SARS-CoV抗体实验诊断的特异性研究

为探讨严重急性呼吸综合征(SARS)病毒(SARS-CoV)抗体在SARS病原学诊断中的特异性，应用酶联免疫吸附试验(ELISA)和荧光定量RT-PCR技术检测了80例非SARS患者SARS-CoV抗体的阳性率。结果在23例健康人中，SARS-CoV-IgG抗体的阳性率为8．7％(2／23)，20例肿瘤患者中，阳性率为20％(4／20)；18例自身免疫性疾病患者中，SARS-CoV-IgM抗体和SARS-CoV-IgG抗体阳性率分别为11．1％(2／18)和22．2％(4／18)；19例系统性红斑狼疮(SLE)患者中，SARS-CoV-IgM抗体和SARS-CoV-IgG抗体阳性率分别为21．1％(4／19)和47．4％(9／19)，SARS-CoV-IgG抗体和SARS-CoV-IgM抗体同时阳性率为15．8％(3／19)。证实SARS-CoV-IgM抗体诊断SARS的特异性为92，5％；SARS-CoV-IgG抗体诊断SARS的特异性为76．25％；两种抗体同时阳性诊断SARS的特异性为96．25％。经RT-PCR证实上述抗体单项阳性均为假阳性。认为两种抗体同时测定可提高诊断的特异性，出现假阳性的原因可能与包被的抗原中存在细胞膜、胞浆、核和抗细胞核成分的自身抗体有关。     

TNF-α对白血病K562及K562/ADM细胞hTERT及mdr1表达的抑制作用

目的:观察TNF-α对人髓系白血病细胞K562及其耐药细胞K562/ADM hTERT基因表达、端粒酶活性的抑制以及对多药耐药(multidrug resistance-1,mdrl)基因表达的影响。方法:K562及K562/ADM细胞传代培养,加入5×10~6U/L的TNF-α培养24h进行诱导实验;MTT法检测K562和K562/ADM细胞的增殖能力,流式细胞术检测K562和K562/ADM细胞的凋亡,RT-PCR检测hTERT和mdrl mRNA的表达,ELISA法检测端粒酶活性。结果:TNF-α诱导K562及K562/ADM细胞表现持续的生长抑制作用,且具有时效关系(P<0.05);TNF-α诱导K562及K562/ADM细胞的凋亡率增加(P<0.05),而且耐药细胞K562/ADM凋亡的增加更明显(P<0.01);hTERT基因与端粒酶活性的表达密切相关(r=0.983,P<0.05),TNF-α诱导后两者也同时下调(P<0.01);多药耐药mdrl基因伴随着hTERT基因的下调而下调(r=0.966,P<0.05)。结论:TNF-α能诱导白血病K562及K562/ADM细胞系hTERT基因表达的抑制,端粒酶活性下调的同时多药耐药基因mdrl的表达也下调。     

实体瘤患者外周血造血干细胞的动员与保存

目的 :探讨一种适于晚期恶性肿瘤治疗的自体外周血造血干细胞移植方法。方法 :单用rG -CSF(75μg,q12h×2d)作动员剂 ,用血细胞分离机一次性收集单个核细胞(MNC),4℃贮存。观察WBC、MNC计数、细胞活力及细胞分类 ;用流式细胞仪进行细胞表型检测。结果 :小剂量rG -CSF动员后 ,外周血WBC达(18.71±6.54)×109/L。一次可收集MNC(1.87±0.66)×108/kg。CD34、CD14、CD3 及CD22 细胞分别为4.39 %、3.85 %、4.63 %及3.76 %。CD34 细胞平均约为8.2×106/kg。4℃贮存48～56小时MNC存活率为94.3 %。结论 :对实体瘤尚无骨髓转移的患者 ,用此方法可获得足以重建造血功能的干细胞。     

系统性红斑狼疮患者辅助T细胞和细胞毒T细胞亚群的变化及临床意义

系统性红斑狼疮(SLE)发病过程中存在T细胞亚群功能失衡和细胞因子网络失调,但各细胞亚群在SLE发病机制中的作用,尚无统一认识。本研究利用荧光标记流式细胞术,检测SLE患者不同时期外周血辅助T细胞(Th) 1/Th2、细胞毒T细胞(Tc) 1/Tc2 ,以探讨SLE患者外周血Th1/Th2、Tc1/Tc2的变化及与SLE活动性的关系。一、对象和方法1 对象:SLE患者30例,女2 9例,男1例,年龄17～4 8岁,均符合1982年美国风湿病学会修订的SLE诊断标准,采用1992年欧洲SLE活动性评分标准[1] 分组,其中,活动性SLE患者未用皮质激素18例,非活动性SLE 12例。正常对照…     

评价自身抗体联合检测在诊断自身免疫性疾病中的应用

目的探讨检测抗核抗体（ANA）核型与抗可提取性核抗原（ENA）抗体及抗双链DNA（ds,DNA）抗体之间的相关性,提高对自身免疫性疾病（AID）的诊断及鉴别诊断参考价值。方法资料来源门诊及住院的AID病例血清标本进行检测,ANA检测采用问接免疫荧光法（IIF）,抗ENA抗体检测采用欧蒙斑点法（抗nRNP／SIn、Sm、SSA／Ro、SSB／Lo、Scl-70和Jo—1）六项抗体及抗（ds—DNA）抗体采用ELISA法检测。结果在98例ANA阳性病例血清标本中核型分布为：细胞核均质型（36．74％）,细胞核颗粒型（41．84％）,细胞核仁型（11．22％）,细胞核膜型（1．02％）,细胞核着丝点型（1．02％）;重叠核型中细胞核均质型／细胞核颗粒型（2．04％）,细胞核均质型／细胞浆颗粒型（6．12％）等。98例ANA与ENA同时阳性血清标本中42例抗双链DNA抗体阳性（42．86％）。36例均质型阳性样本中抗SSA／Ro抗体（24．48％）,抗SSB／Lo抗体（6．12％）,抗nRNP／Sm抗体（6．12％）。41例细胞核颗粒型阳性样本抗nRNP／Sm抗体（19．39％）,SSAfRo抗体（15．31％）,抗SSB／Lo抗体（6．12％）。ANA阳性可出现一种或多种自身抗体。结论ANA常见核型有：细胞核颗粒型,细胞核均质型及细胞核仁型。ANA均质型核型检出的抗ds-DNA抗体为主,且抗ds—DNA抗体含量与荧光强度成正比。ANA核型与抗ENA抗体二者之间有一定的相对应性。ANA及核型、抗ENA抗体和抗ds—DNA抗体的联合检测可明确诊断AID,而且利于判断患者血清中各种自身抗体与临床表现的关系。     

间充质干细胞治疗哮喘的研究进展

哮喘作为一种慢性炎症疾患,其发病率在世界范围内仍呈上升趋势。目前研究表明哮喘是多个免疫细胞参与的气道炎症与高反应疾病,其中CD4+T淋巴细胞在调控气道炎症中发挥主要作用。目前以糖皮质激素为首的抗炎药物联合长效β2受体激动剂为主的症状缓解药物作为一线治疗方案,并不能达到哮喘的理想控制效果及逆转哮喘病理改变,因此有必要寻求哮喘防治新方法。间充质干细胞是一类具有高度可塑性的细胞群体,除具有多向分化潜能外,还具有免疫调节作用。目前研究表明间充质干细胞可定植到肺组织并分化为肺上皮细胞,通过免疫调节作用,改善Th1/Th2失衡,上调Treg细胞数量,调控Th17比例等机制缓解哮喘病情。目前间充质干细胞治疗哮喘的大多数实验尚停留在动物实验水平,临床应用较少,间充质干细胞移植在临床中的应用尚面临巨大的挑战。     

IFA和ELISA在肿瘤患者血清SARS-CoV抗体测定中的对比分析

目的探讨酶联免疫吸附试验(ELISA)和间接免疫荧光法(IFA)检测严重急性呼吸综合征(SARS)冠状病毒(SARS-CoY)&体在SARS病原中诊断中的特异性及其在肿瘤患者血清中的假阳性问题。方法 应用ELISA和IFA检测了111例正常对照和40例肿瘤患者血清中SARS-CoV抗体的阳性率。结果在111例正常对照和40例肿瘤患者中,IgM抗体均阴性,IgG抗体在正常对照中的阳性率为3.6%(4/111),在肿瘤患者中的阳性率17.5％(7/40),IgC抗体诊断SARS的特异性为96.4％,两种抗体同时阳性诊断SARS的特异性为100％。经IFA检测,上述SARS-CoV抗体阳性者均为阴性。结论 IFA诊断SARS的特异性为100％,ELISA诊断SARS存在一定的假阳性。应用ELISA测定SARS-CoV抗体时,应同时测定两种抗体以降低诊断的假阳性率,提高诊断的特异性。     

血浆置换术治疗巨球蛋白血症1例

应用治疗性血浆置换术 (therapeuticplasmaexchange,TPE)治疗自身免疫性疾病已有报道[1] 。笔者采用TPE技术对巨球蛋白血症进行了系统治疗 ,取得了良好效果 ,现报告如下。1　临床资料患者 ,女 ,6 0岁 ,体重 6 9kg ,巨球蛋白血症病史 8年并糖尿病病史 3年 ,1998年 11月因紫癜 (双下肢为重 )半月而入院治疗 ,体格检查 :贫血貌 ,满月脸 ,眼睑轻度浮肿 ,视力减退 ,行路困难 ,皮肤见散在的淤点 ,双下肢为重 ,肝肋下 2cm ,脾肋下左侧卧位 2cm ,骨髓象报告 :巨球蛋白血症伴继发血小板减少。血常规检查WBC 2 .6× 10 9/L ,RBC 1.71× 10 12 /L…     

类风湿关节炎的诊治进展类风湿关节炎的实验室诊断

减少类风湿关节炎(RA)致残率的关键是早期诊断,而目前国际上通用的1987年RA分类标准只强调了RA的慢性特征及炎性靶关节的多发性和对称性倾向,是一个以临床表现为主的诊断标准.其中涉及到的X线和类风湿因子(RF)检查均不能作为早期诊断依据.由于RA早期临床表现复杂多变且不典型,故早期实验室诊断已成为临床研究的热点.