眼镜蛇神经毒素多肽的氚标记

<正> N-琥珀酰亚胺基[2,3-~3H]丙酸酯是一种蛋白质通用的标记试剂,它的优点在于作用条件温和,对蛋白质生物活性影响小,操作简便,比碘标记易于保护和保存。 用本所合成的N-琥珀酰亚胺基[2,3-~3H]丙酸酯对眼镜蛇神经毒素多肽进行氚标记,获得较理想结果。神经毒素多肽与标记试剂在室温反应2h即可被标记,[~3H]神经毒素的峰值管比放射性可达5.7GBq/mmol。毒性     

PTD-BDNF对海马神经元钠、钾、钙离子通道的影响

目的研究PTD-BDNF对大鼠海马神经元细胞钠、钾、钙离子通道的影响。方法全细胞膜片钳技术记录海马神经元细胞电压依赖性钠、钾、钙通道电流,观察并分析PTD-BDNF对离子通道电流的影响。结果与对照组比较,PTD-BDNF、BDNF使海马神经元钠通道电流强度峰值分别增加39.35%和41.99%（n=4,P〈0.01）;使钠通道电流-电压关系曲线下移（n=4,P〈0.01）;使海马神经元钙通道电流强度峰值分别增加39.20%和38.72%（n=4,P〈0.01）;使钙通道电流-电压关系曲线下移（n=4,P〈0.01）;使海马神经元钾通道电流IA、IK在20mv刺激处分别比对照组降低29.03%、28.06%和29.76%、33.38%;使钾电流-电压关系曲线下移（n=4,P〈0.01）。PTD-BDNF与BDNF两者之间比较差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论PTD-BDNF显示了与脑源性神经营养因子相似的电压依赖性离子通道的调节作用,说明PTD-BDNF与脑源性神经营养因子在调节神经元静息膜电位、神经兴奋性方面有相同的分子基础。     

抗乙酰胆碱酯酶基因表达的反义寡核苷酸的研究进展

反义核酸技术是近年来迅速发展的选择性抑制特定基因表达的一种生物技术,乙酰胆碱酯酶抑制剂可用于治疗早老性痴呆和重症肌无力等疾病,本文综述了利用反义寡核苷酸抑制乙酰胆碱酯酶的表达研制新型胆碱酯酶抑制剂的研究进展.     

梭曼水解酶及活性肽片

梭曼水解酶及活性肽片刘昌玲，姜厚理，孙曼霁军事医学科学院毒物药物研究所（北京１００８５０）梭曼水解酶广泛存在动植物组织和微生物中，本文阐明了几种来源不同组织和细菌中提取的梭曼水解酶及水解梭曼的活性肽片。牛肝和微球菌中提取了梭曼水解酶，它们水解梭曼的米...     

人大脑皮层膜谷氨酸受体的结合特性

用放射性配体受体结合实验研究了人大脑皮层膜与［３￣Ｈ］ＤＬ－谷氨酸结合的特性。人大脑皮层与谷氨酸特异性结合的最适条件是在４℃，ＨＥＰＥＳ缓冲液（ｐＨ６．４－８．６）中孵温３０－４０ｍｉｎ。结合实验前洗涤膜样品至为重要。人大脑皮层膜与谷氨酸特异性结合是可饱和的，其ＫＤ和Ｂｍａｘ值分别为１０３和１．６７ｎｍｏｌ·Ｌ－１蛋白，Ｈｉｌｌ系数１．０６．谷氨酸受体激动剂对人大脑皮层膜与谷氨酸结合的抑制强度依次为Ｌ－谷氨酸＞ＤＬ－谷氨酸＞红藻氨酸＞Ｎ－甲基－Ｄ－天冬氨酸（ＮＭＤＡ）＞Ｄ－谷氨酸。谷氨酸受体亚型拮抗剂２－氨基－５－磷酸基戊酸和６，７－二硝基唑喔啉－２，３－二酮（１ｎｍｏｌ·Ｌ－１）分别取代了５４％和５６％的特异性谷氨酸结合。１．２５ｎｍｏｌ·Ｌ－１镁离子抑制了５５％的特异性谷氨酸结合。人大脑皮层膜与谷氨酸的特异性结合不依赖钠离子，部分依赖于钙离子。人大脑皮层膜与谷氨酸特异性结合至少涉及到ＮＭＤＡ和红藻氨酸两个谷氨酸受体亚型。     

脯氨肽酶的生化性质

综述了脯氨肽酶(prolidase)的生化性质，详细论述了人脯氨肽酶的生理、理化性质、序列及其空间结构，并对动物组织与微生物中存在的脯氨肽酶性质进行了比较。     

肟类药物对塔崩等神经性毒剂抑制的大鼠脑AChE的体外重活化作用

系统地研究了肟类药物对塔崩抑制的大鼠脑AChE的体外重活化作用,并与梭曼、沙林和VX进行了比较。结果表明,沙林和VX抑制的AChE较易被药物重活化,而塔崩和梭曼抑制的AChE则较难。37℃、pH7.2条件下,塔崩抑制的大鼠脑AChE可浓度依赖性地被TMB_r和LuH_6重活化,2-PAM在高浓度下也有一定作用,但HI-6在所用3个浓度下均无重活化。通过降低抑制温度成功地建立了未老化的梭曼膦酰化AChE模型。药物试验表明,未老化的梭曼膦酰化大鼠脑AChE可被高浓度(1mmol/L)HI-6重活化,而不被2-PAM、TMB_4及LuH_6重活化。提示药物自身内在活性在重活化作用中的重要性。TMB_4和LuH_6对塔崩磷酸化AChE有较强重活化,而对未老化梭曼膦酸化AChE无重活化,HI-6则相反,对未老化梭曼膦酰化AChE重活化效果好,而对塔崩磷酰化AChE无重活化作用。塔崩和梭曼膦酰化AChE在未老化以前对药物的响应就有所不同,毒剂残基的空间效应可能起重要作用。     

有机磷毒剂对人脑谷氨酸受体的作用

本工作采用放射性配体结合实验方法，用健康意外死亡的人大脑额叶皮层突触膜作为受体源，３Ｈ－谷氨酸和３Ｈ－ＭＫ８０１作为标记配体在体外研究了人脑皮层ＮＭＤＡ受体的特性及有机磷毒剂对受体结合的影响。人大脑皮层膜与３Ｈ－谷氨酸有一特异性的可饱合性结合。特异性结合表现为单一结合位点，ＫＤ值和Ｂｍａｘ值分别为１０３ｎｍｏｌ／Ｌ和１．６７ｐｍｏｌ／ｍｇ蛋白。谷氨酸受体激动剂对人大脑皮层与谷氨酸结合的抑制强度依次为Ｌ－Ｇｌｕ＞ＤＬ－Ｇｌｕ＞ＫＡ＞ＮＭＤＡ＞Ｄ－Ｇｌｕ。谷氨酸受体亚型拮抗剂ＡＰ５和ＤＮＱＸ（１μｍ…