热休克蛋白47在转化生长因子β1诱导肾小管间质纤维化中的作用

目的 探讨热休克蛋白47（HSP47）在肾小管间质纤维化中的作用及其可能机制。 方法 常规培养人肾小管上皮细胞（HK-2）,分为对照组、转化生长因子β1（TGF-β1）组、HSP47-siRNA组。RT-PCR检测HSP47、胶原Ⅳ、纤连蛋白（FN）、组织型纤溶酶原激活物抑制剂1（PAI-1）的mRNA表达。Western印迹检测HSP47、胶原Ⅳ、FN蛋白表达。ELISA检测PAI-1的蛋白量。 结果 HK-2细胞有HSP47表达。不同浓度TGF-β1（0、2.5、5、10 μg/L）干预不同时间（12、24、48 h）时,HSP47基因和蛋白表达呈浓度和时间依赖性增高,10 μg/L TGF-β1干预HK-2细胞48 h时,HSP47 mRNA和蛋白表达最强。不同浓度 TGF-β1（0、5、10 μg/L）干预HK-2不同时间（12、24、48 h）时,胶原Ⅳ、FN 、PAI-1 mRNA和蛋白表达亦呈浓度和时间依赖性增高,10 μg/L TGF-β1作用48 h时,3者mRNA和蛋白表达最强。与TGF-β1组比较,HSP47-siRNA组的HSP47、胶原Ⅳ、FN、PAI-1 mRNA和蛋白表达都明显下调。 结论 HSP47可促进肾小管间质纤维化,其机制可能与上调胶原Ⅳ、FN、PAI-1表达有关。     

坎地沙坦对糖尿病肾病大鼠足细胞Nephrin、Podocin和CD2AP表达的影响

目的探讨糖尿病肾病(DN)大鼠足细胞相关分子Nephrin、Podocin及CD2AP表达的变化,以及坎地沙坦对其的干预作用,为DN的防治提供理论依据。方法健康雄性SD大鼠36只,随机分为3组:A组为正常对照组,B组为DN组,C组为DN+坎地沙坦组。用药后第4周和第7周检测各组大鼠的血糖(GLU)、体重、24h尿蛋白(proteinuria)和内生肌酐清除率(Ccr),于第7周予RT-PCR法检测大鼠肾组织Nephrin、Podocin及CD2AP mRNA表达。结果 7周后,与A组比较,B组出现尿蛋白排泄增多,Ccr下降(P<0.05),肾组织Nephrin、Podocin及CD2AP mRNA水平均下调(均P<0.05);与B组比较,C组尿蛋白排泄量降低(P<0.05),Ccr升高(P<0.05),Nephrin、Podocin及CD2AP mR-NA水平均增加(均P<0.05)。采用直线相关分析后发现,尿蛋白与肾组织Nephrin、Podocin和CD2AP mRNA水平呈负相关;Ccr与肾组织Nephrin、Podocin和CD2AP mRNA水平呈正相关。结论 DN时存在足细胞分子Nephrin、Podo-cin及CD2AP表达异常,坎地沙坦对肾脏的保护作用机制可能是通过增加Nephrin、Podocin及CD2AP表达而实现。     

肾通注射液对急性肾衰家兔内皮素和一氧化氮的影响

 目的：探讨活血化瘀药肾通注射液对急性肾衰家兔肾血管活性物质的影响。方法：健康雄性大耳白兔40只，随机平分为正常组、模型组、肾通治疗组和丹参治疗组，分别观测各组血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、24h尿蛋白排泄率、滤过钠排泄分数（FENa）、内生肌酐清除率（Ccr）、血Na⁺、K⁺以及内皮素（ET）和一氧化氮（NO）水平，同时检测肾组织ET（NET）和NO（NNO）含量变化。结果：急性肾衰家兔经肾通、丹参注射液治疗后，肾功能各项指标均有显著改善（肾通效果似优于丹参，但两者无显著性差异），肾血管活性物质产生明显变化，血ET显著下降，NO水平升高，肾局部ET和NO与模型组比较差异更为显著。结论：肾通注射液对急性肾衰有防治作用，广泛调节肾血管活性物质，特别是对肾局部ET和NO的调节从而显著改善肾血流动力学是其重要的作用机理之一。     

活血化瘀中药注射液对肾血液动力学影响的研究概况

近十几年来 ,活血化瘀中药注射液在临床广为使用。中药注射液直接由静脉给药 ,缩短了起效时间 ,也便于血液动力学研究。临床及实验证明 ,活血化瘀中药具有解除平滑肌痉挛、减少血管阻力、扩张血管、增加肾血流量的作用 ,并可抑制血小板聚集 ,增加纤维蛋白溶解活性[1] 。常见的活血化瘀类中药注射液有当归、丹参、川芎、红花、大黄、灯盏花、莪术、赤芍等 ,皆是治疗肾病使用频率较高的药物。本文仅就活血化瘀中药注射液对肾血流动力学影响的研究概况作一综述。1　对动物模型的作用郑氏以当归注射液对甘油致家兔急性肾功衰模型进行干预 ,结果…     

坎地沙坦对糖尿病肾病大鼠足细胞保护作用的研究

目的 探讨糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠足细胞超微结构及其相关分子nephrin表达的变化,以及坎地沙坦对其干预的影响,为DN的防治提供理论依据.方法 选择健康雄性SD大鼠36只,按随机数字表法分为A组(正常对照组)、B组(DN组)和C组(DN+坎地沙坦组),每组12只.B、C组尾静脉注射链脲佐菌素(30 mg·kg-1)制备DN大鼠模型,于DN模型成模1周后将3组大鼠分别在代谢笼中喂养,C组给予坎地沙坦5 mg·kg-1·d-1灌胃,A组及B组给予等量生理盐水灌胃.用药后第4周和第7周检测各组大鼠的血糖、体质量、24 h尿蛋白和内生肌酐清除率(Ccr),于第7周取肾组织行光学显微镜及电子显微镜观察肾脏病理改变、RTPCR法检测nephrin-mRNA表达.结果 与A组比较:B组24 h尿蛋白排泄增多(P＜0.05),Ccr在7周时下降(P＜0.05);肾组织内nephrin-mRNA表达下调(P＜0.05);肾组织足细胞足突宽度增加并出现融合,肾小球基底膜增厚.与B组比较:C组24 h尿蛋白排泄量降低(P＜0.05),Ccr升高(P＜0.05);肾组织内nephrin-mRNA表达增加(P＜0.05),足细胞足突宽度及肾小球基底膜厚度变小.结论 DN时存在足细胞分子nephrin表达异常和超微结构改变,坎地沙坦对肾脏的保护作用机制可能是通过增加nephrin表达、改善足细胞超微结构而实现.     

全反式维甲酸对肾盂肾炎大鼠肾脏纤维化的影响

目的探讨全反式维甲酸（atRA）对肾盂。肾炎大鼠肾脏纤维化的影响。方法将40只大鼠随机分为正常对照组（A组）、假手术组（B组）、模型组（C组）和治疗组（D组）,每组10只。用致肾盂肾炎大肠杆菌制备大鼠肾盂肾炎模型。观察肾脏大体观改变和光境下HE、PAS染色肾组织纤维化的变化。结果A、B组大鼠尿细菌培养细菌数均〈1^5CFU／ml;C、D组大鼠尿细菌培养细菌数均〉10^5CFU／ml。A、B组大鼠肾脏的大体观和光镜下均正常,但D组较C组在肾脏大体观上肿胀程度减轻,光镜下纤维化程度减轻、肾盂肾盏扩张变形不明显。结论atRA能抑制肾盂肾炎大鼠肾脏炎症反应和纤维化的进展。     

罗格列酮对大鼠慢性缺血性肾脏病变的保护作用

慢性肾缺血是不同病因所致慢性肾脏疾病进行性发 展的一条共同通路[1],这提示减轻缺血性损害可能是治疗慢性肾脏病的一个重要靶点.罗格列酮属于噻唑烷二酮类(TZD)胰岛素增敏剂,也是一种过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARγ)配体.近年来发现TZD具有不依赖降糖作用的肾脏保护作用[2],但是罗格列酮对慢性肾脏缺血是否具有保护作用尚未见报道.本研究通过观察罗格列酮对慢性缺血肾脏PPARγ、炎性反应及致纤维因子的影响,探讨其对慢性缺血肾脏的作用及可能机制.     

血管紧张素Ⅱ通过TLR4-MyD88途径诱导大鼠肾小管上皮细胞炎性因子释放

目的 观察血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）刺激肾小管上皮细胞（NRK-52E）后肿瘤坏死因子α（TNF-α）和热休克蛋白47（HSP47）的表达,分析Toll样受体4（TLR4）信号通路的变化与上述因子的关联,探讨AngⅡ促进NRK-52E细胞炎性反应、纤维化的天然免疫机制。 方法 细胞同步化后,将其分为4组：对照组、AngⅡ（10-7 mmol/L）组、坎地沙坦（10-5 mmol/L）+AngⅡ组、TLR4阻断剂（20 mg/L）+AngⅡ组,培养6 h后RT-PCR法检测TLR4及转接信号髓分化因子88（MyD88）mRNA表达水平;12 h后免疫荧光法检测细胞表面TLR4蛋白表达;24 h后以ELISA法检测细胞上清液TNF-α及HSP47的浓度。 结果 与对照组相比,AngⅡ显著上调NRK-52E细胞 TLR4、MyD88 mRNA和TLR4蛋白表达（均P < 0.01）,并诱导细胞TNF-α和HSP47的释放（均P < 0.01）。与AngⅡ组相比,TLR4阻断剂和坎地沙坦干预均显著抑制 AngⅡ对细胞TLR4、MyD88的刺激效应（均P < 0.01）;坎地沙坦抑制AngⅡ诱导的细胞 TNF-α、HSP47的释放（均P < 0.01）,TLR4阻断剂对细胞 TNF-α、HSP47的下调呈剂量依赖性。 结论 AngⅡ对NRK-52E细胞天然免疫信号TLR4、MyD88具有激活效应,该信号激活可能是AngⅡ促进肾小管细胞炎性相关因子释放的重要机制之一。坎地沙坦抑制肾小管细胞炎性因子的体外效应也与其调节该信号通路有关。     

肾通注射液防治家兔急性肾衰竭的实验观察

目的评估肾通注射液对家兔急性肾衰竭(ARF)的防治作用,并初步探讨其机制.方法将36只健康雄性大耳白兔随机分为正常组、模型组和治疗组,每组12只.禁水12h后,模型组和治疗组动物双后下肢肌注50%甘油等渗盐水(15ml/kg)以复制急性肾衰,正常组同法注射等容量生理盐水.造模1h后,治疗组腹腔注射肾通注射液2ml/kg,8h后重复给药1次;正常组和模型组同时腹腔注射等容量5%葡萄糖.通过生化法监测肾功能,彩色多普勒超声动态观察各组家兔第24、48、72h肾血流动力学变化,以放免法测定血浆和肾局部内皮素(ET-1)含量.结果治疗组肾血流量较模型组显著升高,各级动脉阻力指数显著降低,肾功能各项指标均有显著改善,肾血管活性物质产生明显变化,血ET显著下降,肾局部ET与模型组比较差异更为显著.结论肾通注射液可增加实验性ARF家兔的肾脏血液供应,提高肾小球滤过率,保护肾功能,而调节ET-1水平是其重要的作用机制之一.     

天然免疫分子在肾脏炎性反应及间质纤维化中的作用

近几年来天然免疫的研究获得长足进展,引起医学界的广泛关注。许多累及肾脏的疾病如感染、系统性自身免疫性疾病、肾移植排斥反应、肾小球肾炎、肾间质纤维化等均与天然免疫有关。本文重点介绍天然免疫分子在肾脏炎性反应及间质纤维化中作用的最新进展。