病毒基因组耦联报告基因用于筛选适宜丙型肝炎病毒培养的亚细胞克隆株

目的 快捷筛选到适合丙型肝炎病毒(HCV)培养的细胞系.方法 将荧光素酶报告基因耦联到JFHlHCV基因组中,检测了多个人肝细胞系对HCV的易感性,进一步利用耦联荧光素酶的HCV复制子模型筛选并经过IFN-α处理更适宜HCV培养的Huh7亚细胞克隆株.结果 实验结果显示BEL7402、BEL7404、QSG7701、SMMC7721、QGY7701、QGY7703和HepG等肝细胞均不易感染HCV,仅限于Huh7细胞能被HCV感染.同时实验获得了更适宜HCV培养的Huh7亚细胞克隆株——Huh7G3.结论 在利用IFN-α处理细胞的过程中,通过检测荧光素酶活性,显示IFN-α对HCV亚基因组的复制抑制效果具有剂量依赖效应,研究同时显示:HCV复制子细胞能否抵抗HCV的超感染依赖于细胞内是否存在HCV RNA复制而不是其复制水平的高低.     

Protein A/G亲和层析在HCV抗体纯化中的应用效果

目的分析蛋白A/G亲和层析柱在纯化抗HCV血清的影响因素,以便选择最佳使用条件提高Protein A/G亲和柱的利用效率。方法分别将抗HCV血清用不同处理方式、不同上样方式、不同使用次数的亲和柱进行纯化,并收集纯化样品进行检测、分析。 结果用饱和硫酸铵粗纯后,在蛋白A/G亲和层析柱的纯化效果更好;样品在亲和柱内吸附30min可提高亲和柱的对目的蛋白的吸附。 结论使用初纯的抗体并增加吸附时间能提高亲和层析柱的利用率,并有效延长亲和柱的使用寿命。     

穴位注射治疗肾绞痛的疗效观察

目的观察穴位注射时肾绞痛的止痛效果。方法将136例肾绞痛的病人随机分为观察组和时照组，各68例。观察组采用穴位注射的治疗方法，时照组采用常规肌注的治疗方法。结果观察组与时照组显效率为42．6％和11．8％，总有效率分别为91.2％和73．6％。2组疗效比较有显著性差异（u=3．85，p〈0．001）。结论穴位注射治疗肾绞痛的效果明显优于肌肉注射。     

树鼩CD4蛋白多克隆抗体的制备及检测

目的 原核表达、纯化树鼩CD4蛋白并制备多克隆抗体,检测树鼩体内的CD4蛋白.方法 克隆树鼩CD4基因并连接到表达载体,构建重组质粒pET30a(+)-CD4和pGEX-5X-1-CD4,表达并纯化重组蛋白His-CD4和GST-CD4,用不同佐剂[弗氏佐剂、MF59和A1(OH)3]制备多抗,用Western blot法检测血清抗体特异性.结果 蛋白表达产物His-CD4和GST-CD4的相对分子质量分别约为53.5×103和70.0×103,纯化后蛋白浓度分别为600 μg/mL和1 mg/mL;三组佐剂均能诱导产生抗体,抗体几何平均滴度(Geometric Mean Titer,GMT)的比较结果为:弗氏佐剂组(GMT:97 420)＞Al(OH)3佐剂组(GMT:67 202)＞MF59佐剂组(GMT:55 128);其中弗氏佐剂组显著高于原蛋白组(P＜0.001);Al(OH)3组显著高于原蛋白组(P＜0.01);而MF59组显著高于原蛋白组(P＜0.05).结论 制备了特异性良好的小鼠抗血清,能够特异性地结合树鼩的CD4蛋白.为下一步本实验室制备CD4单克隆抗体、CD4蛋白分子的功能研究以及树鼩的病毒感染模型等免疫相关实验的进行提供了基础.     

高血压管理中心对社区高血压病人实施护理干预效果评价

<正>高血压病是一种常见的慢性疾病,长期患病可引起多器官损害。如血压控制不好会发生脑卒中,或严重影响患者的生活质量甚则危及生命。现将2003年1月～2006年1月高血压管