自固化磷酸钙人工骨与异体骨治疗SandersⅡ-Ⅳ型跟骨骨折的病例对照研究

目的:比较自固化磷酸钙人工骨与异体骨植骨联合跟骨锁定重建接骨板内固定治疗SandersⅡ-Ⅳ型跟骨骨折的临床疗效。方法:自2012年3月至2015年12月收治48例SandersⅡ-Ⅳ型跟骨骨折患者,均采用外侧L形切口切开复位内固定术,术中于跟骨体部残留的缺损处进行植骨,根据植骨材料不同分为自固化磷酸钙人工骨组和异体骨组。其中自固化磷酸钙人工骨组28例,男23例,女5例;年龄22～52(34.46±7.33)岁;SandersⅡ型8例,Ⅲ型11例,Ⅳ型9例。异体骨组20例,男17例,女3例;年龄24～55(36.40±7.93)岁;SandersⅡ型6例,Ⅲ型7例,Ⅳ型7例。比较两组患者术后伤口并发症,术前、术后即刻及术后12个月B觟hler角变化情况,并采用Maryland评分对术后12个月功能恢复情况进行评价。结果:所有患者获得骨性愈合,并获得随访,时间12～42个月,平均25个月。两组术前、术后即刻、术后12个月各自B觟hler角比较差异无统计学意义(P0.05)。两组术后12个月Maryland评分比较差异无统计学意义。异体骨组术后5例出现伤口并发症,自固化磷酸钙人工骨组2例发生切口边缘坏死,两组比较差异无统计学意义(χ2=2.978,P0.05)。结论 :对于跟骨骨折使用切开复位植骨及重建钢板内固定方法效果良好,与异体骨相比,自固化磷酸钙人工骨作为植骨材料应用于跟骨骨折效果相当,但无排斥反应,可减少相关并发症,临床上值得推广。     

转化生长因子β1基因缓释的壳聚糖纳米粒制备及体外检测***☆

背景：壳聚糖作为一种非病毒载体,具有低毒性、低免疫原性、良好的生物相容性以及带可高正电荷密度的特性,易与带负电荷的DNA通过静电作用形成相互作用体避免核酸酶的降解。 目的：构建负载重组人转化生长因子β1基因的壳聚糖纳米粒,检测其体外缓释转化生长因子β1基因及对软骨细胞基因转染等性能。 方法：将壳聚糖与负载增强型绿色荧光蛋白基因和转化生长因子β1基因的质粒DNA(pDNA)以复凝聚法制成壳聚糖/ pEGFP-TGF-β1纳米粒。 结果与结论：制备的壳聚糖/pEGFP-TGF-β1纳米粒呈球形,粒径、表面电位与pH值相关,随着pH值升高,粒径增大,表面电位减少。纳米粒可有效保护pDNA免受核酸酶的降解。纳米粒的pDNA包封率为(87.5±2.3)%;pDNA可从纳米粒中缓慢释放。体外转染实验证实壳聚糖/pEGFP-TGF-β1纳米粒能转染软骨细胞并在细胞内表达绿色荧光蛋白。提示壳聚糖/ pEGFP-TGF-β1纳米粒能有效保护pDNA免受核酸酶降解,具有良好的缓释转化生长因子β1基因的能力,并能介导基因转染软骨细胞。 关键词：转化生长因子β1;壳聚糖;软骨细胞;组织工程;基因载体 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2012.12.007     

小鼠骨髓间充质干细胞生物学特性和体外诱导分化

目的研究小鼠骨髓间充质干细胞的生物学性状和多系分化潜能。方法取Balb／c小鼠骨髓单个核细胞在低糖的培养液中培养出贴壁生长的细胞,进行形态学观察、细胞周期和免疫表型分析;在不同的因子作用下诱导向成骨细胞、软骨细胞,脂肪细胞分化,并检测诱导后细胞相应的基因表达。结果小鼠骨髓间充质干细胞贴壁生长后形态较均一,增殖能力随着传代逐渐增强,但从第8代后增殖能力明显减退。细胞表达CD29,CD38,CD44,CD106等标记,但CD34和H-2k表达阴性。在不同的诱导培养体系里间充质干细胞能分化为成骨细胞、软骨细胞和脂肪细胞,相应的骨钙蛋白基因,Ⅱ型胶原基因,脂蛋白脂酶基因表达都明显增强。结论从小鼠骨髓可以分离培养出间充质干细胞,在体外有效扩增和诱导分化。表明可以以小鼠为模型研究间充质干细胞在组织工程、细胞移植、基因治疗等领域的运用。     

陈旧性心肌梗死体积与左心功能相关性的MRI研究

目的：评价MRI心肌灌注及电影成像在陈旧性心肌梗死及左心功能评价中的应用价值。方法：33例诊断为陈旧性心肌梗死的患者（病变组）,均行心脏MRI灌注及电影成像。分析左心室室壁运动、心肌灌注首过期和延迟期MRI特征,确定梗死心肌的程度及范围。分析梗死心肌体积与室壁运动、左室功能的相关性。选取25例正常体检者作为对照组,评价病变组与对照组心脏形态与功能。结果：33例病变组中32例（97.0%）延迟期心肌可见高信号,其中20例（60.6%）首过期灌注减低,12例（36.4%）无灌注减低;1例（3.0%）首过期灌注减低且延迟期无心肌强化。延迟期心肌强化阳性率与首过期灌注减低率差异无统计学意义（χ²=0.589,P>0.05）。病变组梗死心肌体积平均值为（22.1±12.3） cm³,与射血分数呈负相关（r=-0.78,P<0.05）,与左室室壁运动异常、左室舒张末期容积、收缩末期容积呈正相关（r=0.76、0.68、0.72,均P<0.05）,与每搏输出量无明显相关性（r=0.23,P>0.05）。病变组左室长轴径、短轴径、左室舒张末期容积均较对照组增大,左室射血分数减小（P<0.05）。结论：MRI心肌灌注及电影序列可有效评价陈旧性心肌梗死程度和范围,且心肌梗死体积与室壁运动异常、左室功能相关。     

次要组织相容性抗原诱导移植物抗白血病效应的研究进展

次要组织相容性抗原(mHags)在移植物抗宿主病(GVHD)和移植物抗白血病(GVL)效应中起重要作用。造血细胞起源细胞局限性mHags只在白血病细胞及造血细胞表面表达,可诱导特异性T细胞产生,杀伤白血病细胞,对非造血细胞无细胞毒作用,成为诱导GVL效应、实现GVHD和GVL分离的理想靶抗原。本文对近年来以mHags为靶抗原诱导GVL效应治疗恶性血液病的研究进展作一综述,并探讨其用于临床造血细胞移植后白血病复发过继性免疫治疗的可能性。     

脐带源间充质干细胞促进造血细胞在NOD/SCID小鼠归巢

目的探讨脐带源间充质干细胞(hUC-MSC)在促进造血细胞归巢,提高造血干细胞植入中的作用. 方法 RT-PCR检测经体外培养扩增所得hUC-MSC归巢相关分子的表达;将hUC-MSC和CFDA-SE荧光标记的人脐带血单个核细胞(MNC)植入NOD/SCID小鼠建立共移植模型,分离共移植24 h后小鼠骨髓有核细胞,用流式细胞仪和荧光倒置显微镜观察脐带血造血细胞在NOD/SCID小鼠骨髓中含量的变化. 结果 hUC-MSC表达SDF-1及其受体CXCR-4以及相关黏附分子CD11a/ICAM-1、CD49d/VCAM-1;在hUC-MSC共移植情况下,流式细胞仪检测和荧光显微镜下细胞计数均发现人脐带血MNC在小鼠骨髓中的含量与单独脐带血移植相比较有显著提高[(145±59)/1×105vs (298±72)/1×105;(755±158)/5×105vs (1598±227)/5×105个骨髓有核细胞;n=9,P<0.05)]. 结论 hUC-MSC具有表达化学趋化因子及相关黏附分子的特性,有利于实现自身的归巢定位并引导造血干祖细胞的有效归巢与植入;动物模型的建立进一步证实其引导脐带血MNC在NOD/SCID小鼠体内向造血龛--骨髓富集(归巢)的作用.     

MRE肝脏动态硬度变化的离体模型建立

目的:利用离体猪肝,建立模拟肝脏动态硬度变化的模型,用于后续磁共振弹性成像(MRE)区分肝脏硬度动、静态组份的研究。方法:取出猪肝,分离门静脉主干,使用导管插入门静脉。通过输液管将导管与盐水袋连接。将输液架调节至不同高度(0cm,20cm,40cm,80cm,40cm,20cm,0cm)来模拟门静脉不同压力。进行MRE检查,检查完成后结扎第二肝门(肝静脉流出道),重复不同静水压下的离体肝脏MRE检查。结果:随着门静脉静水压的先升高,后下降(生理盐水袋的高度0cm,20cm,40cm,80cm,40cm,20cm,Ocm),离体猪肝模型MRE模量图测量肝脏的平均硬度也先升高,后下降。结论:本研究成功建立了模拟肝脏动态硬度变化的离体猪肝模型.     

成人下肢少见原发软组织肉瘤的MRI表现

目的探讨下肢少见原发软组织肉瘤的MRI特征。方法回顾性分析经手术病理证实的12例下肢少见原发软组织肉瘤的MRI表现。结果平滑肌肉瘤1例,表现为长T1信号,增强后呈明显强化,病灶中心囊变区未见强化。上皮样血管肉瘤2例,1例呈长T1长T2信号;1例呈长T1短T2信号,2例增强后均呈明显强化。滑膜肉瘤9例,6例位于邻近关节肌间隙内;7例肿瘤直径>5 cm;MRI平扫主要表现为长T1长T2信号,2例T2WI表现为低、稍高、高三重混杂信号;9例肿瘤T1WI增强序列均呈明显强化,其中7例因内部组织坏死呈不均匀强化。结论下肢软组织不同类型肉瘤的MRI表现具有一定特征性,MRI检查能够提高术前诊断准确性,确诊仍需依靠病理学检查。     

左胫骨骨神经鞘瘤1例

病例女,22岁,左踝关节疼痛3年,间断发作,加重3天入院.体检:左踝关节压痛、稍肿胀,活动受限,皮温正常,左下肢肌力及感觉未见异常.影像表现:X线左踝关节正侧位:左胫骨远端示偏心性囊状透光区,略呈膨胀性,病灶内侧缘示硬化环,边界较清晰,后缘局部骨皮质中断,病灶内未见钙化影,未见明显骨膜反应,邻近软组织肿胀(图1,2).     

存活蛋白重组腺病毒载体的构建及其在树突状细胞的表达

本研究旨在构建含有人存活蛋白(survivin)基因的重组腺病毒载体,并探讨其在转染树突状细胞中的表达。以质粒pcDNA3.0-survivin为模板,通过PCR扩增获得survivin基因全长序列。PCR产物回收后经酶切,定向插入腺病毒穿梭质粒,获得重组质粒pShuttle-CMV-survivin。通过双酶切、PCR及插入片段测序鉴定后,将正确重组体pShuttle-CMV-survivin转化E.coliBJ5183菌(含腺病毒骨架质粒)并进行同源重组,然后筛选阳性克隆,提取质粒,将此重组腺病毒质粒分别进行酶切、线性化、纯化,用脂质体LipofectamineTM2000介导转染293细胞。制备病毒上清并测定其滴度,将病毒上清转染树突状细胞,应用Westernblot方法分析survivin的表达。结果表明成功构建了含有人survivin基因的重组腺病毒,病毒滴度为2.65×109pfu/ml。Westernblot鉴定显示,经重组腺病毒转染的DC可有效表达survivin。结论含survivin基因的重组腺病毒载体的构建成功,为下一步开展抗白血病免疫研究奠定实验基础。