为17.5%和19.6%.结论 非HIV感染临床病例发生PCP的风险较高,临床医师应注意鉴别有无PCP的可能.     

特异性识别溶组织内阿米巴包囊的单克隆抗体的研制

用常规方法从粪便中检测溶组织内阿米巴(E.h.)仍是一个难题。本文研究制备了可特异性地识别E.h.包囊的McAbs。 从22例患者粪便标本中分离出的阿米巴虫株,经rRNA-PCR和己糖激酶同工酶测定,5人为E.h.感染,16人为dispar内阿米巴(E.d.)感染,1人为E.h.和E.d.混合感染。用汞醛碘法从E.h.感染者粪便中收集E.h.包囊,经双阶蔗糖梯度离心和纤维素酶消化法纯化包囊。从503号E.h.感染者粪便中分离纯化出的包囊数达2×10~6个,且其     

APPLICATION OF POLYMERASE CHAIN REACTION FOR DIAGNOSING AMEBIC LIVER ABSCESS

Polymerase chain reaction (PCR) has been applied in diagnosing amebic liver infection by detecting pathogenic Entamoeba histolytica DNA in liver aspirates. Oligonucleotide primers found to he specific for the gene encoding the 30 kDa molecule of this pathogenic ameba were used in the test. Liver aspirates obtained from 23 patients with amebic liver abscess substantiated by typical clinical rnanifastation or with very high titres of anti-E histtolytica antibodies by ELISA were found to he positive by PCR. Fourteen controlsamples (3 cases of bacterial liver abscess, I of liver cancer and 10 of other abscess) were all found to be negative to this reaction. The results suggested PCR to he a specific and sensitive tool for diagnosing amebic liver abscess infections.     

干燥综合症合并肺孢子菌肺炎一例并文献复习

目的 探讨干燥综合症合并肺孢子菌肺炎（PCP）的早期诊断方法。方法 对1例干燥综合症合并肺孢子菌肺炎患者的临床资料进行回顾性分析。结果 患者因干燥综合症接受免疫抑制剂治疗两月后出现不明原因发热、干咳,活动憋气。依据患者临床表现、胸部X线和CT征像、痰肺孢子菌六胺银染色镜检和多聚酶链反应（PCR）监测结果而确诊PCP。予克林霉素（患者磺胺过敏）、卡泊芬静治疗6 d后痰液肺孢子菌DNA载量由104/ml减为102/ml,12 d后进一步降至101/ml,经卡泊芬静治疗21 d后痊愈出院。结论 痰液标本肺孢子菌六胺银染色镜检具有高度特异性,但敏感性较低。高敏感性的PCR方法不仅可以用于PCP筛查,还可用于疗效监测。     

应用ELISA检测阿米巴脓抗原和循环抗原诊断阿米巴肝脓 …

应用ＥＬＩＳＡ法检测阿米巴肝脓肿患者脓液和血清标本中的阿米巴抗原,结果４２例患者中有４１例检出脓抗原检出率为９７．６％,其中包括８例镜检阿米巴滋养体阳性和３３例镜检阴性者;有３９例检出循环抗原,检出率为９２．９％,脓抗原阳性反应强度高于循环抗原者（Ｐ〈０．０５）,各种对照标本的阿米巴抗原检出的率为０,提示可用ＥＬＩＳＡ抗原检测法替代镜检和培养法进行阿米巴肝脓肿的病原学诊断。     

用聚合酶链反应检测血清标本诊断阿米巴肝脓肿的价值

用聚合酶链反应（ Ｐ Ｃ Ｒ）检测阿米巴肝脓肿患者血清标本中的溶组织内阿米巴 ３０ ０００ 蛋白基因,结果４２ 例患者中有３５ 例呈阳性反应,阳性率为８３．３％ ,低于脓标本 Ｐ Ｃ Ｒ阳性率（１００％ ）（ Ｐ＜ ０．０１）。３ 例细菌性肝脓肿、１ 例肝癌及１０ 例其它部位脓肿患者的血清和脓对照标本 Ｐ Ｃ Ｒ均呈阴性反应。对 Ｐ Ｃ Ｒ检测血标本诊断阿米巴肝脓肿的价值进行了讨论。     

用多糖间接血凝试验检测肠出血性大肠杆菌O157抗体的初步研究

目的：探讨多糖间接血凝（IHA）检测感染肠出血性大肠杆菌（EHEL）O157：H7患血清中抗O157抗体的价值。方法：用酚－水法提取O157：H7脂多糖和醋酸水解法制备多糖抗原，致敏绵羊红细胞后以IHA检测各种肠道致病菌抗血清及健康人和非腹泻患血清的抗体反应。结果：制备的多糖抗原糖含量为33％，不含核酸，蛋白质＜0．3％，具有鲎试剂凝集活性。以O157多糖IHA检测O157单克隆抗体呈高效价凝集（1：1280），H7多克隆抗体呈低效价凝集（1：8），其它各种肠道致病菌抗血清的凝集效价均小于1：2，从30名健康人和30名非腹泻患儿的血清中未查出O157抗体；204名非腹泻成人患中，有1人的凝集效价为1：8，其余的均小于1：2，吸收抑制试验表明凝集反应为特异性。结论：以多糖IHA检测抗O157抗体可试用于人群O157：H7感染的抗O157抗体流行率调查及肾溶血性尿毒综合征的免疫诊断。     

多聚酶链反应在阿米巴病流行病学研究中的应用

用两对引物扩增（ＰＣＲ）溶组织内阿米巴带囊者粪便中的ＤＮＡ，以鉴别感染虫株的致病性，致病和非致病性ＰＣＲ均为阳性者１人（３．１％），仅一项阳性者分别为６人（１８．８％）和２５人（７８．１％）。７例致病性ＰＣＲ阳性者中，６人有腹泻症状（ＯＲ＝３１．５）。各种对照标本均呈ＰＣＲ阴性反应。以ＰＣＲ法对一小样本人群进行阿米巴病调查，致病和非致病虫株的感染率均为１０％。结果表明，在阿米巴病流行病学调查中，可