姜黄素通过NLRP3/Caspase-1/IL-1β轴对低氧性肺动脉高压的干预作用

目的：探讨姜黄素对低氧性肺动脉高压（HPH）的作用及其机制。方法：同时研究肺动脉平滑肌细胞（PASMCs）和SD大鼠肺组织,PASMCs和SD大鼠都设置为常氧组（N）、低氧组（H）、低氧+姜黄素组（HC）3组。CCK-8法测3组PASMCs细胞活力,Western blot法检测3组PASMCs和肺匀浆中NLRP3、Caspase-1及IL-1β蛋白表达差异。血流动力学检测3组大鼠的平均肺动脉压（mPAP）及右心肥大程度,HE染色观察3组大鼠肺血管重塑程度。结果：与N组比,H组PASMCs的数量有明显增加（P＜0.05）,H组PASMCs和肺匀浆中NLRP3、Caspase-1、IL-1β蛋白表达均上升（均P＜0.05）,H组大鼠的mPAP及右心肥大指数明显升高（均P＜0.05）,发生明显肺血管重塑;与H组比,HC组PASMCs的数量明显降低（P＜0.05）,PASMCs和肺匀浆中NLRP3、Cas-pase-1、IL-1β蛋白表达均下降（均P＜0.05）,HC组大鼠的mPAP及右心肥大指数明显降低（均P＜0.05）,肺血管重塑改善。结论：姜黄素可能通过抑制NLRP3/Caspase-1/IL-1β轴,改善低氧PASMCs异常增殖、HPH大鼠肺血管重塑和右心肥大,降低肺动脉压力。     

不同动脉血采集方法对小鼠血气分析结果的影响

目的：对比研究不同动脉血采集方法对小鼠动脉血气、电解质及生化指标的影响,以期筛选出小动物血气分析的理想采血途径。方法：将90只雄性Balb/c小鼠按体质量随机分为颈总动脉插管组、腹主动脉穿刺组、经皮左心室穿刺组,分别采集动脉血,记录成功率、动物损伤程度,并经微量血气分析仪检测血气、电解质及生化指标,观察不同动脉血采集方法对上述指标的影响。结果：经皮左心室穿刺组切口长度、动脉血采集时间、成功率、血氧分压（PaO2）、血氧饱和度（SaO2）、氧合血红蛋白（O2Hb）均显著低于颈总动脉插管组和腹主动脉穿刺组,去氧血红蛋白（RHb）显著高于颈总动脉插管组和腹主动脉穿刺组（P＜ 0.05）。腹主动脉穿刺组血K+浓度显著高于颈总动脉插管组和经皮左心室穿刺组,而血Na+浓度、血Cl-浓度显著低于颈总动脉插管组和经皮左心室穿刺组（P＜0.05）。腹主动脉穿刺组血糖（Glu）、血乳酸（Lac）浓度显著高于颈总动脉插管组（P＜0.05）。经皮左心室穿刺组血红蛋白总浓度（tHb）、碱剩余（cBase）显著低于腹主动脉穿刺组,标准碳酸氢根（SBC）浓度显著高于腹主动脉穿刺组（P＜0.05）。结论：有创右侧颈总动脉插管法采集动脉血对血气、电解质、生化指标影响较小,且操作方便、用时较短、插管稳定性强、成功率高、创伤小、重复性好,值得推广应用。     

黄芩苷通过调控LncRNA-MALAT1/miR-361-3p/TGF-β轴治疗低氧性肺动脉高压

目的：探讨黄芩苷（Baicalin）对低氧性肺动脉高压的治疗作用及其潜在机制。方法：选取18 只C57BL/6 雄性小鼠随机分为常氧组、低氧组及低氧+黄芩苷组,每组各6 只。21 d后采用导管法检测小鼠右心室收缩压（RVSP）及平均颈动脉压力（mCAP）,行苏木素-伊红（HE）染色观察肺动脉血管重塑程度,采用免疫组化染色检测TGF-β通路蛋白表达。常氧/低氧条件下培养小鼠肺动脉平滑肌细胞（MPASMCs）48 h,采用CCK-8法测MPASMCs细胞活力,Transwell和Wound healing检测MPASMCs细胞迁移能力,蛋白质印迹（Western blot）法检测TGF-β通路蛋白表达差异,生物信息学分析和双荧光素酶报告基因检测验证LncRNA-MALAT1/miR-361-3p/TGF-β轴的调控关系。结果：与低氧组比,黄芩苷干预组MPASMCs的增殖和迁移能力显著下降（P ＜0.05）,小鼠的RVSP明显下降（P ＜0.05）,肺血管重塑改善。与常氧组比,低氧组中TGF-β信号通路相关蛋白TGF-β、p-smad2、p-smad3表达显著升高,而黄芩苷干预后TGF-β信号通路显著抑制（P ＜0.05）。结论：黄芩苷可能通过调控LncRNA-MALAT1/miR-361-3p轴调控TGF-β表达,改善低氧MPASMCs异常增殖、低氧性肺动脉高压小鼠肺血管结构重塑,进而降低肺动脉压力。     

活性氧簇诱导硬皮病小鼠模型时效性的基础研究

目的应用活性氧簇(ROS)成分次氯酸(HCl O)构建硬皮病小鼠动物模型,观察其皮肤纤维化和肺间质病变发生的时效特点。方法 36只6周龄雌性Balb/c小鼠随机平均分至造模组和对照组。造模组随机分3组,每组6只,分别予小鼠背部中央区皮肤皮下注射HCl O 300μl,每日1次,分别持续4、5和6周;对照组随机分3组,每组6只,注射等量PBS,1次/日,分别持续4、5和6周。注射时间结束2周后处死小鼠,取注射部位周围、腹部皮肤及小鼠肺组织进行HE染色和Masson染色,镜下观察和测定各组皮肤厚度、胶原纤维含量,新鲜皮肤组织测定羟脯氨酸含量。结果 3组对照组(4、5、6周)小鼠背部和腹部皮肤均未出现表真皮层增厚和弹性降低,3组间皮肤厚度比较,差异无统计学意义(P>0.05);与对照组相比,连续注射4周HCl O的造模组小鼠背部均出现弥漫增厚,弹性降低,真皮层明显增厚,腹部皮肤真皮层有所增厚;连续注射6周HCl O的小鼠皮肤厚度较4周显著增加(P<0.05),胶原纤维增粗更加明显,并伴有纤维断裂,真皮层炎性细胞浸润,真皮血管壁增厚甚至闭塞。与对照组相比,连续注射4周的造模组小鼠未见明显肺间质病变,而6周造模肺组织出现肺泡间隔增厚,其间成纤维细胞增生,小血管壁增厚等纤维化表现。3组对照组(4、5、6周)小鼠之间背部皮肤的Masson染色胶原纤维组织化学指数比较,差异无统计学意义(P>0.05);与对照组相比,造模组背部皮肤的Masson染色胶原纤维组织化学指数升高,(P<0.05),且6周造模组的表达水平高于4周造模组,(P<0.05)。3组对照组(4、5、6周)小鼠之间背部皮肤的羟脯氨酸含量比较,差异无统计学意义(P>0.05);与对照组相比,造模组背部皮肤的羟脯氨酸含量升高(P<0.05),且6周造模组的表达水平高于4周造模组,(P<0.05)。结论ROS构建的硬皮病小鼠动物模型随诱导时间的延长可出现注射区域外皮肤弥漫纤维化和硬皮病肺间质病变,该模型更加符合硬皮病皮肤和肺部病理改变特点。