铅对大鼠星型胶质细胞c-Fos和c-Jun蛋白表达影响

目的探讨不同时间点低浓度铅暴露对体外原代培养的星型胶质细胞中即早基因c-Fos和c-Jun蛋白表达的影响。方法出生4～8 d Wistar大鼠脑星型胶质细胞原代培养,1.0μmol/L醋酸铅暴露不同时间后分别收集样品,应用蛋白免疫印迹法测定样品c-Fos和c-Jun蛋白表达的变化。结果 1.0μmol/L醋酸铅处理后,星型胶质细胞中c-Fos和c-Jun蛋白表达均明显降低,与对照组比较,染铅15 min时蛋白表达降低有统计学意义(P0.05),分别比对照降低33.4%和17.3%;至染铅180 min时c-Fos和c-Jun蛋白表达降至最低,均低于对照的1/2(P0.01)。结论低浓度染铅可使原代培养的星型胶质细胞中c-Fos和c-Jun蛋白表达持续降低,这可能与铅致大鼠学习记忆功能损害有关。     

醋酸锌对谷氨酸诱导的小鼠脑片即早基因过度表达的抑制作用

目的：探讨谷氨酸对脑组织即早基因表达的影响以及醋酸锌对谷氨酸诱导c-fos和c-jun过度表达的拮抗作用。方法：体外小鼠海马脑片培养；在培养基中加入200μmol/L的谷氨酸（或同时加入谷氨酸和醋酸锌），作用0.5,1,2,3h，然后进行RT-PCR实验，检测c-fos和c-jun的表达变化。结果：200μmol/L谷氨酸处理的脑片中，1-2h期间c-fos的表达升高，当谷氨酸与100μmol/L醋酸锌共同处理脑片时，1-3h期间c-fos表达基本恢复正常；200μmol/L谷氨酸作用下，脑片c-jun表达水平从0.5h起即明显升高，谷氨酸与醋酸锌共同作用时，可见c-jun基因在各检测时段表达基本接近正常。结论：谷氨酸可引起c-fos及c-jun的过度表达，锌离子可拮抗谷氨酸诱导的c-fos和c-jun过度表达作用，使二基因表达恢复正常。     

铅对大鼠海马神经元胞质PKC活性的影响

目的 :观察不同低浓度醋酸铅不同染铅时间对大鼠海马神经元原代培养细胞胞质蛋白激酶C(PKC)活性及神经元细胞生长的影响。方法 :出生 4～ 8dWistar大鼠海马神经元原代细胞培养 ,显微照相 ,并不同时间不同浓度染铅 ,应用改良的Takai法测定PKC活性的变化。结果 :0 .1～ 1.0 μmol/L染铅 ,PKC活性依浓度依赖方式被激活 ,染铅浓度 >1.0 μmol/L ,PKC活性下降 ;染铅 15min后PKC活性升高并保持。低浓度醋酸铅并可抑制原代神经元细胞生长 ,呈浓度依赖方式。结论 :低浓度醋酸铅可持续激活大鼠海马神经元原代培养细胞胞质PKC ,抑制原代神经元细胞生长。     

生物化学理论课程PBL模式的教学实践

为适应当前以实践能力和创新能力为核心的素质教育的要求,中国医科大学生物化学与分子生物学教研室于2004学年下半年在2003级五年制临床医学专业进行了小规模、阶段性的以问题为基础学习模式的教学实践.结果表明,这一教学模式在提高学生自学能力和知识运用能力上有积极的促进作用.     

铅与幼鼠脑组织蛋白激酶C活性及记忆功能改变的关系

背景：铅暴露引起的动物学习记忆障碍与脑细胞中蛋白激酶C（protein kinase C．PKC)活性改变是否有关系呢?目的：研究慢性铅暴露下发育期小鼠大脑组织PKC活性变化规律及其对小鼠记忆发育的影响。设计：以实验动物为研究对象，随机对照的验证性实验研究。单位：卫生部细胞生物学重点实验室。材料：实验在中国医科大学生物化学与分子生物学实验室完成。选择五六周龄昆明种小白鼠72只。方法：以不同浓度的醋酸铅饲喂交配后的雌鼠，其幼崽通过哺乳和直接饮水接触铅。在幼崽生后1d(P1)，8d(P8)，15d(P15)，22d(P22)，30d(P30)将其分别处死，取出脑组织。采用[γ-^32P]ATP放射性磷标记法于体外测定铅暴露小鼠大脑组织的PKC的活性；另外取暴露于不同浓度醋酸铅的发育期小鼠，通过被动回避反应实验进行记忆行为学训练和测试，观察不同浓度的铅对小鼠记忆的影响。主要观察指标：①不同浓度铅暴露对发育期小鼠大脑组织内PKC活性的影响。②不同浓度铅暴露对发育期小鼠记忆行为的影响：结果：对幼鼠脑PKC的活性测定显示：在发育初期铅暴露小鼠脑中PKC活性高于正常，发育后期则低于正常，高浓度铅对PKC活性抑制较强；记忆行为学测试可见低浓度铅使小鼠发育初期记忆曲线升高，而使中长期记忆曲线减低；铅浓度升高，记忆曲线降低。结论：铅对小鼠大脑组织中PKC活性发育有抑制作用．铅浓度越高，抑制越明显；低浓度铅在短时间内似有刺激记忆的作用，长时间低浓度铅暴露使记忆抑制；高浓度铅使记忆能力降低作用更明显。铅对发育期小鼠脑中PKC活性及记忆功能的影响有一定的相关性。     

碱性成纤维细胞生长因子经ERK信号通路抑制卵巢癌CAOV3细胞凋亡

目的:研究卵巢癌CAOV3细胞中碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)经MEK/ERK1/2信号转导通路对CREB、Bcl-2表达以及对细胞凋亡的影响作用。方法:无血清饥饿诱导细胞凋亡。分为对照组、bFGF组、bFGF PD98059组。Annexin-EGFP/PI荧光双染法检测细胞凋亡。Western印迹法检测ERK1/2、CREB以及Bcl-2蛋白表达。RT-PCR法检测Bcl-2的mRNA表达。结果:bFGF可抑制无血清饥饿诱导的细胞凋亡;时效依赖性地诱导ERK1/2活性增高、刺激CREB磷酸化、促进Bcl-2的mRNA及蛋白表达增加。bFGF作用CAOV3细胞15 min时ERK1/2活性达高峰;45 min时CREB磷酸化达峰值;Bcl-2的mREN表达高峰为6h,8h时蛋白表达最高。MEK1抑制剂PD98059可抑制bFGF的上述作用。结论:bFGF可能通过激活MEK/ERK1/2/CREB/Bcl-2信号转导途径抑制卵巢癌CAOV3细胞凋亡。     

铅与幼鼠脑蛋白激酶C活性及记忆功能改变的关系

铅具有很强的神经亲和性 ,可在神经组织中蓄积 ,引起神经系统功能 (主要是学习记忆功能 )的长期损害[1～ 4 ] 。铅可干扰神经发育和学习记忆机制中的多个环节。现已知 ,铅通过对ＰＫＣ(ｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅＣ ,蛋白激酶Ｃ)的异常激活或抑制而干扰ＬＴＰ(长时程增强 )的形成和维持 ,并影响发育期大鼠脑海马中ＰＫＣ活性和ＰＫＣγ同工酶的分布[5～ 6 ] 。在本研究中我们在体外测定了铅暴露的不同发育期小鼠脑组织ＰＫＣ活性变化 ,并结合动物行为学测试 ,分析研究了不同浓度铅对不同发育期小鼠脑组织中ＰＫＣ活性变化及其对小鼠记忆功…     

上皮性卵巢癌组织中aFGF及FGFR-1的表达及临床意义

目的:检测酸性成纤维细胞生长因子(aFGF) 及其受体FGFR-1在上皮性卵巢癌组织中的表达,探讨其作用机制及临床意义.方法:应用RT-PCR技术对40 例上皮性卵巢癌aFGF mRNA及FGFR-1 mRNA的表达进行分析. 结果:aFGF mRNA 和FGFR-1 mRNA在上皮性卵巢癌组织中有过度表达(P<0.05),Ⅲ～Ⅳ期卵巢癌中的表达水平明显高于Ⅰ～Ⅱ期.结论:aFGF及FGFR-1与上皮性卵巢癌的发生、发展、浸润呈正相关,可作为卵巢上皮癌生物学行为的重要指标.     

ELISA法测定人血液中组织激肽释放酶含量的研究

作者建立了Ｓ－和Ｃ－ＥＬＩＳＡ两种测定人血中组织激肽释放酶含量的方法。该法灵敏度高，特异性强，两种ＥＬＩＳＡ法只与人血液中组织激肽释放酶反应，与其它类型激肽释放酶无交叉反应。并测定了正常人血浆和血清值，建立了正常参考值。     

生物化学与细胞生物学课程整合的探讨

为了适应新世纪教学内容和课程体系改革的要求,我校借鉴美国哈佛大学医学院的经验,将生物化学与细胞生物学两门课程整合为“细胞的化学与生物学”。整合后在减少两个学科间重复内容、增加学科间联系、减少学时、早期接触临床、培养学生分析解决问题的能力、创新能力等方面有了很大改进,为这两门课程的改革开辟了新途径。