血管内皮生长因子在大鼠实验性关节炎模型中表达的动态观察

目的：观察血管内皮生长因子（VEGF）在大鼠实验性关节炎模型中的表达，探讨VEGF在类风湿关节炎（RA）发病机制中的作用。方法：30只雄性Wistar大鼠采用皮下注射Ⅱ型胶原的方法诱导实验性关节炎模型，并随机分为6组，每组5只。致敏1、2、3、4、5、6周后分别将各组动物处死，采用免疫组织化学方法对组织中表达的VEGF进行观察，并采用计算机图像分析的方法对各时期VEGF的表达量进行定量分析。结果：大鼠在接受胶原致敏后2周左右发病，滑膜组织中的VEGF蛋白的分泌与炎症发展密切相关。结论：VEGF参与了实验性关节炎滑膜血管翳的形成过程，在RA的发病机制中具有重要意义。     

人工髋关节置换手术中猝死的原因及机制

人工髋关节置换术最危险的并发症是死亡。鉴于国内人工关节手术的普遍开展 ,已出现这样严重的并发症。单纯由于手术出血或麻醉意外引起的死亡是很少见的 ,而更多的是考虑术中由某些特定的因素导致的猝死[1,2 ] 。1　猝死与骨水泥应用的关系早在 2 0世纪 70年代就有个案或小样本的报道指出 ,在骨水泥人工髋关节置换手术中 ,出现突发心血管衰竭后的猝死 ,发病具有瞬时性 ,救治上极为困难 ,但是无法明确发病的原因及机制[3] 。许多报道指出 ,只有在使用骨水泥时才出现病人的猝死 ,因此推测骨水泥的使用是死亡的重要原因。Ｏｒｔｅｇａ等[4 ] 报…     

肿瘤坏死因子α诱导人成骨细胞和人成骨细胞系HOS-8603凋亡的作用

目的:观察不同浓度重组肿瘤坏死因子α对于培养的人原代成骨细胞和人成骨细胞系HOS-8603的凋亡作用,并分析浓度效应。方法:实验于1998-04/2000-04在第二军医大学卫生毒理学教研室完成。在人成骨细胞和人成骨细胞系HOS-8603中,实验组加浓度为1,10,100,1000ng/L的肿瘤坏死因子α,对照组加等量的无肿瘤坏死因子培养基,培养后检测细胞活力应用噻唑兰法,检测细胞凋亡情况应用DNA梯形条带和透射电镜等方法。结果:①肿瘤坏死因子α对培养成骨细胞和HOS-8603细胞的作用(噻唑兰法):肿瘤坏死因子α浓度为100和1000ng/L实验组均高于对照组犤成骨细胞:(0.14±0.006),(0.10±0.010),(0.27±0.013)ng/L;HOS-8603细胞:(0.15±0.012),(0.09±0.015),(0.27±0.013)ng/L,P<0.05犦。②DNA梯形条带结果:凋亡细胞使DNA在核小体外降解,形成180～200bp或与之成倍的DNA片段。在琼脂糖凝胶电泳时呈现梯形结果。在肿瘤坏死因子α浓度为1000ng/L时,成骨细胞可检测到典型DNA梯形条带。③成骨细胞的凋亡情况:应用透射电镜检查,浓度为1000ng/L实验组较浓度为100ng/L实验组凋亡细胞多。肿瘤坏死因子α同样可以诱导HOS-8603的凋亡,未加肿瘤坏死因子α时,凋亡很少,加入100ng/L及1000ng/L肿瘤坏死因子α时,凋亡细胞数量明显增加。结论:肿瘤坏死因子α质量浓度达到100g/L时,可以引起体外培养的成骨细胞和成骨细胞系HOS-8603细胞凋亡,并随浓度加大出现凋亡细胞增多的剂量-效应关系,结果验证了肿瘤坏死因子能刺激成骨细胞凋亡的假说。     

人骨形态发生蛋白7重组腺病毒的构建及鉴定

目的：采用多聚酶链反应及酶切鉴定，拟构建人骨形态发生蛋白7重组腺病毒载体，以便利用局部基因治疗方法进一步在体内获得重组人骨形态发生蛋白7。 方法：实验于2004-05／2005-10在解放军第二军医大学长海医院胸心外科研究所完成。含人骨形态发生蛋白7基因全长cDNA质粒pUC118．BMP-7由第一作者构建并保存。将人骨形态发生蛋白7基因克隆至pcDNA3．1／CT-GFP质粒中。酶切回收的BMP-7／GFP基因片段，克隆人pAxCAwt腺病毒载体后，共转染大肠杆菌LE393，获得腺病毒重组质粒，大量扩增后转入293细胞包装，获得重组腺病毒。用病毒上清液感染293细胞及Hela细胞，293细胞受病毒感染而Hela细胞无明显病毒感染现象的克隆初步判定为重组腺病毒株。 结果：①骨形态发生蛋白7基因的获得：KpnI及XbaI双酶切、琼脂凝胶电泳检测可见2条带，略小于500bp的条带是长度为430bp的骨形态发生蛋白7基因，略大于2500bp的条带是长度约为2600bp的pUC118。②重组质粒pcDNA3．1BMP-7／GFP的构建：所挑选的5个转化子均可见略大于1000bp的条带，全部为阳性克隆。③重组粘粒pAxCAwT．BMP-7．GFP的构建：所挑选的5个转化子中2个可见大于1000bp的条带，为正向插入的阳性克隆。 结论：多聚酶链反应及酶切鉴定证明骨形态发生蛋白7重组腺病毒载体的成功构建，并包装出重组腺病毒，为骨损伤疾病进行原位组织工程修复奠定基础。     

不同内固定材料对兔胫骨骨折局部转化生长因子β1信使RNA表达的影响

背景：转化生长因子β是一族多功能的蛋白多肽，在骨折愈合过程中起作用的主要为转化生长因子β1。不同的内固定材料对骨折愈合的影响不同，其影响程度如何是判定内固定材料优劣的一个重要评定指标。目的：通过不同内固定材料固定后骨折愈合不同阶段转化生长因子β1mRNA的表达，了解转化生长因子β1mRNA的细胞内定位，借此探讨不同内固定材料对骨折愈合过程中骨折局部转化生长因子β1mRNA的表达的影响。设计：随机对照观察。单位：解放军第二军医大学长海医院骨科、病理科。材料：实验于2000-03／2001-07在第二军医大学实验动物中心和骨科实验室完成。选用新西兰兔42只，所有动物均随机抽取，雌雄不限，按内固定物分成两组：矩形髓内钉组；不锈钢接骨板组，每组动物21只。方法：以矩形髓内钉与不锈钢接骨板固定兔胫骨制作骨折内固定模型，骨折内固定部位为兔左胫腓骨交界下2mm处。手术前后用市售动物颗粒饲料分笼喂养，饮用自来水，自由活动，不用外固定。每组动物于内固定手术后1．3．7，14，21，28d分别处死3只，取骨折端骨痂及周围组织标本，进行组织切片和原位杂交处理。主要观察指标：观测并记录组织切片中不同细胞内的转化生长因子β1mRNA染色阳性强度和阳性面积比，显示兔骨折愈合过程中骨痂中转化生长因子β1mRNA的分布和含量。结果：共用实验动物42只，腹泻死亡3只，伤口局部感染骨外露3只，共6只未纳入结果分析，矩形髓内钉组和不锈钢接骨板组各3只，进入结果分析动物数36只。①在骨折早期，矩形髓内钉组和不锈钢接骨板组局部的细胞和间质中转化生长因子β1mRNA均无表达；7d后间充质细胞、成骨细胞、成软骨细胞中有转化生长因子β1mRNA阳性表达。②矩形髓内钉组和不锈钢接骨板组转化生长因子β1mRNA阳性染色强度、阳性面积比及阳性指数术后14d最高（12．36&;#177;0．58，0．19&;#177;0．05，2．35&;#177;0．20：10．24&;#177;0．65，0．13&;#177;0．03，1．33&;#177;0．10），28d最低（4．24&;#177;0．57，0．06&;#177;0．02，0．25&;#177;0．08：3．31&;#177;0．27，0．03&;#177;0．01，010&;#177;0．02），同期比较除术后7d阳性面积比外，其余矩形髓内钉组均高于不锈钢接骨板组，组问差异显著（P〈0．05，P〈0．01）。结论：矩形髓内钉较不锈钢接骨板更能促进细胞分泌转化生长因子β1,有利于骨折愈合。     

关于对《能量乳酸钠林格氏液对创伤性休克家兔的实验治疗》一文的商榷

学术争鸣有益,很值得提倡。畅所欲言地表达个人观点,科学地、实事求是地进行充分讨论,正确的学术理论和观点会越辩越明,同时,也有助于活跃科研、教学和临床的研究思想,激发探索精神。我们欢迎广大读者对本文或本刊其他文章随时发表不同意见,以加强读者、作者和编者的联系,促进学术研究的深入发展。     

保留关节的骨关节炎手术治疗

骨关节炎的晚期可行关节置换术。在此之前 ,那些保留关节、减轻疼痛、提高功能、延缓骨关节炎进展的手术 ,有其明显的优点。这些方法有 :截骨术 ,肌肉松解术 ,关节清理术 ,软骨下骨钻孔术 ,骨膜、软骨膜、骨移植术以及细胞和生长因子移植治疗术。1　肌肉松解和截骨术改变骨关节的负荷 ,可以减轻症状 ,促进新的关节面形成。切除作用关节的肌肉 ,使之收缩时对关节的作用力减小。Ｒａｄｉｎ等[1] 回顾了 5 3例退变性髋关节炎行肌肉松解术的病人。其中 ,48例疼痛得到了缓解 ,38例功能得到了提高 ,44例步态有了改善。多数病人 ,影像学表现均无关…     

矩形髓内钉与Ender钉治疗胫腓骨骨折的临床应用及生物力学比较

为进一步探讨矩形髓内钉的生物力学机制，设计矩形髓内钉的临床应用及生物力学实验研究，并与Ｅｎｄｅｒ钉进行对比。方法（１）临床应用研究：手术治疗胫腓骨骨折２１８例，其中矩形髓内钉固定１３２例，Ｅｎｄｅｒ钉固定８６例。（２）生物力学实验：１２对２４根人体胫骨标本分为两组，以同一人体的左右侧作自身对照。左侧行矩形髓内钉固定，右侧行ＮＤＥＲＱＳＨ ＬＤＰＧ。分别行扭转试验及三点弯曲试验，会负载－位移曲线，两     

不同髓内固定物对实验性骨折局剖TGF-β表达影响的免疫组化研究

目的探讨矩形髓内钉 (RIN)对骨折愈合过程中骨折局部 TGF- β表达的影响 . 方法运用兔胫骨骨折内固定模型 , 将矩形髓内钉和 Ender's钉 (END)、四孔接骨板 (SPL)进行对比 , 运用免疫组化方法结合计算机图像分析系统检测了骨痂中 TGF- β的分布和含量 . 结果骨折早期 , 局部 TGF- β含量 RIN组、 END组和 SPL组组间均无显著差异 ; 7 d 后 , RIN组 TGF- β含量最多 , END组次之 , SPL组最少 . 同期 TGF- β含量相比 , RIN、 END组和 SPL组组间有显著差异 , RIN和 END组相比则无显著差异 ; 56 d时三组间 TGF- β含量无差异 . 结论 RIN、 END较 SPL更能促进细胞合成分泌 TGF- β , 有利于胫骨骨折的愈合 .     

洗必泰碘制剂在清创术中的应用

聚乙烯吡咯烷酮碘(Polyvinyl povidone iodine PVP-Ⅰ),已广泛应用于临床。我校刘丽琳(1985)合成β-环糊精碘和洗必泰碘两种新的碘伏。我们根据清创术的要求配制出具有清洁去污和杀菌作用的“洗必泰碘消毒清洁剂”用于四肢清创术,自1987年9月至1988年3月先后治疗四肢开放伤561例,伤口感染率为1.6％,现报道如下。