兔双侧下颌骨牵张成骨实验动物模型的建立

目的:建立兔双侧下颌骨牵张成骨实验动物模型。方法:选用16只成年雄性新西兰大白兔,随机分为4组,每组4只。在双侧下颌骨第一前磨牙前方无牙区行骨切开术,用自制牵张器固定。经过7d潜伏期,以每次0.5mm的速度牵张,每天2次,连续7d。分别在潜伏期末、牵张结束、固定期第14天、第28天处死动物,切取标本行X线和组织学观察。结果:全部动物的下颌骨被成功延长,牵张间隙逐渐被新生骨组织充填。结论:该方法建立的动物模型具有可行性和可重复性。     

牙髓培养细胞特性与牙髓干细胞定位

目的 比较人牙根髓与冠髓培养细胞的特性，探讨牙髓干细胞在牙髓中的定位。方法：用组织块法分别培养人根髓、冠髓细胞，观察并比较两者的培养成功率、细胞贴壁率、细胞活性、增殖特性、细胞形态以及细胞诱导矿化能力，以探讨牙髓干细胞在牙髓组织中的定位。结果：培养的根髓细胞比冠髓细胞具有较高的成功率和贴壁率、较强的细胞活性以及相同的增殖活性，根髓细胞比冠髓细胞的形态更具有原始性，根髓比冠髓更易诱导矿化。结论：牙髓干细胞可能存在于全部牙髓之中，在根髓中比冠髓中具有更高的密度．     

低温保存成骨细胞复合生物活性玻璃陶瓷修复兔下颌骨缺损

目的 观察经低温保存的兔骨膜源性成骨细胞(POBs)的生物学特征,及其与生物活性玻璃陶瓷(BGC)体外复合后修复颌骨缺损的能力。方法 将经鉴定的幼兔骨膜源性成骨细胞置入液氮罐中保存,取冻存6个月的细胞做生物学鉴定,并进行体外培养扩增,然后与BGC复合培养,植入兔下颌骨缺损处,对照组为植入单纯BGC组。术后第2、4、8、12周取材,行X线摄片及组织学检查,观察复合材料的成骨能力。结果 复苏的成骨细胞仍具有典型的成熟成骨细胞的生物学特征,与BGC复合植入体内后,能继续生长增殖并形成骨组织,能较快较好地修复骨缺损。结论 利用冻存复苏的成骨细胞进行组织工程学研究是可行的,细胞与材料复合所形成的组织工程化骨,可望在骨组织的修复与重建中得到更加广泛的应用。     

液氮冻存降低成骨细胞免疫原性的实验研究

目的:探讨液氮冷冻(fluid nitrogen cryopreservation)对成骨细胞免疫原性的影响。方法:体外培养成骨细胞,传代鉴定后液氮冻存3个月,复苏。利用流式细胞仪(flow cytometry,FCM),通过间接免疫荧光技术测定冻存前后成骨细胞的免疫原性。同时采用成骨细胞、淋巴细胞混合培养(osteoblasts and lymphocytes mixed culture,OLMC)的方法,测定液氮冷冻对成骨细胞免疫原性的影响。结果:体外培养细胞经鉴定为成骨细胞,液氮冻存3个月后存活率>90%。FCM及OLMC实验结果均表明冻存后成骨细胞的免疫原性显著降低(P<0.01)。结论:低温液氮冷冻是一种理想的降低成骨细胞免疫原性的方法。     

牙髓细胞的原代培养方法探讨:冠部和根部牙髓的比较

目的 比较并建立冠部和根部牙髓细胞培养的理想方法一方法：自年轻、健康的人牙中取出完整牙髓，分别应用组织块法和组织块酶解法(0.1％I型胶原酶)对冠、根部牙髓进行原代细胞培养，通过对细胞培养成功率、细胞贴壁率和细胞活性的评估，确定用于根、冠髓细胞培养的理想方法一结果：组织块法比组织块酶解法具有较高的成功率．游出细胞具有较高的生长活性和较低的贴壁率.结论 在对根、冠髓细胞的原代培养中，组织块法优于组织块酶解法。本实验建立了冠、根部牙髓细胞原代培养的理想方法.     

血管内皮生长因子在人牙髓中的表达

目的：研究血管内皮生长因子（ vascular endothelial growth factor VEGF） 在正常、深龋或炎症牙髓中的表达及其意义。方法：采用免疫组化SABC法，对牙髓中的VEGF的表达进行组织学定位，并通过Image pro-plus 5.1图像分析软件对成牙本质细胞和牙髓成纤维细胞中VEGF染色进行平均光密度值（optical density OD）测定。利用SPSS13．0统计软件对各组数据进行单因素方差分析或秩和检验。结果：人牙髓中，VEGF主要表达在血管内皮细胞、成牙本质样细胞和牙髓成纤维细胞的胞浆中。正常组成牙本质细胞的VEGF表达较其它两组弱（P〈0.01）。与正常组相比，牙髓成纤维细胞中VEGF的表达在深龋组明显增强（P〈0．05），而在炎症组明显减弱（P〈0．05）。此外，VEGF在炎症组的某些炎细胞如中性粒细胞、浆细胞的胞浆中也有表达。结论：VEGF在龋病、牙髓炎中的变化可能与牙髓炎的发生、炎症发展有关，并且可能参与了成牙本质样细胞对牙髓损伤的修复过程。     

地鼠颊囊癌变过程中HIF-1α、iNOS的表达及意义

目的：研究口腔黏膜癌变过程中HIF-1α、iNOS的表达及意义。方法：建立金黄地鼠颊囊癌变模型，应用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法测定地鼠颊囊癌变过程中HIF-1α、iNOS；mRNA的表达。结果：HIF-1α mRNA在重度异常增生组和鳞癌组出现表达，二者间表达阳性率（44％，68％）无显著性差异（P〉0．05）；其他各组均未检测到HIF-1α mRNA的表达。iNOS在异常增生组和鳞癌组异常高表达，其中轻度、中度异常增生组与鳞癌组间有显著性差异（P〈0．05），重度异常增生组与鳞癌组间无显著性差异（P〉0．05）。结论：HIF-1α的过度表达是黏膜癌变过程中的早期行为，早于组织学上的血管形成和浸润。HIF-1α、iNOS相互协同促进口腔黏膜癌的发生与发展，检测组织中二者的表达将成为临床监测口腔黏膜癌变进展及判断预后的重要指标。     

液氮冻存前后成骨细胞免疫原性的对比

背景：低温冻存可以降低组织和器官的抗原性，而对细胞的影响，存在较大争论。目的：探讨液氮冷冻对成骨细胞免疫原性的影响。设计：随机对照，配对设计实验。单位：实验于2003—07／2004-03在山东大学附属齐鲁医院实验中心完成。材料：4只新西兰大白兔，雌雄不限。3H—TdR由山东大学核医学教研室提供。方法：于兔胫骨骨膜取材，体外原代培养成骨细胞，传代鉴定后液氮冻存3个月，复苏。设新鲜培养细胞为未冻存组，冻存3个月后复苏细胞为冻存组。利用流式细胞仪，通过间接免疫荧光技术测定冻存前后成骨细胞主要组织相容性复合体（majorhistocompatibmty complex—I，MHC—I）抗原阳性率。同时建立成骨细胞、淋巴细胞混合培养模型，利用B液闪计数仪测定每分钟闪烁数，计算淋巴细胞刺激指数。主要观察指标：冻存前后成骨细胞MHC—I抗原阳性率及淋巴细胞刺激指数。结果：未冻存组成骨细胞MHC—I抗原阳性率和刺激指数明显高于冻存组，差异有显著性意义（P〈0．01）。结论：液氮冻存后成骨细胞免疫原性显著降低，低温液氮冷冻是一种理想的降低成骨细胞免疫原性的方法。     

腺病毒介导的人骨形成蛋白2基因转染促进下颌牵张成骨的实验研究

目的探讨局部应用腺病毒介导的入骨形成蛋白2（adenovirus vectors containing human bone morphogenetic proteins 2, Ad-hBMP-2）对兔下颌骨牵张成骨的影响。方法24只新西兰大白兔随机分为实验组（12只）和对照组（12只），并建立下颌骨双侧牵张成骨模型。经过5d潜伏期后，以0．5mm／12h的速度牵张7d。固定期第1天，在实验组骨牵张区注射0．2ml滴度为10^12pfu／L的Ad-hBMP2，对照组骨牵张区注射0．2ml滴度为10^12pfu／L的腺病毒介导的增强型绿色荧光蛋白。在固定期第7、14、28天对下颌骨牵张区进行骨密度及新生骨量比较。结果Ad-hBMP-2治疗组牵张区骨密度及新生骨量明显高于对照组。结论腺病毒介导的人骨形成蛋白2具有促进兔下颌牵张成骨的作用。     

液氮冷冻对成骨细胞免疫原性影响的实验研究

目的 :探讨液氮冷冻对成骨细胞免疫原性的影响。方法 :体外培养成骨细胞 ,传代鉴定后液氮冻存 3个月 ,复苏。利用流式细胞仪 (FCM ) ,通过间接免疫荧光技术测定冻存前后成骨细胞的免疫原性。结果 :体外培养细胞经鉴定为成骨细胞 ,液氮冻存 3个月后存活率 >90 %。FCM测定结果表明冻存后成骨细胞的免疫原性显著降低 (P <0 .0 1)。结论 :液氮冷冻是一种理想的降低成骨细胞免疫原性的方法