用流式细胞仪测定母血中胎儿红细胞含量的新方法

本文介绍一种快速而准确地测量母血中胎儿红细胞含量的方法.它通过流式细胞仪检测母血中胎儿红细胞胞内的血红蛋白(HbF)和红细胞表面i抗原,可以特异地识别母血中胎儿红细胞.这对预防新生儿溶血症和优生优育具有重要意义.     

巨大血小板综合征的流式细胞术分析方法

巨大血小板综合征(bernard-Soulier syndrome, BSS)系常染色体不完全显性遗传的血小板膜糖蛋白(glycoprotein, GP)Ib-Ⅸ复合物(CD42b-CD42a)先天缺陷所造成的血小板病, 其特征是血小板形态巨大、功能异常[1,2].检测血小板膜上GPIb和GPIX复合物的缺陷可从分子水平上特异性诊断BSS.本文介绍用两种荧光-单抗直接标记外周全血, 通过多参数流式细胞术分析诊断BSS的方法.     

原位定量评价组织工程研究中细胞生长状态的新方法

目的探讨一种能原位定量评定细胞在高分子聚合物载体上生长情况的方法。方法采用CFDA-AM和PI双染结合激光扫描共聚焦显微镜技术,用平均荧光强度代表细胞数量,对组织工程骺软骨中骨骺软骨细胞在聚乳酸载体上1、2及3周时的死活细胞数量进行评价。结果骨骺软骨细胞在聚乳酸载体上的530nm的平均荧光强度随时间逐渐增加,而603nm的荧光强度在第2周时有所增加,而到第3周时则无明显增加。与细胞在载体上重量增加的结果一致。结论首次采用的原位定量检测载体上死活细胞的方法是可行的,解决了在不透明载体上即不影响细胞和载体结构,而可以原位快速定量评定细胞生长的难题。     

川芎总苯酞对家兔动脉粥样硬化的影响

目的观察川芎总苯酞对动脉粥样硬化的影响.方法采用高胆固醇喂饲四周另加牛血清蛋白一次注射的方法,导致家兔产生严重动脉粥样硬化模型,给药组连续给药两周,在试验结束时测定各组动物的动脉脂质斑块面积和胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、载脂蛋白AI、载脂蛋白B、SOD、LPO.结果与模型组比,川芎总苯酞连续两周给药,可降低动脉脂质斑块、胆固醇、载脂蛋白APOB、LPO、低密度脂蛋白和升高载脂蛋白APOAI、SOD的作用.结论川芎总苯酞具有抗动脉粥样硬化的作用.     

利用磁珠法结合MALDI-TOF MS进行慢性心衰气阴虚证血液蛋白质组学研究的方法学探讨

目的:建立磁珠法结合MALDI-TOF MS进行慢性心衰气阴虚证血液蛋白质组学研究的实验方法。方法:采用MALDI-TOF-MS技术检测不同磁珠分离的患者血液蛋白质谱,从采集、蛋白提取、反复冻融、重复性、基质样品比例等方面分析其影响。结果:血清质谱峰均多于血浆,弱阳离子磁珠出峰数量优于铜螯合磁珠,气阴虚证患者与健康组比较蛋白表达有明显差异。结论:该方法作为一种高通量、快速分离、制备和鉴定的蛋白质组学技术,整个实验体系稳定、可靠、重复性好,适用于中医证候蛋白质组学的研究。     

铽在生物活性分析中的应用

介绍了铽的理化性质，发光机理及其配体。综合了近扯为Ｔｂ＾３＋在酶放大系发光法、多标记的时间分辨荧光免疫分析，直接固相ＴＲＦＩＡ，核酸分子杂交分析，生物大分子结构检测等方面的应用。     

深低温停循环时不同脑保护方法对海马区神经元凋亡的影响

目的 通过观察海马区神经元的损伤情况，探讨深低温停循环(DHCA)时中枢神经系统损伤的机制及其保护方法。方法 北京农业大学实验用小型猪16头，体重22～25kg。鼻咽温降至18℃时分别给予如下处理90min：DHCA(I组)，顺行脑灌注(ACP，Ⅱ组)，逆行脑灌注(RCP，Ⅲ组)，RCP 尼莫地平(Ⅳ组)。复温120min至鼻咽温36℃。取左侧海马头部制备细胞悬液，AnnexinV—FITC染色，应用流式细胞仪分析细胞凋亡情况。电镜观察细胞超微结构的变化。结果 正常细胞百分比I组明显低于其他3组，Ⅱ组明显高于Ⅲ组，Ⅱ组、Ⅲ组与IV组之间差异无显著性；早期凋亡细胞百分比I组明显高于其他3组，Ⅱ组明显低于Ⅲ组，Ⅱ组、Ⅲ组与Ⅳ组之间差异无显著性；坏死细胞百分比I组明显高于其他3组，而其他3组之间差异无显著性；死亡细胞百分比I组明显高于其他3组，而其他3组之间差异无显著性(显著性界值P=0．05)。结论 DHCA后神经元发生凋亡、坏死和死亡，是术后神经功能障碍的主要原因；ACP使细胞凋亡和死亡减少，神经元保护作用最佳；RCP亦能使细胞凋亡和死亡减少，但神经元保护作用次于ACP；尼莫地平部分抑制了Ca^2 内流，脑保护效果一般。     

豚鼠耳蜗Hensen细胞的分离、活性鉴定及其胞内静态游离Ca~(2+)分布

使用酶消化法及机械分离法对 Hensen细胞进行分离 ,置于倒置显微镜下用碘化丙啶及钙敏荧光染料 Fluo-3进行细胞活性鉴定并在激光扫描共聚焦显微镜下观察静息状态 Hensen细胞内的游离 Ca2 +的时空分布。结果证明 ,每个豚鼠耳蜗可以得到单离的 Hensen细胞 5～ 12个。细胞活性良好 ,可保持 5～ 6h。当细胞变性、坏死时可见一系列的形态学变化。对此得出几点判断 Hensen细胞活性的标准 :(1)细胞体呈卵圆形或椭圆形 ,大小可不一致 ;(2 )细胞膜完整 ,细胞边界清楚 ,折光现象明显 ;(3 )细胞浆清澈透明 ,无布朗运动 ,无溢出 ;(4 )细胞浆内的脂滴清晰可辨 ,折光现象明显 ;(5 )细胞无水肿 (即无气球样变 )。在静息状态下 ,Hensen细胞内的 Ca2 + 在细胞内分布不均匀 ,脂滴所在部位没有 Ca2 + 的分布。随时间延长 ,细胞内的 [Ca2 + ] i可小幅度振荡 ,但基本处于一种稳定状态。本工作为进一步对 Hensen细胞的其他特性进行研究打下了基础     

铽在生物活性分析中的应用

介绍了铽（Ｔｂ３＋）的理化性质、发光机理及其配体。综述了近年来Ｔｂ３＋在酶放大镧系发光法（ＥＡＬＬ）、多标记的时间分辨荧光免疫分析（ＴＲＦＩＡ）、直接固相ＴＲＦＩＡ、核酸分子杂交分析、生物大分子结构检测等方面的应用。     

GAP基地川芎药材中苯酞类成分的监测

 目的 连续6年动态监测四川灌县徐渡等乡国家GAP示范基地川芎药材中的苯酞类成分,寻找其活性成分藁本内酯和川芎内酯的含量规律。方法 用HPLC测定不同年份产川芎的藁本内酯和川芎内酯的含量。结果 不同年份产川芎药材藁本内酯和川芎内酯的含量之和在1.5％～2.2％之间波动,藁本内酯和川芎内酯的比值基本固定(在2.3～2.6之间波动)。结论 四川灌县徐渡乡产川芎药材具有道地特性,主要苯酞类成分含量与配比基本稳定,为中药道地药材的质量评价和指纹图谱的建立提供了直接的依据。