免疫球蛋白降解酶IdeS在大肠杆菌中的表达、纯化及功能鉴定

病原链球菌为逃避宿主的免疫反应,分泌一种可特异地裂解免疫球蛋白G的降解酶(immunoglobulin G-degrading enzyme of Streptococcus pyogenes, IdeS)。IdeS既可作为工具酶用于IgG的指纹分析,又可用于治疗与自身免疫反应相关的疾病。本研究基于质粒pCold构建了两种重组IdeS的表达载体,并在大肠杆菌Shuffle T7中进行异源表达,经亲和色谱纯化后检测其蛋白活性。结果表明N-端含有His6-标签的重组IdeS产量为4 mg·L^-1,其与抗体IgG1以1∶200 (m/m)在37℃反应30 min即可完全酶解。而N-端含有His6-标签且C-端含有硅胶亲和标签(SiBP)的重组IdeS产量为1.5 mg·L^-1,其与抗体IgG1以1∶20 (m/m)在37℃反应30 min才可反应完全。C-端融合肽对于IdeS产量与活性都有较大的影响,使其活性降低,不利于后续应用于药物研发。上述结果表明,本系统所表达的N-端含有His6-标签的IdeS重组蛋白具有较高的活性,完全能满足抗体类药物研发...     

施氏“整颈三步九法”联合导引功法治疗神经根型颈椎病36例疗效观察

目的观察施氏"整颈三步九法"结合导引功法治疗神经根型颈椎病的临床疗效,并与中医定向透药结合牵引治疗神经根型颈椎病做比较分析。方法选取上海市浦东新区陆家嘴社区卫生服务中心就诊的神经根型颈椎病患者72例,采用SPSS19.0统计软件随机数字产生法将患者按随机排号,分为治疗组与对照组,每组各36例,其中治疗组给予施氏"整颈三步九法"结合导引功法治疗,对照组采用中医定向透药结合牵引治疗;比较两组治疗效果之间的差异,评价治疗前后VAS评分和颈椎功能障碍指数(NDI)评估变化情况,并运用SPSS 19.0统计软件对数据进行统计分析。结果治疗组总有效率为94.44%,对照组总有效率为77.78%,两组疗效之间差异具有统计学意义(P0.05),治疗组疗效优于对照组。结论施氏"整颈三步九法"结合导引功法与中医定向透药结合牵引治疗神经根型颈椎病都有效,但施氏"整颈三步九法"结合导引功法治疗神经根型颈椎病的疗效较好。     

金振口服液抑制小鼠流感病毒性肺炎的药效及机制研究

目的 研究金振口服液抑制小鼠流感病毒性肺炎的药效及作用机制。方法 将ICR小鼠随机分为对照组、模型组,金振口服液高、中、低剂量（4.4、2.2、1.1 g/kg）组和磷酸奥司他韦胶囊（0.05 g/kg）组。除对照组外,其余各组小鼠滴鼻感染甲型H1N1流感病毒构建小鼠病毒性肺炎模型,测定各组小鼠存活时间和肺指数;苏木素–伊红（HE）染色法观察肺组织病理变化;流式细胞术检测外周血CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺ T淋巴细胞水平;ELISA法检测血清及肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）及白细胞介素-10（IL-10）水平;Western blotting法检测肺组织Toll样受体3（TLR3）、β干扰素TIR结构域衔接蛋白（TRIF）和核转录因子-κB（NF-κB）蛋白表达。结果 与模型组相比,金振口服液给药组和磷酸奥司他韦胶囊组能显著延长小鼠存活时间,降低肺指数（P＜0.05、0.01）;减轻肺组织病理损伤;显著上调外周血CD3⁺、CD4⁺ T淋巴细胞水平及CD4⁺/CD8⁺值,下调CD8⁺ T淋巴细胞水平（P＜0.05、0.01）;明显降低血清及肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1β和IL-6水平,升高IL-10水平（P＜0.05、0.01）;显著抑制肺组织TLR3、TRIF及NF-κB蛋白表达（P＜0.05、0.01）。结论 金振口服液能够延长病毒性肺炎小鼠存活时间、降低肺指数,减轻肺部炎性损伤,其抑制小鼠流感病毒性肺炎的机制可能与抑制TLR3/TRIF信号传导、调节抗炎–促炎失衡和改善T细胞免疫有关。     

新型冠状病毒肺炎定点医院护理质量和安全管理

目的总结新型冠状病毒肺炎定点医院护理质量与安全管理经验,为应对突发公共卫生事件提供借鉴。方法将肿瘤中心改建为符合收治新型冠状病毒肺炎患者标准的定点医院,设14个病区850张床位;与援鄂医疗队共同成立联合护理部,制定护理工作制度和规范,建立护理安全事件处理流程,构建护理质量评价指标;严格督导与质控。结果累计收治患者1 022例,治愈出院763例;三级护理质量控制检查合格率为100%;隔离病区医护人员零感染。结论构建统一的制度、工作流程及质量与安全管理标准,有利于多团队协作工作及同质化管理,从而提高工作效率和质量,确保患者安全。     

基于外泌蛋白质组的酿酒酵母信号肽元件的分析及鉴定

目的分析鉴定酿酒酵母细胞内源性地促进重组蛋白外泌表达的信号肽元件,并应用于重组蛋白的高效合成。方法利用生物信息学软件SignalP4.1、Phobius、Wolf Psort0.2和ProP1.0对已报道的酿酒酵母外泌蛋白质组所对应的信号肽进行计算分析,确定目标信号肽功能元件;再构建融合表达载体,转化酵母细胞,对获得的阳性克隆在摇瓶培养条件下外泌蛋白的表达进行测定验证。结果通过生物信息学分析,从酿酒酵母外泌蛋白质组中确定了16个含有prepro区的信号肽功能元件,以敲除外切β-(1,3)-葡聚糖酶1(EXG1)基因的酿酒酵母W303-1b/(35)ES为宿主菌,采用酵母α-交配因子的信号肽功能元件作为对照,由EXG1的信号肽功能元件引导外泌的融合蛋白活性是α-交配因子的3倍。结论组合外泌蛋白质组和生物信息学分析的研究策略可以快速准确地分离鉴定促进异源蛋白分泌表达的信号肽功能元件,可应用于生物活性蛋白的高效表达。     

腕踝针结合中药离子导入技术治疗肩周炎疗效观察

目的观察腕踝针结合中药离子导入技术治疗肩周炎的临床疗效。方法在上海市陆家嘴社区卫生服务中心对180例肩周炎患者开展腕踝针结合中药离子导入治疗与单用腕踝针或中药离子导入法治疗疗效的比较观察,比较分析三者临床症状缓解程度、病程和治疗费用等,评价联合治疗方法对肩周炎治疗的有效性与安全性。结果 3组治疗后及结束治疗后1个月、3个月和6个月随访数据显示,联合治疗组治愈率明显高于单独治疗组(P<0.01),病程有一定程度缩短(复发率低)结论腕踝针结合中药离子导入治疗肩周炎,能有效改善症状,并较单独疗法能有效缩短疗程。     

推拿结合膝关节外固定可调支具治疗48例老年膝骨关节炎的疗效观察

目的观察推拿结合膝关节外固定可调支具治疗老年膝骨关节炎的疗效,并与单纯采用膝关节外固定可调支具治疗做比较分析。方法将96例老年膝骨关节炎患者随机分为两组,对照组采用膝关节外固定可调支具治疗的方法,治疗组在对照组的基础上,采用推拿手法进行治疗。采用骨关节炎指数(WOMAC)量表分别在治疗前、治疗后2周、4周,对患者膝关节的疼痛、僵硬、功能是否丧失及总分等方面进行疗效评定。结果两组患者WOMAC各项指标评分与治疗时间相关,各时间点之间差异有统计学意义(P<0.01)。两组WOMAC各项指标评分比较差异亦有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论相较于单纯使用膝关节外固定可调支具治疗老年膝骨关节炎,推拿结合膝关节外固定可调支具疗法在治疗老年膝骨关节炎过程中,缓解疼痛的作用更为显著。     

“周末夫妻”如何避孕？

何谓“周末夫妻”？顾名思义，是指夫妻双方因为工作或求学而分居两地，只能一周或半个月才相聚一次。     

螺丝固位种植修复

种植修复方式多样,方法灵活,在种植固定修复中,无论是桥修复还是单冠修复都可以采用粘结式和螺丝固位式固位方式。粘结修复简单方便,与常规修复方式接近,螺丝固位对种植外科、种植修复体加工要求较高。本次交流主要阐述种植修复的两种主要方式的利弊,重点讨论螺丝固位种植修复的适应证及临床操作要点。     

系统化健康教育路径表在肿瘤PICC患者中的应用

目的探讨系统化健康教育路径表在肿瘤PICC患者中的应用。方法选择本科2017年3月至2017年10月同意行PICC置管化疗患者160例,按照PICC穿刺顺序进行分组,将编号为单号的设为观察组,编号为双号的设为对照组,每组80例。对照组采用传统的口头健康教育模式,观察组在对照组的基础上采用系统化健康教育路径表向患者实施PICC健康教育。结果观察组在日常导管观察、维护依从性、导管管理信心、异常情况处理、信息获取、带管运动、导管日常生活方面得分明显高于对照组(P0.01);观察组的感染、静脉炎、导管滑脱早期并发症发生率明显低于对照组(P0.05)。结论采用系统化健康教育路径表可提高肿瘤PICC患者的自我管理能力,从而有效降低PICC置管患者早期并发症的发生率。