大鼠血清淀粉样物质P(SAP)基因的克隆及重组腺病毒制备

目的:制备能够表达大鼠血清淀粉样物质P(Serum amyloid P component,SAP)的重组腺病毒.方法:采用RT-PCR扩增的方法获取大鼠SAP,并将该基因采用定向克隆的方法克隆进入穿梭质粒pAdTraee-TO4中,进一步采用同源重组的方法将该质粒和腺病毒骨架质粒Adeasy-1在大肠杆菌BJ5183中同源重组,然后用脂质体介导的方法导入包装细胞HEK293中,产生表达目的基因的重组腺病毒,扩增病毒后用倍比稀释法测定其滴度.结果:通过PCR技术从重组穿梭质粒和重组腺病毒质粒中扩增出700 bp左右插入片段,测序结果和基因库中的基因序列一致.扩增后的重组腺病毒滴度为2.8×108pfu/ml.结论:成功构建了携带SAP基因的重组腺病毒载体Adeasy-1-SAP.为探讨SAP对肺纤维化的作用及其机制打下基础.     

探讨经皮给药治疗仪辅助治疗小儿腹泻的护理方法

目的:对经皮给药治疗仪辅助治疗小儿腹泻的护理方法进行分析和探讨.方法:选取本院在2015年3月～2016年5月期间收治的100例腹泻患儿,根据随机双盲原则将患儿分为观察组和对照组两组,给予两组患儿相同的常规基础治疗和护理干预,在此基础上,再给予观察组患儿经皮给药治疗仪辅助治疗以及针对性的优质护理,比较两组患儿临床治疗效果和护理效果.结果:观察组患儿止泻、体温恢复以及脱水纠正所用时间显著短于对照组患儿(P＜0.05),治疗总有效率显著高于对照组患儿(94.00％ vs 76.00％,P＜0.05);观察组患儿家属满意度显著高于对照组患儿家属(96.00％ vs 70.00％,P＜0.05).结论:经皮给药治疗仪辅助治疗小儿腹泻是提高患儿治疗效果的有效途径,针对性的优质护理干预是确保临床疗效的基础和关键.     

肥胖哮喘动物模型的建立

目的 探索在高脂饲料诱导肥胖基础上建立哮喘动物模型,并对模型进行评估.方法 40只清洁级雌性3周断乳C57BL/6J小鼠按随机数字表法分为4组,每组10只.分别进行普通饲料喂养 NS致敏激发(A组);普通饲料喂养 OVA致敏激发(B组);高脂饲料喂养 NS致敏激发(C组);高脂饲料喂养 OVA致敏激发(D组),比较各组肥胖和哮喘评价指标.结果 ①C、D组体质量、体长、Lee's指数、肝脏质量、肝脏/体质量均明显大于A、B组(P＜0.05).②A、C组小鼠肺组织无炎症改变,B、D组炎症浸润明显,其中D组更甚.③支气管肺泡灌洗液细胞总数、嗜酸性粒细胞比例D组明显高于各组,B组明显高于A组(P＜0.05).④B、D组支气管肺泡灌洗液中IL-4分别较A、C组明显升高(P＜0.05),IFN-γ则明显降低(P＜0.05),D组IL-4/IFN-γ明显高于B组(P＜0.05).结论 用不含致敏原的自制高脂饲料喂养,采用OVA致敏、激发C57BL/6J小鼠成功建立了肥胖哮喘模型.     

针刺膝痛穴对膝关节内侧副韧带Ⅲ度损伤患者疼痛缓解及膝关节功能恢复的影响

目的：观察针刺膝痛穴对膝关节内侧副韧带损伤患者疼痛缓解及膝关节功能恢复的影响。方法：将90例膝关节内侧副韧带Ⅲ度损伤患者随机分为治疗组与对照组各45例,对照组采用韧带缝合术治疗,治疗组给予针刺膝痛穴治疗。治疗4周后,观察2组治疗前后膝关节lysholm评分、疼痛视觉模拟评分法（VAS）评分及膝关节外翻应力位关节间隙的变化情况,并比较2组临床疗效及治疗安全性。结果：治疗组总有效率93.3%,高于对照组75.6%(P<0.05)。与同组治疗前比较,治疗1周、2周、4周2组膝关节lysholm评分逐渐升高（P<0.05）,VAS评分逐渐降低（P<0.05）,膝关节外翻应力位关节间隙均减小（P<0.05）;与对照组治疗1周、2周、4周比较,治疗组治疗同期膝关节VAS评分均较低（P<0.05）;与对照组治疗1周、2周比较,治疗组同期膝关节外翻应力位关节间隙均较大（P<0.05）。结论：针刺膝痛穴治疗膝关节内侧副韧带Ⅲ度损伤,能够取得良好的愈合效果,且安全性高。     

脐血8-异前列腺素与新生儿窒息及缺氧缺血性脑病的关系

目的探讨脐血8-异前列腺素（8-iso-PGF2a）评估晚期早产儿及足月新生儿窒息程度及窒息后缺血缺氧性脑病（HIE）的可靠性。方法收集轻度窒息的晚期早产儿及足月新生儿30例,重度窒息晚期早产儿及足月新生儿20例,30例同期产科分娩的正常晚期早产儿及足月新生儿作为对照组,以及生后3d内诊断为新生儿缺氧缺血性脑病的重度窒息患儿12例。用酶联免疫吸附法（ELISA）测定各组新生儿脐静脉血8-iso-PGF2a水平。结果窒息组与无窒息组相比,8-iso-PGF2a水平明显升高。两组比较,有统计学意义（t=5.898,P〈0.01）。与轻度窒息组相比,重度窒息组8-iso-PGF2a水平明显升高。两组比较有统计学差异（t=24.86,P〈0.01）。窒息组中发生新生儿缺氧缺血性脑病（HIE）与未发生HIE者比较,脐血8-iso-PGF2a显著升高,两组比较差异有统计学意义（t=4.97,P〈0.01）。结论脐血8-iso-PGF2a水平与晚期早产儿及足月新生儿窒息相关,晚期早产儿及足月新生儿窒息程度越严重,脐血8-iso-PGF2a水平越高,因此,脐血8-iso-PGF2a水平可用来评估晚期早产儿及足月新生儿窒息的短期预后。     

干细胞移植治疗脑瘫的研究进展

脑瘫是一种严重危害儿童健康的疾病.虽然其病因、发病机制及临床表现已基本明确,但关于脑瘫的治疗目前还没有比较理想的方法.干细胞移植最近几年已逐渐成为脑瘫治疗的热点,现就干细胞移植治疗脑瘫研究进展作一综述.     

355例哮喘患儿运动现况调查

目的 了解哮喘患儿参与运动的现状,为制定哮喘患儿适宜的运动处方提供依据.方法 采用问卷形式,对2008年9-12月到我院哮喘中心就诊的7岁以上哮喘患儿进行调查.结果 完成问卷调查355例.其中54.6%(194/355)的患儿认为运动会加重他们的哮喘;57.5%(204/355)的家长对患儿参加运动表现出担心;355例患儿中老师对他们患有哮喘知情的有222例,61.7%(137/222)的老师对哮喘患儿参加运动表现出担心;45.4%(161/355)的患儿在诊治中医生从未对如何参与运动进行过指导.调查患儿中65.6%(223/355)～89.6%(318/355)运动水平低于美国推荐的哮喘患者运动处方水平.在运动中出现过咳嗽、胸闷、呼吸困难、喘息者有77.7%(276/355),但有56.0%(199/355)只是偶尔出现以上症状.结论 哮喘患儿参加运动普遍不足,急需提高患儿、家长、老师及医生对参加运动的认识,并制定适宜的运动处方.     

角质形成细胞生长因子对肺上皮细胞的保护与修复作用

慢性肺间质病变是以肺泡单位慢性炎症和纤维化为主要病理特征的一组疾病,最终其肺部发生严重纤维化导致患者死亡,目前发病率呈逐年上升趋势,且病死率较高,严重影响患者的生命及生活质量.     

感觉运动训练联合皮层刺激对创伤性脑损伤大鼠平衡失调的改善作用

[目的]观察感觉运动训练联合皮层刺激对创伤性脑损伤大鼠平衡失调的改善作用。[方法]取SD大鼠100只,随机留取20只设为假手术组,其余80只建立创伤性脑损伤大鼠模型,将建模成功的72只大鼠随机分为模型组、感觉运动训练组、皮层刺激组和联合组,每组各18只。建模成功后,感觉运动训练组进行运动训练,皮层刺激组给予电刺激,联合组在每次给予电刺激后进行运动训练,干预时间均为4周;模型组和假手术组不进行任何干预。干预4周时,以平衡木测验评估各组大鼠的平衡功能,苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色进行伤侧海马区脑组织病理学检查,酶活性试剂盒测定伤侧大脑皮质中的脂质过氧化物丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time quantitative-polymerase chain reaction,RT-qPCR)及Western blot检测伤侧大脑皮质中核因子-κB抑制因子激酶2(inhibitor of nuclear factor-κB kinase 2,IKK2)、核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)p65、NF-κB p50 mRNA和蛋白及磷酸化NF-κB p65(NF-κB phosphatedp65,NF-κB p-p65)、磷酸化NF-κB p50(NF-κB phosphated-p50,NF-κB p-p50)蛋白相对表达量。[结果]与模型组比较,感觉运动训练组、皮层刺激组、联合组大鼠通过平衡木时间均缩短,但仍长于假手术组(P0.01);与感觉运动训练组及皮层刺激组比较,联合组大鼠通过平衡木时间缩短(P0.01)。HE染色显示,假手术组海马区脑组织细胞排列规则,核膜完整;模型组细胞排列松散,细胞出现明显坏死,核膜破裂;感觉运动训练组、皮层刺激组及联合组上述病理变化均减轻,且联合组减轻最为明显。与模型组比较,感觉运动训练组、皮层刺激组、联合组SOD活性增加,但仍低于假手术组(P0.05);与感觉运动训练组和皮层刺激组比较,联合组SOD活性增加(P0.05)。与模型组比较,感觉运动训练组、皮层刺激组、联合组MDA含量、IKK2mRNA和蛋白相对表达量及NF-κB p-p65/NF-κB p65、NF-κB p-p50/NF-κB p50降低,但仍高于假手术组(P0.05);与感觉运动训练组和皮层刺激组比较,联合组MDA含量、IKK2 mRNA和蛋白相对表达量及NF-κB p-p65/NF-κB p65、NF-κB p-p50/NF-κB p50降低(P0.05)。[结论]感觉运动训练联合皮层刺激对创伤性脑损伤大鼠的平衡失调具有改善作用,可能是通过抑制IKK2/NF-κB信号通路发挥作用。