体外琼脂糖三维培养肺腺癌细胞株A549的实验研究

目的:体外研究琼脂糖用于肺腺癌细胞株A549三维培养,并观察细胞在三维环境中的行为改变。方法:用琼脂糖作为三维培养基质,观察细胞在三维环境中的生长现象;黏附实验用以检测细胞对胞外基质的黏附率;MTT比色法检测细胞对DDP的药物敏感性和细胞增殖抑制率;流式细胞术检测细胞自然凋亡情况。同时比较二维及三维培养细胞的差异。结果:在琼脂糖中,A549细胞生长呈现球形的团块状生长,细胞团块大小不一,生长状态良好。随着细胞的增长,3D培养的A549细胞对DDP的抗药性增加,药敏性降低;二维和三维培养下的A549细胞黏附率存在显著差异;3D培养下的细胞自然凋亡明显减少。结论:A549细胞在琼脂糖三维培养中,其细胞行为与二维培养时发生显著改变,二者具有显著性的差异。因此,琼脂糖可用于构建A549三维培养模型,此模型可为进一步研究提供研究基础。     

三黄泻心汤对肥胖大鼠血清瘦素及胰岛素水平影响的实验研究

目的通过三黄泻心汤对肥胖大鼠体重、Lee’s指数、腹腔脂肪湿重及血清瘦素、胰岛素水平的影响,探讨清热解毒法对肥胖及瘦素、胰岛素抵抗的调整作用。方法给予高脂饮食建立营养性肥胖大鼠模型,将肥胖大鼠随机分为3组,分别给予三黄泻心汤(A组)、盐酸芬氟拉明(B组)和生理盐水(C组)灌胃,连续12周,每周测体重,试验末取血测血脂、血清瘦素及胰岛素。结果A组和B组大鼠体重分别为(387.8±12.1)g和(378.3±10.7)g较C组的(493.1±8.9)g低(P<0.05);腹腔脂肪湿重A组和B组也较C组低(P<0.01),且随喂养时间的延长体重变化趋势A组下降缓慢,B组亦下降,但试验末略有上升,C组体重继续增长。A组和B组血糖、胆固醇和低密度脂蛋白均较C组低,瘦素和胰岛素的变化A组和B组较C组亦低(P<0.05),且A组与C组血糖和胰岛素差异更大(P<0.01)。结论三黄泻心汤可能通过降低肥胖大鼠体重、血糖及血清瘦素、胰岛素水平而发挥调节血脂、改善瘦素和胰岛素抵抗的作用。     

加味孔圣枕中丹提高VD大鼠学习记忆能力及对脑细胞的保护作用研究

<正>目的:研究加味孔圣枕中丹对血管性痴呆(VD)大鼠学习记忆能力的影响及对脑细胞的作用。方法:用四血管阻断法制备VD大鼠模型。设立假手术组、模型组、加味孔圣枕中丹低剂量组(9.0g/kg·天,灌胃30天)和高剂量组(13.5g/kg·天,灌胃30天)。     

苍白二陈汤对代谢综合征模型大鼠脂肪组织NF-κB表达的影响

目的:观察苍白二陈汤对代谢综合征(MS)大鼠脂肪组织核转录因子-κB(NF-κB)表达的影响,探讨其治疗MS的可能机制。方法:用高糖高脂高盐饲料喂饲建立MS大鼠。将21只MS大鼠分为三组:模型组、西药组和中药组,分别给蒸馏水、洛伐他汀和苍白二陈汤灌胃。4周后,测体质量、血压、血糖、三酰甘油(TG)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),分别用免疫组化和PRC检测脂肪组织NF-κB/p65及其mRNA表达。结果:与模型组相比,中药组大鼠体质量、血糖、TG水平、脂肪组织NF-κB/p65mRNA和蛋白表达均显著降低(P<0.05)。结论:苍白二陈汤对代谢综合征大鼠有良好的治疗作用,其作用机制可能与减少脂肪组织NF-κB过度激活、抑制脂肪组织低度炎症有关。     

滋肾通络方对MCAO大鼠脑组织氨基酸递质含量的影响

目的:观察滋肾通络方对大脑中动脉闭塞MCAO大鼠脑组织氨基酸递质含量的影响.方法:例作MCAO大鼠模型,随机分为假手术组、模型组、中药高剂量组、中药低剂量组和西药组.灌胃20天后,取大鼠脑组织,匀浆,取上清液,用氨基酸分析仪检测各组Asp、Glu、Gly的含量.结果:模型组Asp、Glu、Cly的含量均升高,用药组的Asp、Glu、Gly的含量均降低.且中药组的下降趋势优于西药组.结论:滋肾通络方可降低兴奋性氨基酸的含量,从而对脑缺血损伤具有保护作用.     

泽泻汤对代谢综合征大鼠血清瘦素、血浆神经肽Y影响的研究

目的 观察泽泻汤对代谢综合征(MS)大鼠血清瘦素及血浆神经肽Y(NPY)的影响,探讨其治疗MS的可能机制.方法 用高糖高脂饲料喂饲建立MS大鼠.将23只MS大鼠分为3组,分别给盐水、泽泻汤、西布曲明.4周后,测体质量、血糖、TG,采用放射性免疫法检测血清瘦素、血浆NPY.结果 与盐水组相比,泽泻汤组大鼠体质量、血糖、TG、瘦素、NPY水平均显著降低(P＜0.05).结论 泽泻汤对代谢综合征大鼠有良好的治疗作用,其作用机制可能与纠正瘦素抵抗,降低血浆NPY有关.     

针刺对血管性痴呆大鼠脑内单胺递质的影响

随着人口老龄化问题的日趋严峻以及该病发病率的日益增高，老年性痴呆已成为世界范围内的一个医学研究热点。血管性痴呆（VD）是继阿尔茨海墨病（AD）之后第二位常见的痴呆原因，因此研究该疾病的治疗及其机制的问题也就显得日趋迫切。针刺治疗由于其见效快、施治方便等优势，越来越受到关注，但是关于其治疗作用及机制的研究罕见报道。本项目通过永久结扎双侧颈总动脉的方法复制大鼠血管性痴呆的模型，并在此基础上研究针刺对该模型大鼠脑内去甲肾上腺素（NE）、多巴胺（DA）和5-羟色胺（5-HT）的影响，以期在分子水平阐释针刺治疗血管性痴呆的作用及机制，从而为临床治疗提供理论依据。     

金匮泻心汤抗动脉粥样硬化的实验研究

目的 研究清热解毒经方金匮泻心汤的抗动脉粥样硬化作用。方法 以长期高胆固醇膳食喂饲的方法复制实验性动脉粥样爱化大鼠模型，研究方药对该模型大鼠血脂、血浆氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)、NO、氧自由基代谢相关指标及主动脉壁形态学的影响。结果 该方具有调脂、抗氧化、影响NO代谢、保护动脉内皮细胞以及抑制血管平滑肌细胞增殖等作用。结论 金匮泻心汤具有良好的抗动脉粥样硬化作用。     

补阳还五汤对动脉粥样硬化大鼠脑缺血再灌注损伤的影响

目的：探讨补阳还五汤对早期动脉粥样硬化（动粥）大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法：50只雄性Wistar大鼠随机分为（1）正常对照组，（2）非高脂手术组，（3）高脂假手术组，（4）高脂手术组，（5）补阳还五汤组5组，其中（3）、（4）、（5）组采用高脂饲料喂养，（5）组每天补阳还五汤灌胃，36例w后采用双侧颈动脉结扎，脑缺血45min，再灌注3d后检测血脂水平，脑组织丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）、一氧化氮合酶（NOS）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH－Px）的变化以及主动脉，脑组织的病理改变。结果：（1）高脂饲料喂养36w能形成早期动脉粥样硬化；（2）高脂手术组脑组织损伤较非高脂手术组严重且有显著性差异；（3）补阳还五汤能降低血脂水平，提高脑组织NOS、SOD、GSH－Px活性，并使病理改变明显减轻，结论：动脉粥样硬化可加重脑缺血再灌注损伤，补阳还五汤对粥大鼠脑缺血再灌注损伤有明显的保护作用。     

温下方联合顺铂对A549/DDP裸鼠移植瘤的抑制作用及对药物转运蛋白表达的影响

目的探讨温下方与顺铂(DDP)合用对肺癌多药耐药裸鼠模型皮下移植瘤生长的抑制作用及其相关机制。方法建立耐药特性稳定的肺腺癌移植瘤裸小鼠动物模型。温下方0.2ml(含生药0.4g)/10g体质量灌胃给药干预。观察温下方与顺铂合用对裸鼠移植瘤生长的影响;RT-PCR法检测多药耐药基因(mdr1)和多药耐药相关蛋白基因(mrp)mRNA表达;免疫组化法检测上述基因相应蛋白P-gp、mrp的表达。结果与顺铂干预组(DDP组)相比,温下方与顺铂联合应用组(WCF+DDP组)荷瘤裸鼠体重下降较慢(P<0.05),移植瘤体积和瘤重量明显下降,肿瘤生长速度较缓(P<0.05),移植瘤中mdr1、mrpmRNA及P-gp、mrp蛋白的相对表达量均显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论温下方与化疗药合用对肺癌多药耐药裸鼠皮下移植瘤生长具有抑制作用,其机制可能通过降低药物转运蛋白mdr1和mrp基因及蛋白表达,增强A549/DDP对化疗药物的敏感性有关。