小鼠眼球标本石蜡切片制作方法的改进

目的探讨小鼠眼球标本石蜡切片的制作方法。方法处死C57BL/6小鼠,取眼球固定于质量分数为4%中性多聚甲醛中,通过严格控制脱水与浸蜡程序并制成石蜡切片,经HE染色后在显微镜下观察。结果眼球外形均无明显变形和收缩;显微镜下视网膜组织结构完整清晰,各层细胞排列紧密,无明显裂隙。结论该方法适合小鼠眼球标本切片,尤其是视网膜切片的一种有效制作方法。     

硫化氢对小鼠皮肤伤口愈合的促进作用

目的研究外源性H2S对皮肤伤口愈合是否具有促进作用。方法将C57BL/6小鼠随机分为对照组(n=10)和H2S组(n=10)。H2S组小鼠注射H2S供体硫氢化钠(NaHS),剂量为50μmol/次,每天1次;对照组注射等量生理盐水(9g/L NaCl),每天1次;给药10d。给药期间每天观察两组小鼠伤口愈合情况,并在建模后第3、7、9、11天测量伤口大小,计算伤口面积。结果与对照组小鼠相比,硫氢化钠干预使小鼠皮肤伤口愈合时间缩短。结论 H2S能促进小鼠皮肤伤口愈合。     

猕猴消化系统各器官蛋白水解酶种类和性质研究

目的 研究太行山猕猴（Ｍａｃａｃａ ｍｕｌａｔｔａ ｔｃｈｅｌｉｅｎｓｉｓ）消化系统各器官蛋白水解酶种类和性质。方法 采用单向活性电泳（１Ｄ－Ｇ－ＰＡＧＥ）和双向活性电泳（２Ｄ－Ｇ－ＰＡＧＥ）技术。结果 （１）消化系统各器官的蛋白水解酶在近中性条件下活性最强,其中９４,８６,６４,５９和２５ｋＤ蛋白水解酶在消化系统各器官中普通存在;（２）消化系统各器官均具有３１,３０,和２９ｋＤ３种酸性蛋白水解酥     

猕猴生殖,泌尿,免疫系统各器官蛋白水解酶种类和性质

为了系统研究太行山猴猴生殖，泌尿，免疫系统各器官蛋白水解酶的种类和性质，用活性单向电泳和活性双向电泳方法研究了太行山猕猴生殖系统，泌尿系统的免疫     

外源性硫化氢减轻小鼠阻塞性肾损伤

目的:探讨外源性硫化氢(H2S)在小鼠阻塞性肾损伤中的保护作用及可能机制。方法:将8周龄的雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术组、手术组和H2S组,每组5只,单侧输尿管结扎(UUO)构建肾阻塞模型,H_2S组小鼠腹腔注射H_2S供体硫氢化钠(Na HS),手术组和假手术组小鼠注射等体积的生理盐水,每天1次。7 d后处死小鼠,取出肾脏,提取RNA行RT-PCR检测3组小鼠肾脏内源性H_2S催化酶mRNA表达的差异;组织HE染色观察3组小鼠肾脏的组织结构的变化;Masson染色检测3组小鼠肾脏纤维化的差异;检测血浆胱抑素C含量来反映肾小球滤过能力;Western blot检测LC3、beclin-1和纤连蛋白(FN)蛋白表达的变化。结果:与假手术组相比,手术组小鼠肾脏中胱硫醚β-合成酶(CBS)、胱硫醚γ-裂解酶(CSE)和3-巯基丙酮酸硫转移酶(3-MST)的mRNA表达显著降低,胶原纤维显著增多,而H_2S组小鼠肾组织胶原纤维又比模型组显著减少。与假手术组相比,手术组小鼠肾脏中FN的蛋白表达显著升高,而H_2S组小鼠的FN表达量比手术组小鼠显著降低;与假手术组相比,手术组和H_2S组小鼠肾组织细胞中LC3-II和beclin-1蛋白表达均显著增高,而H_2S组小鼠肾组织细胞中LC3-II和beclin-1蛋白表达又显著高于手术组。结论:外源性H_2S可能通过上调细胞自噬而减轻UUO小鼠的肾纤维化。     

外源性硫化氢对小鼠原代肝细胞内脂质自噬分解的影响

目的:研究硫化氢(H2S)供体GYY4137释放的外源性H2S对小鼠原代肝细胞内脂质自噬分解的影响。方法:采用2步原位灌流法分离C57BL/6小鼠原代肝细胞并分为4组:用正常培养基培养正常组细胞;模型组用含1.2 mmol/L油酸(溶于10%的BSA)的培养基培养48 h;H2S组和炔丙基甘氨酸(PAG)组则用1.2 mmol/L油酸(溶于10%的BSA)的培养液培养48 h,然后换无血清无酚红的RPMI-1640培养液(同时分别给予1 mmol/L GYY4137和200μmol/L PAG)处理6 h。收集各组细胞做LC3免疫荧光染色,拍摄荧光和相差图片;Western blot检测肝细胞中LC3-Ⅰ/Ⅱ的蛋白表达量;透射电镜观察肝细胞超微结构。结果:和模型组相比,H2S组肝细胞内LC3荧光颗粒和蛋白表达量增加,自噬溶酶体数量增加,细胞内空泡增多。结论:外源性H2S可促进脂肪变性肝细胞内脂质自噬分解。