老鹳草素对小鼠骨髓基质干细胞成骨分化相关基因表达的影响

目的:观察老鹳草素对小鼠骨髓基质干细胞(BMSCs)向成骨细胞分化的影响,并对成骨分化过程中相关基因表达进行检测。方法:分离、培养小鼠BMSCs,加入不同浓度老鹳草素(1×10-9,1×10-8,1×10-7mol·L-1)培养,另设空白组,分别于成骨诱导第7,14天采用碱性磷酸酶(ALP),骨钙素(OCN)试剂盒测定ALP活性及OCN含量,并进行ALP染色。于成骨诱导第21天时采用茜素红染色检测成骨分化过程中钙结节形成数量,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白质免疫印迹(Western blot)检测BMSCs成骨分化过程中OCN,ALP,骨涎蛋白(BSP),Runt相关转录因子2(Runx2)mRNA和蛋白表达的变化。结果:与空白组比较,成骨诱导后第7,14天时,老鹳草素各剂量组ALP活性,OCN含量及ALP染色强度均明显升高(P0.05),成骨诱导第21天时,老鹳草素各剂量组矿化结节数量及OCN,ALP,BSP,Runx2 mRNA和蛋白表达均明显升高(P0.05)。结论:老鹳草素能够明显促进BMSCs向成骨方向分化,成骨相关基因OCN,ALP,BSP,Runx2均参与这一过程。     

芪苈强心胶囊多目标优化组合物对实验性心衰大鼠心功能的保护作用

目的 采用基于LARS算法的非线性多元回归方法预测最优变量组合,验证该组合的有效性,并进一步探讨芪苈强心胶囊对实验性心衰大鼠心功能保护的作用机制.方法72只Sprague Dawley (SD)大鼠随机分为6组,假手术组,模型对照组,阳性对照组,芪苈强心胶囊组合物(QLQX)低、中、高剂量组,连续7次给药后,结扎冠状动脉复制实验性心衰模型,4h后经右颈总动脉行左心室插管,测定左心室压峰值(LVP)等心功能指标;取血清测定超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH);取心肌组织Western Blot检测过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)γ的表达.结果与模型对照组比较,QLQX可提高左心室压力(LVP)(P＜0.05)、左心室内压最大上升速率(+LVdp/dtmax)(P＜0.05),降低左心室舒张末期压(LVEDP)(P＜0.05);还可提高SOD、GSH活性,降低MDA含量,QLQX高剂量降低幅度达20 ％(P＜0.01);Western Blot检测出QLQX的PPARγ表达增高,以高剂量作用显著.结论采用LARS算法得到的芪苈强心胶囊最佳配伍对实验性心衰大鼠心功能有改善作用,其作用与清除自由基、提高心肌细胞抗氧化能力有关.     

贯众的本草考证

经考证,汉代<本草经>记载的贯众具有蕨类植物特征,而魏晋文献所称"贯众"实为种子植物,六朝开始蕨类植物才成为药用贯众主流,其中,狗脊贯众Woodwardia japonica使用历史相对较久,占主流地位.     

连花清瘟胶囊对汽车尾气致小鼠肺组织病理损伤及炎症因子表达的影响

目的:观察连花清瘟胶囊(LHQW)对汽车尾气暴露致小鼠肺组织病理损伤及炎症因子表达的干预作用,探讨连花清瘟胶囊的作用机制。方法:75只健康SPF级雄性昆明种小鼠随机分为LHQW 2,4,8 g·kg-1剂量组,另设溶媒组、模型组,采用汽车尾气染毒柜染毒,同时,每天灌胃给药1次,连续14 d,末次染毒24 h后取肝素抗凝血,流式细胞仪检测白介素-4(IL-4),白介素-6(IL-6)的阳性表达率,取血清检测白介素-12(IL-12)含量,取肺组织苏木精-伊红(HE)染色观察病理改变,Western blot和实时定量PCR法分别检测肺组织里肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白介素-1β(IL-1β),IL-4,IL-6,IL-12,IL-13的蛋白及其mRNA表达。结果:HE染色后光镜下,与溶媒组比较,模型组可见支气管上皮肿胀,上皮细胞增生、坏死、脱落,肺泡内可见出血及渗出,血管周围可见水肿;与模型组比较,LHQW 4,8 g·kg-1组小鼠肺组织病理损伤明显减轻;LHQW 2,4,8 g·kg-1组血中IL-6阳性表达率分别为20.1%,17.6%,11.4%,远低于模型组的32.9%;与溶媒组比较,模型组肺组织里TNF-α,IL-1β,IL-4,IL-6,IL-12,IL-13蛋白和mRNA的表达均显著升高(P0.01);与模型组比较,LHQW 2,4,8 g·kg-1组肺组织中的TNF-α,IL-1β,IL-4,IL-6,IL-12,IL-13蛋白和mRNA均有不同程度的降低。结论:连花清瘟胶囊通过降低血液里炎性因子的含量,降低肺组织炎性因子的蛋白表达和mRNA的表达,从而改善汽车尾气造成肺组织的病理损伤。     

芪苈强心胶囊多目标优化后组合物对实验性心衰大鼠心肌细胞间连接的影响

目的采用基于LARS算法的非线性多元回归方法预测最优变量组合,验证该组合的有效性,并进一步探讨其对实验性心衰大鼠心肌细胞间连接的作用机制。方法 72只SD大鼠随机分为6组,假手术组,模型对照组,阳性对照组,芪苈强心胶囊(QLQX)低、中、高剂量组,连续7次给药后,结扎冠状动脉复制实验性心衰模型,4h后经右颈总动脉行左心室插管,测定左心室压峰值(LVP)等心功能指标;取心肌组织Western Blot检测心肌链接蛋白43(Cx43)的表达。结果与模型对照组比较,QLQX可提高左心室压力(LVP)(P<0.05)、左心室内压最大上升速率(+LVdp/dtmax)(P<0.05),降低左心室舒张末期压(LVEDP)(P<0.05);Western Blot检测出QLQX的Cx43表达增高,以高剂量作用显著(P<0.05)。结论采用LARS算法得到的最佳配伍对实验性心衰大鼠心功能有改善作用,其作用与保护心室的间隙连接通道、改善心脏收缩功能有关。     

双酚A对SD大鼠大脑皮层星形胶质细胞的影响及机制

目的:研究环境内分泌干扰物双酚A(BPA)对SD大鼠血-脑屏障成分表达及星形胶质细胞活力的影响并探讨其损伤机制?方法:通过MTT检测细胞活力,高效液相色谱法(HPLC)检测谷氨酸含量的变化,实时荧光定量PCR检测星形胶质细胞中Claudin-3?Claudin-4?Claudin-5?JAM-1?JAM-2?ZO-1?E-cadherin基因的表达?结果:10-7 mg/ml 的BPA与星型胶质细胞孵育24或48 h后即可引起细胞活力的下降,具有统计学差异?在该浓度的暴露下,血-脑屏障紧密连接相关蛋白Claudin-3?Claudin-4?JAM-1?E-cadherin 蛋白的mRNA水平下调,而Claudin-5?JAM-2?ZO-1蛋白基因表达上调且具有统计学意义;HPLC结果显示,谷氨酸的浓度上调?结论:环境内分泌干扰物BPA对血-脑屏障的完整性具有潜在的损伤作用?     

超微粉通心络对冠脉结扎致大鼠心肌梗死的保护作用及机制探讨

目的：观察超微粉通心络对大鼠实验性心肌梗死的影响，探讨其治疗缺血性心脏病的作用机制。方法：98只SD大鼠随机分为7组：假手术组、模型组、合心爽组(0.15 mg·kg^-1)、通心络原工艺组(1.2 g·kg^-1)、超微粉通心络组(1.2，0.6，0.3 g·kg^-1)。通过结扎冠状动脉制备大鼠心肌梗死模型，采用红四氮唑(TTC)染色法测定大鼠心肌梗死范围，同时测定大鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)；将60只Wistar大鼠随机分为6组，即正常组、阿司匹林组(0.15 mg·kg^-1)、通心络原工艺组(1.2 g·kg^-1)、超微粉通心络组(1.2，0.6，0.3 g·kg^-1)，观察药物对二磷酸腺苷(ADP)和胶原诱导大鼠血小板聚集影响。结果：超微粉通心络明显减小梗死区面积，超微粉高、中、低剂量组缺血面积分别为(2.7±2.1)%,(3.4±1.2)%,(2.8±1.8)%，与模型组(8.9±5.9)%相比P<0.05；超微粉高、中、低剂量组缺血质量百分比分别为(8.4±3.5)%,(8.7±4.1)%,(9.7±4.1)%，与模型组(12.2±3.6)%相比P<0.05，P<0.01。对心肌梗死引起的MDA,CK,LDH升高亦有明显抑制作用(与模型组比P<0.05或P<0.01)，同时可升高血清SOD活性(与模型组相比P<0.05)；超微粉通心络高、中、低剂量组ADP诱导的血小板最大聚集率分别为(26.9±9.2)%,(24.4±13.4)%,(30.6±12.2)%，与正常组(44.3±15.7)%相比P<0.05或P<0.01；超微粉通心络高、中、低剂量组胶原诱导的血小板最大聚集率分别为(33.8±6.9)%,(32.1±8.3)%,(41.5±7.8)%，与正常组(49.2±15.9)%相比P<0.05或P<0.01。结论：超微粉通心络对冠脉结扎引起的大鼠心肌梗死有明显的保护作用，其机制可能与其抗氧化作用及抑制血小板聚集有关。     

强心Ⅰ号方强心作用有效部位提取与分离

目的提取分离强心Ⅰ号方强心作用的有效部位。方法以大孔吸附树脂为分离材料，将强心Ⅰ号方组成药材的水提物、醇提物分别经蒸馏水，10％乙醇，30％乙醇，50％乙醇，70％乙醇，95％乙醇洗脱制得样品，然后通过离体蛙心试验观察受试样品的强心作用。结果水提物经30％乙醇，50％乙醇洗脱的样品和醇提物经30％乙醇，50％乙醇洗脱的样品对离体蛙心作用明显，其强心作用的半数有效浓度分别为：0．017g生药／ml，0．58g生药／ml，10．11g生药／ml，21．44g生药／ml。结论强心Ⅰ号方中各味药材的水提物经30％乙醇，50％乙醇洗脱的样品和醇提物经30％乙醇，50％乙醇洗脱的样品具有明显强心作用。     

芪苈强心胶囊对压力超负荷心力衰竭大鼠内皮损伤及能量代谢的影响

目的 探讨芪苈强心胶囊治疗压力超负荷心力衰竭的可能机制.方法 随机取SD大鼠15只为假手术组,采用升主动脉缩窄术建立压力超负荷心力衰竭大鼠模型,75只造模成功大鼠随机分为模型组、卡托普利组和芪苈强心高、中、低剂量组各15只.卡托普利组给予卡托普利片6.25mg/(kg·d),芪苈强心高、中、低剂量组分别给予芪苈强心胶囊1.0、0.5、0.25g/(kg·d),假手术组和模型组灌服等体积的0.5％羧甲基纤维素钠,各组连续灌胃6周.透射电镜观察心肌组织毛细血管超微结构,比较各组大鼠心肌组织三磷酸腺苷(ATP)、二磷酸腺苷(ADP)、一磷酸腺苷(AMP)含量,血管黏附因子1(ICAM-1)与内皮型一氧化氮合酶(eNOS)mRNA表达水平,AMP激活的蛋白激酶(AMPK)及其磷酸化AMPK (p-AMPK)蛋白表达. 结果 芪苈强心低、中剂量组及卡托普利组均显著增加心肌组织中ATP含量(P＜0.01),各给药组ADP明显升高(P＜0.01);芪苈强心高剂量组与卡托普利组ICAM-1mRNA表达降低、eNOS mRNA升高(P＜0.05或P＜0.01);芪苈强心低、中、高剂量组与卡托普利组p-AMPK蛋白表达均显著升高(P＜0.05或P＜0.01);各组大鼠心肌组织AMPK蛋白表达量差异无统计学意义(P＞0.05).结论 芪苈强心具有保护压力超负荷大鼠心肌毛细血管内皮的作用,同时提高心脏能量负荷水平、改善能量代谢,其作用机制可能与激活AMPK-eNOS通路有关.     

通心络对兔缺氧耐受性的影响

目的观察通心络对兔急性缺氧耐受性的作用。方法 24只新西兰大耳白家兔随机分为对照组、缺氧组和通心络组,先在11.4%氧环境下低氧实验,60min后进行密闭缺氧,观察兔密闭缺氧耐受时间,ELISA法检测血清缺氧诱导因子1-α(HIF-1α)的含量、Western blot法检测主动脉组织HIF-1α和血管内皮生长因子(VEGF)的蛋白表达。结果与缺氧前比较,缺氧组与通心络组血清HIF-1α含量明显增加(P<0.01或P<0.05)。与对照组比较,缺氧组和通心络组主动脉组织HIF-1α和VEGF表达明显增强(P<0.01或P<0.05)。与缺氧组比较,通心络组家兔密闭缺氧耐受时间明显增加(P<0.05),血清HIF-1α含量明显增加(P<0.01),主动脉组织HIF-1α表达增强,VEGF表达明显增强(P<0.05)。结论 HIF-1α和VEGF的表达增高可能是缺氧适应的一种机制,通心络能提高兔的缺氧耐受性,其机制可能与上调血清及组织的HIF-1α和VEGF有关。