PI3K／Akt信号通路在骨髓间充质干细胞增殖及成骨分化调控中的作用

目的：研究PI3K/Akt信号通路抑制剂LY294002对骨髓间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）增殖及分化的影响。方法采用贴壁法体外分离人骨髓间充质干细胞（hMSCs）,加入PI3K抑制剂LY294002（1、10μmol/L）,应用MTT法测定细胞增殖,常规成骨诱导分化培养3或7d,采用碱性磷酸酶（ALP）染色观察成骨分化水平,化学比色法测定ALP活性,茜素红染色后观察矿化钙结节数量并定量分析,Westernblot检测磷酸化Akt蛋白表达,应用Realtime-PCR检测各组细胞BMP2、Runx2、OPN及Osterix等成骨分化标记物的基因表达水平。结果从24至72h,LY294002对hMSCs增殖均产生显著抑制,随时间推延,可见抑制增殖效果增强（P＜0.05）。ALP染色和定量测定提示10μmol/L的ALP活性最强,在不同时间显著高于对照组和1μmol/L组（P＜0.05）。成骨诱导培养3和7d,1、10μmol/L组矿化量都显著高于对照组（P＜0.05）。10μmol/L组矿化量在成骨诱导7d也显著高于1μmol/L组（P＜0.05）。Westernblot检测结果证实成骨诱导可激活Akt磷酸化蛋白表达,但LY294002可抑制该蛋白磷酸化。成骨诱导分化7d,1、10μmol/L均明显促进BMP2、Runx2、OPN、Osterix4种基因mRNA表达（均P＜0.05）。结论PI3K/Akt信号通路参与hMSCs增殖和分化过程。成骨分化伴随下游Akt蛋白表达。PI3K抑制剂可抑制hMSCs增殖,但同时促进其向成骨分化和矿化。     

第2跖背动脉皮瓣移植修复单手指大面积软组织缺损

目的探讨第2跖背动脉皮瓣移植修复单手指大面积缺损的手术疗效。方法在解剖学基础上,采用第2跖背动脉皮瓣移植修复单手指大面积软组织缺损43例。结果43例皮瓣全部成活。术后随访6~10个月,移植皮瓣外形良好,质地、色泽良好,厚度适中。感觉恢复满意,两点分辨觉平均达5~8mm。结论应用以第2跖背动脉皮瓣移植修复单手指大面积软组织缺损,其血供可靠,手术简便、对供区破坏小,是一种值得推荐的方法。     

顽固性小儿先天性胫骨假关节手术治疗的改良

目的探讨顽固性小儿先天性胫骨假关节改良术式的临床治疗效果。方法1999年1月～2005年8月对顽固性小儿先天性胫骨假关节7例患儿，男5例，女2例，年龄2～11岁，采用带监测皮岛的游离腓骨移植，胫骨假关节切除及胫骨部分骨膜环剥，血管束植入的综合方法治疗。结果经1～4年的随访，平均1．5年，7例患儿假关节均已骨性愈合，其中4例已在支具保护下负重，3例完全不需支具保护负重。随访期间未出现再骨折现象。结论以最大限度的切除病变组织，改善局部血循环为中心的改良术式对于顽固性小儿先天性胫骨假关节的治疗有较好的疗效。     

神经植入对大段组织工程骨成骨效果的一年观察

目的 观察在组织工程骨内植入神经束后大段组织工程骨的长期成骨效果.方法 新西兰大白兔64只,随机分为四组:A组,单纯组织工程骨组;B组,运动神经束植入组(股神经肌支);C组,感觉神经束植入组(隐神经);D组,感觉、运动神经束联合植入组.每只动物均在左侧股骨制作长1.5 cm的段缺性骨与骨膜缺损,钢板固定后在骨缺损处分别植入四种方法制备的组织工程骨.术后1、3、6、12个月行大体观察、X线和组织学定量观察成骨情况. 结果 术后1、3、6个月时,在组织工程骨内植入感觉神经或联合植入两种神经后,比单纯组织工程骨和运动神经束植入的修复效果均有明显提高.术后12个月时,各组骨再生情况基本一致,但新生骨组织出现一定程度的吸收,其外观较正常股骨细,新生骨组织与兔股骨牢固愈合,并开始塑形且出现髓腔再通. 结论 在组织工程骨内植入感觉神经可促进成骨,而植入运动神经未见促进作用;组织工程骨可以修复兔大段骨缺损;该实验新生骨组织的吸收可能与模型的制作方法有关.     

下肢深静脉血栓形成后综合征手术治疗方法探讨

目的:探讨4种方法治疗下肢深静脉血栓形成后综合征的疗效。方法:对分别采用自体静脉移植、人工血管移植、对侧大隐静脉转流术、大网膜移植术治疗的下肢深静脉血栓形成后综合征的患者86例进行回顾性分析。结果:86例均取得良好效果,4种方法均取得较好疗效。结论:4种方法各有优缺点,应根据不同适应证及技术水平灵活选择。     

陈旧性Essex-Lopresti损伤1例

通过对1例陈旧性Essex-Lopresti损伤患者资料的回顾性分析,探讨Essex-Lopresti损伤的诊断需要仔细询问受伤机制,并考虑到下尺桡关节的合并损伤。其治疗原则是恢复或重建桡骨长度,同时复位并稳定下尺桡关节。     

神经肽在神经化组织工程骨中表达的早期实验研究

<正>随着骨组织工程研究深入以及向临床过渡的逐渐展开,一个主要的问题就是如何构建大块组织工程骨在体内存活并发挥功能作用。而神经系统在骨中的分布与功能的研究深入,为神经因素融入到组织工程骨的构建中来提供了理论依据和经验。     

单纯动脉型趾趾腹皮瓣修复拇指指腹缺损及存活机制探讨

介绍应用单纯动脉型趾趾腹皮瓣修复拇指指腹缺损,并对其存活机制进行探讨。作者认为此法是修复拇指指腹软组织缺损的较好方法。     

TRPV4在骨关节炎与正常软骨中的表达差异及意义

目的探索瞬时受体电位香草素受体4型通道蛋白(transient receptor potential vanilloid receptor 4,TRPV4)在骨关节炎(osteoarthritis,OA)软骨与正常软骨中的表达差异,为进一步研究其在OA防治中的作用提供理论依据。方法取膝关节OA患者软骨组织(OA组)与股骨颈骨折患者正常软骨组织(对照组)。其中,OA组男6例,女9例;年龄55~78岁,平均69岁;Kellgren-Lawrence(K-L)评分为(3.0±0.8)分。对照组男5例,女10例;年龄57~91岁,平均71岁。两组患者性别及年龄比较差异无统计学意义(P>0.05)。采用Western blot、实时荧光定量PCR、Masson染色以及免疫组织化学染色,观察并比较两组软骨组织中TRPV4蛋白及mRNA表达差异,以及软骨组织退变程度;分析OA组患者K-L评分与TRPV4阳性细胞率的相关性。结果OA组TRPV4蛋白及mRNA相对表达量分别为0.454±0.199、2.951±1.200,高于对照组的0.165±0.074、1.437±0.682,其中蛋白相对表达量组间差异有统计学意义(t=2.718,P=0.026)。组织染色显示,OA组软骨细胞排列紊乱,细胞外基质失去正常结构,局部软骨缺损可达深层,退变组织中可见较多TRPV4阳性细胞,阳性细胞率为37.353%±13.496%;对照组软骨细胞层次分明,阳性细胞率仅为9.642%±3.284%;两组阳性细胞率比较差异有统计学意义(t=7.491,P=0.000)。OA组TRPV4阳性细胞率与OA的K-L评分成正相关(r=0.775,P=0.001)。结论TRPV4在OA软骨组织中表达升高,且其表达升高与OA进展有相关性。     

带锁髓内钉术后骨不连原因分析及其预防措施

自1999年6月～2004年7月笔者采用带锁髓内钉治疗四肢长骨骨干骨折498例,发生骨不连14例,现就骨不连的原因进行经验总结和分析,并对预防措施进行探讨。1临床资料1.1一般资料本组498例,男312例,女186例;年龄18～64岁。闭合性骨折312例,开放性骨折126例(按Gustilo开放性骨折分类,G