成人单纯Arnold-Chiari畸形颅颈交界区CT参数测量

目的探讨不合并颅底凹陷的单纯Arnold-Chiari畸形(Arnold-Chiari malformation,ACM)颅颈交界区CT参数的变化。方法对40例成人单纯ACM和20例正常成人对照组头颈CT原始数据行正中矢状位重建,研究颅颈交界区CT线性及角度参数的变化。结果单纯ACM患者的斜坡长[(40.66±3.11)mm vs(43.44±3.34)mm,P<0.01]、齿突Chamberlain线间距[(1.23±2.41)mm vs.(1.25±2.29)mm,P<(0.001)]、齿突McRae线间距[(4.04±1.39)mm vs.(4.95±1.29)mm,P(<0.05)]、斜坡椎管角(147.93°±7.84°vs.157.33°±8.51°,P<0.001)、减压枕骨角(139.11°±10.14°vs.144.49°±8.03°,P<0.05)明显小于对照组,而斜坡McRae线角(130.82°±7.85°vs.124.60°±7.35°,P<0.01)、减压枕骨椎管角(127.71°±11.75°vs.118.86°±11.33±,P<0.01)明显大于对照组,差异具有统计学意义。结论成人单纯ACM斜坡长度较正常人明显缩短,枕骨大孔区附近枕骨倾斜角度明显增加。     

原代大鼠雪旺细胞在聚甲基丙烯酸甲酯电纺纳米纤维支架上的生长

目的 探讨原代大鼠雪旺细胞(SCs)在不同拓扑结构的聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)电纺纳米纤维上生长的特点,为后续在体研究提供基础.方法 构建具有随机或有序拓扑结构的PMMA电纺纳米纤维,并测定其生物相容性;利用PMMA薄膜组作为对照,利用慢病毒载体转染绿色荧光蛋白基因作为显色手段,分析SCs在随机及有序纤维支架上的细胞形态和生长方向,以及胞体及突起与纤维结构的依存关系. 结果 构建的PMMA电纺纳米纤维具有良好的生物相容性,SCs在随机及有序电纺纤维上均能顺利贴壁并生长;电纺纤维的拓扑结构能够影响SCs的细胞形态,与在PMMA薄膜及随机电纺纤维上相比,在有序纤维系统上的SCs能够形成更长且与纤维延伸方向一致的细胞突起(P＜0.01).相比随机电纺纤维,有序纳米纤维对原代SCs的生长更具引导作用. 结论 PMMA有序电纺纳米纤维具有作为神经损伤后植入性SCs支架的潜力.     

大鼠原代背根神经元和雪旺细胞在随机及有序排列聚甲基丙烯酸甲酯电纺纳米纤维上共培养的形态学

目的: 探讨聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)电纺纳米纤维支架的拓扑线索对于大鼠原代背根神经元(DRGn)培养及其与雪旺细胞(SCs)共培养的影响。 方法: 构建具有随机分布和轴向有序排列拓扑结构的PMMA电纺纳米纤维,分别为随机和有序PMMA电纺纳米纤维组,以PMMA薄膜作为对照组;分离纯化大鼠原代DRGn和SCs,与上述各组PMMA电纺纳米纤维共培养;利用慢病毒技术转染荧光蛋白基因作为显色方法,观察PMMA电纺纳米纤维的拓扑线索对于DRGn神经突生长的影响,在共培养实验通过荧光图像的快速傅立叶转换(FFT)及半高全宽值(FWHM)的计算,定量分析电纺纤维对DRGn神经突和SCs细胞突起的接触引导作用。 结果: 大鼠原代DRGn和SCs均能够顺利在PMMA材料上贴壁并生长;与PMMA薄膜组比较,随机和有序PMMA电纺纳米纤维组DRGn平均神经突数量及神经突长度差异无统计学意义(P>0.05);共培养实验中,电纺纤维的拓扑线索对于 DRGn神经突和SCs细胞突起的生长均具有明显的接触引导作用,与PMMA薄膜组和随机PMMA电纺纳米纤维组比较,有序PMMA电纺纳米纤维组DRGn和SCs的FWHM值均明显降低 (P<0.01),有序PMMA电纺纳米纤维能够在空间上促成DRGn神经突和SCs细胞突起建立共定位。 结论: 有序PMMA电纺纳米纤维具有作为脊髓损伤(SCI)后植入性支架材料的潜力,其拓扑线索有可能加速SCs的轴突髓鞘化过程。     

高压氧预适应对大鼠高原颅脑损伤的作用研究

目的探讨高压氧（HBO）预适应对高原颅脑损伤（TBI）的神经保护作用。方法将78只SD大鼠随机分为平原组、高原组和高压氧预适应组，各组按Feeney自由落体撞击法制作TBI模型，并通过低压氧舱模拟高原环境。采用Longa评分法进行神经功能缺损评分，Moor DRT4激光多普勒血流监测仪和LICOX CMP组织氧分压监测仪分别监测伤区局部脑血流（rCBF）和局部脑组织氧分压（PbtiO2）变化，利用光镜观察伤区脑组织的病理学改变。结果伤后24h高原组较平原组神经功能缺损评分上升。rCBF和PbtiO2下降，病理损伤加重；高压氧预适应组较高原组神经功能缺损评分下降（P〈0.05），rCBF和PbtiO2升高（均为P〈0.05）病理损伤减轻。结论高压氧预适应可诱导对高原颅脑损伤的神经保护作用改善神经功能。     

反义波形蛋白逆转录病毒对损伤的星形胶质细胞的作用

目的探讨重组反义波形蛋白cDNA逆转录病毒重组质粒对体外培养损伤的星形胶质细胞(astrocyte,AST)波形蛋白(vimentin)表达的影响.方法采用体外培养AST划伤模型,设实验组及对照组,通过免疫荧光、RT-PCR、Western blot等方法,研究反义波形蛋白逆转录病毒感染对损伤AST波形蛋白表达的影响.结果反义波形蛋白逆转录病毒使损伤AST生长抑制,突起回缩,波形蛋白mRNA及蛋白水平表达降低.结论反义波形蛋白可有效抑制体外培养损伤AST的生长及其波形蛋白的表达.     

聚甲基丙烯酸甲酯静电纺丝纳米纤维对大鼠原代星形胶质细胞生长的影响

目的 探讨聚甲基丙烯酸甲酯(polymethylmethacrylate,PMMA)电纺纳米纤维的拓扑线索对于大鼠原代星形胶质细胞生长能力及方式的影响,为脊髓损伤后植入性细胞支架的构建提供前期基础。方法 构建具有随机或有序拓扑结构的PMMA电纺纳米纤维;分离并纯化大鼠原代星形胶质细胞;利用PMMA薄膜作为对照,利用慢病毒技术转染绿色荧光蛋白基因作为显色手段,分析在星形胶质细胞不同拓扑结构纤维支架上的生长特点。结果 随机及有序PMMA电纺纤维均能支持星形胶质细胞的生长,其拓扑结构能够显著影响星形胶质细胞的生长方式,在有序纤维系统上细胞突起的生长方向能够和基质纤维的延伸方向保持高度一致;通过绿色荧光蛋白和基质纤维的合成图,发现在两种拓扑结构的纤维系统上,细胞突起均能依附在纤维上向远处延伸;较之PMMA薄膜,在有序纤维上的星形胶质细胞能生成更长的细胞突起(P<0.01),而在随机纤维上的细胞则形成更短的突起(P<0.01)。结论 PMMA电纺纳米纤维的拓扑结构能够显著影响大鼠原代星形胶质细胞生长能力及方式,其作为植入性支架具有减轻脊髓损伤后损伤灶胶质瘢痕形成的潜在价值。     

C5a受体拮抗剂对小鼠脊髓损伤后后肢功能的影响及作用机制

目的观察补体裂解因子C5a受体拮抗剂(C5a receptor antagonist,C5aRA)对小鼠脊髓损伤后炎症反应及功能变化的干预效果,探讨C5a在脊髓损伤后的作用机制。方法利用成年雌性C57BL/6J小鼠建立脊髓夹伤模型,在术前45 min经腹腔注入C5aRA AcF-[OP(D-Cha)WR](PMX53),同时建立甲基强的松龙(methylprednisolone,MP)注射组、生理盐水注射组和假手术组对照。应用ELISA、RT-PCR观察炎症因子TNF-α及IL-1β表达的变化,通过流式细胞方法检测小胶质细胞百分比的变化,并进行小鼠后肢的行为学评分(mouse scale for locomotion,BMS)。结果生理盐水组小鼠脊髓于伤后1 h即出现炎症因子的明显升高,TNF-α在1 h达峰值,IL-1β在12 h达峰值,后下降,到72 h两者均已接近基线值;小胶质细胞百分比在SCI后1 d即出现升高,3 d较明显,7 d达峰,14 d已下降,但仍高于正常水平。与生理盐水组相较,应用C5aRA特异性抑制C5a后,损伤早期的炎症因子表达水平及炎症细胞增殖均明显被抑制,BMS评分显著优于生理盐水...     

P38 MAPK在大鼠脊髓损伤后胶质瘢痕形成早期对GFAP、vimentin表达的调控作用

目的探讨在大鼠脊髓损伤(SCI)后胶质瘢痕形成早期,p38丝裂原活化蛋白激酶(P38 MAPK)对神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及波形蛋白(vimentin)表达的影响。方法将大鼠随机分为假手术组(sham group)、模型组(model group)、P38 MAPK特异性激动剂anisomycin组(anisomycin group)和P38 MAPK特异性抑制剂SB203580组(SB203580group)。脊髓夹伤模型制作成功后即分别在损伤区硬脊膜下注射0.9%氯化钠溶液、anisomycin和SB203580各10μL,假手术组只打开椎板暴露脊髓,不做其他处理。于术后第1、3、7及14天利用BBB评分评定大鼠后肢运动功能,用Western blot和免疫荧光标记技术检测GFAP和vimentin表达。结果术后第14天,模型组BBB评分显著低于假手术组(P0.01);SB203580组大鼠BBB评分显著高于模型组(P0.05)但仍低于假手术组(P0.01),而anisomycin组则显著低于模型组(P0.05)。术后第7和14天,模型组GFAP、vimentin的表达显著高于假手术组(P0.01);SB203580组GFAP、vimentin的表达均显著低于模型组(P0.05)但仍高于假手术组(P0.05),而anisomycin组GFAP、vimentin的表达均显著高于模型组(P0.05)。结论 SCI后胶质瘢痕形成早期P38 MAPK可调控GFAP、vimentin的表达,抑制P38 MAPK可降低GFAP、vimentin的表达,减轻大鼠SCI后胶质瘢痕形成,促进神经功能的恢复。     

应用前方压迫指数评价寰枢椎脱位和复位情况

目的推导和应用前方压迫指数评价寰枢椎脱位和复位情况。方法对28例对照组和28例寰枢椎脱位患者行CT检查,分析正常情况、寰枢椎脱位术前及术后的前方压迫指数的情况。结果 28例对照组的前方压迫指数为87.86±24.98;28例患者的术前前方压迫指数为230.44±97.60,术后前方压迫指数为106.27±73.53。患者术前组与对照组差异有统计学意义(t=-7.50,P0.0001),患者术后组与对照组相比没有统计学意义(t=-1.26,P=0.2171);术前术后两组差异有统计学意义(t=10.35,P0.0001)。结论前方压迫指数可作为了解寰枢椎脱位严重程度和行后路复位手术的减压情况的评价指标。