损伤气道上皮组织转化在气道重塑中的作用

目的：探讨损伤气道上皮表型向肌纤维母细胞转化的可能性，以及转化生长因子-β1(TGF-β1)在此过程中的影响。方法：用多聚左旋精氨酸(PLA)反复损伤气道上皮细胞系16HBE-14o，显微镜下实时观察形态学变化，免疫组化方法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达；以TGF-β1(10μg／L)刺激转染表达质粒VSMP8[含(α-SMA)启动子和氯霉素已酰基转移酶(CAT)报告基因]的16HBE-14o，ELISA法测定细胞裂解液中CAT相对活性。结果：①在气道上皮细胞系。16HBE-14o反复损伤、修复过程中，有部分细胞α-SMA表达阳性，其中有少数细胞形态呈现长梭形、多角形或星形；TGF-β1的刺激增加了α-SMA阳性细胞数，并延缓了损伤后16HBE-14o的修复。②TGF-β1刺激后24h CAT活性显著升高。结论：气道上皮细胞反复损伤、修复过程中，可能有部分细胞未能正常愈合而出现向肌纤维母细胞转化，进而可能参与哮喘气道重塑、气道高反应性的发生发展，提示TGF-β1可促进这种转化的病理生理过程。     

α肌动蛋白基因转录激活因子HMGB34367的克隆和调控功能研究

目的:探讨从博来霉素致肺纤维化小鼠肺组织中筛选出的高迁移率族蛋白B1(HMGB1)亚家族成员HMGB34367,作为转录因子对α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)基因表达的影响。方法:①克隆与构建HMGB34367真核表达载体及α-SMA启动子红色荧光报告质粒。②构建质粒共转染气道上皮细胞系16HBE,荧光显微镜观察重组转化生长因子-β1(rhTGF-β1)刺激下红色荧光的表达。③电泳迁移率(EMSA)及超迁移实验分析HMGB34367和α-SMA启动子CArGB基序的特异性结合活性。④RT-PCR检测细胞转染HMGB34367真核表达载体HMGB34367-pcDNA3.0对内源性α-SMA基因表达的影响。结果:细胞过表达HMGB34367能活化α-SMA启动子,转染HMGB34367-pcDNA3.0质粒的16HBE细胞核蛋白,显著增强了与α-SMA启动子CArGB序列特异结合,过表达HMGB34367诱导了α-SMA基因表达。结论:HMGB34367基因编码蛋白能作为转录因子特异性地诱导α-SMA启动子的转录激活,上调αS-MA基因表达。提示致纤维化环境因子通过诱导HMGB34367表达使αS-MA基因转录激活,可能在气道重塑和肺纤维化的病理过程中发挥重要作用。     

Cre/Loxp位点重组酶系统在疾病动物模型建立中的应用

Cre/Loxp位点重组酶系统可以迅速、有效的导致时空特异性基因片段剔除 ,从而可以在体研究某一与疾病相关的基因在特定的组织、细胞类型和特定的时间空间表达的活化或抑制的情况。本文就运用Cre/Loxp位点重组酶系统建立疾病动物模型的特点、优势和实际应用情况作一综述     

平滑肌细胞特异表达Cre重组酶转基因小鼠的建立

目的：建立平滑肌细胞特异表迭Cre重组酶的转基因小鼠。方法：用分子克隆的方法构建含有α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)启动子、Cre重组酶基因和polyA的转基因载体α-SMA-Cre。以显微注射的方法将5．3kb的转基因片段引入小鼠基因组。通过PCR和LacZ染色以检测Cre重组酶在体内介导重组的功能。结果：共注射282枚受精卵，移植至10只假孕母小鼠的输卵管中发育，获得子代小鼠19只，经PCR鉴定有4只小鼠在基因组上整合有Cre基因，整合率为2l％。将该小鼠与基因组上携带LoxP位点的Smad4务件基因打靶小鼠交配，通过PCR在所有含有平滑肌细胞的组织基因组DNA中检测到重组后的234bp特异条带。与“报告”小鼠-ROSA26交配，LacZ染色后小肠壁平滑肌细胞中特异地检测到Cre重组酶活性。结论：成功构建了平滑肌细胞特异表达Cre重组酶的转基因小鼠．该小鼠在平滑肌细胞中特异表迭Cre重组酶，并能在体内成功地介导LoxP位点间的重组。     

重组腺病毒p53联用阿霉素对肺鳞癌移植瘤耐药性的影响

目的 探讨野生型p53基因联合阿霉素对肺癌化疗药物敏感性的影响及导入外源性野生型p53基因对肺癌原发性耐药的影响。方法 以携带野生型P53基因的复制缺陷型腺病毒（pAd-P53）感染荷瘤肺鳞癌裸鼠动物模型。分层随机法将鼠分为4组（每组6只）：单纯Ad-p53、单纯阿霉素（ADM）、Ad-p53加阿霉素组（联合组）及对照组，对照组注射同等剂量生理盐水。绘制肿瘤体积增长曲线，计算抑瘤率，观察肿瘤病理组织学变化。结果 联合组对裸鼠肿瘤重量增长抑制率为82．32％，对肿瘤体积增长抑制率为99．5％；而单独p53组对肿瘤重量增长抑制率／肿瘤体积增长抑制率分别为60．11％和85．4％；单独阿霉素组对肿瘤重量增长抑制率／肿瘤体积增长抑制率为35．4％和73．9％；对照组的肿瘤体积呈持续增长趋势。结论 野生型p53基因结合化疗药物对于提高抗肺癌药物的敏感性、克服原发耐药可能有一定的临床应用前景。     

定眩汤合并星状神经节阻滞治疗颈性眩晕30例临床观察

目的:本文通过应用眩晕汤治疗颈性眩晕的近远期疗效,寻找较好的治疗方法.方法:首先将60例患者随机分为三组.一组为治疗组,应用防眩汤与星状神经节阻滞治疗.一组为对照组.一组为牵引组,一组为针灸,按摩组.比较各组治疗1个疗程后的治疗效果.结果:防眩汤合并星状神经节阻滞治疗组临床愈显率为89％,均高于牵引对照组与针灸按摩对照组.结论:防眩汤合并星状神经节阻滞治疗颈性眩晕近远期疗效较好.     

针灸治疗带状疱疹的临床研究现状

带状疱疹是由水痘－带状疱疹病毒引起的急性炎症性皮肤病,常伴剧烈的神经痛及局部淋巴结肿痛,给患者带来巨大的痛苦。针灸治疗带状疱疹手段多样,可明显缓解疼痛、促进疱疹干涸吸收、缩短病程、降低后遗神经痛的发生率等,且经济安全。本文将近年来针灸治疗带状疱疹的临床研究现状作一综述。     

针刺治疗偏头痛的作用机理及治疗概况

偏头痛是临床上一种较难治愈的周期性发作性疾病.由于其发病率较高,发作时头痛剧烈,且反复发作、迁延难愈,给患者的日常生活及学习工作造成严重不良影响,因此已成为神经科研究的热点问题之一.针灸治疗作为在中国沿用两千多年的一种治疗方法,以其显著的疗效得到了国内外医学界的公认.……     

Clinical Observation of Electroacupuncture in Treating Spastic Paralysis Following Cerebral Infarction

目的察电针治疗脑梗死后痉挛性瘫的临床疗效.方法符合标准的以痉挛性瘫为主的脑梗死病例60例随机分为对照组和治疗组两组,每组30例.对照组采用传统针刺法,治疗组根据拮抗针法原理加用电针,两组均应用常规药物及头针.结果治疗组治疗前后比较、对照组治疗前后比较、治疗组与对照组治疗后组间比较,患者的临床神经功能缺损程度(NFI)评分及临床疗效评分经统计学处理差异均有统计学意义.结论电针与传统针刺法治疗脑梗死后痉挛性瘫均有临床疗效,且在治疗效果上电针明显优于传统针刺.