Mcl-1基因及其在白血病的作用

Mcl-1（myeloid cell leukemia-1）基因作为Bcl-2家族成员之一,在细胞的生存凋亡,周期及分化调控中起着重要的作用。Mcl-1基因与血液系统恶性肿瘤的发生和发展有着密切的关系。     

ST-T钾盐·心得安纠正试验及其应用

心得安为肾上腺素能受体阻滞剂，有降低交感神经紧张性的作用；钾盐可使血钾浓度中等度升高。两者都有消除心肌不均匀复极，使复极过程同步化的作用。尤其钾盐对正常变异或功能性T波异常的作用远比对器质性的T波异常作用显著。所以口服钾盐、心得安可使功能性与器质性的T波异常得到鉴别。特别是对心血管神经官能症的T波异常，作用更加明显。用这种方法纠正功能性T波异常称之谓ST-T钾盐·心得安纠正试验。现介绍如下。 患者主诉胸闷、周身无力、睡眠欠佳、多汗、心悸等症状，而心脏物理检查、X线、实验室检查均无异常，只有心电ST-T改变…     

文氏型Ⅰ°房室传导阻滞伴完全性窦性反复搏动致文氏周期1例

患者女性,35岁,因心慌,气短,盗汗,颈前肿物件有食欲亢进,体重减轻,情绪不稳而入院。临床诊断:原发性甲状腺功能亢进。入院后,先后两次心电图检查均正常。于1991—03—20心电图检查:窦性心律,Ⅰ°Ⅰ型房室传导阻滞伴完全性窦性反复搏动使窦性节律重排。重排后延,造成长间歇呈现假文氏周期现象。见附图Ⅲ导联连续记录。 P_1R_1=0.16S,P_2R_2=O.18S,P_3R_3=O.18S,P_4R_4=0.20S,P_5R_5=0.22S,P_6R_6=0.26S,P_7R_7=0.26S,P_8R_8=0.28S,P_9R_9=0.30S;R_1R_2=0.82S;R_2R_3=0.78S,R_3R_4=0.76S,R_4R_5=0.74S,R_5R_6=0.68S,R_6R_7=0.     

DADS通过Chk1/Cdc25C/CyclinB1/CDK1通路诱导白血病HL-60细胞G_2/M期阻滞

目的研究二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)诱导人白血病HL-60细胞周期阻滞及其分子机制。方法采用细胞计数、软琼脂克隆形成实验及流式细胞术观察DADS对HL-60细胞生长抑制与周期阻滞效应。Western blot检测DADS对HL-60细胞Chk1/2以及下游分子的影响。结果细胞计数显示,60、120μmol·L-1DADS处理后,其群体倍增时间从19.14 h增加到35.03、71.82 h(P<0.05)。软琼脂克隆形成实验表明,30、60、90、120μmol·L-1DADS对HL-60细胞克隆形成率的抑制率分别为35.06%、62.10%、93.79%、99.35%(P<0.05)。流式细胞术检测显示,60和120μmol·L-1DADS分别作用HL-60细胞24 h后,DADS可呈时间与浓度依赖性诱导HL-60细胞G2/M期阻滞(P<0.05)。60μmol·L-1DADS处理HL-60细胞后,p-Chk1可呈时间依赖性上调(P<0.05),而Chk1与Chk2总蛋白和pChk2无改变(P>0.05)。并且,Cdc25C、CyclinB 1和CDK1分别呈时间依赖性下调(P<0.05),但14-3-3蛋白表达没有改变(P>0.05)。结论 DADS能够抑制HL-60细胞增殖,并通过Chk1/Cdc25C/CyclinB 1/CDK1通路阻滞HL-60细胞于G2/M期。     

二烯丙基二硫下调MCL-1诱导K562细胞G_2/M阻滞及其机制

目的:研究二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)下调MCL-1诱导人白血病K562细胞周期阻滞及其机制。方法:采用CCK-8检测DADS对K562细胞增殖的作用;流式细胞术观察DADS与沉默MCL-1对K562细胞周期的影响;Western blot检测MCL-1、PCNA和CDK1表达;免疫共沉淀方法分析MCL-1与PCNA及CDK1结合作用。结果:15、30、60、120、240μmol/L DADS对K562细胞增殖抑制率分别为32.48%、59.34%、66.42%、77.06%和81.05%(P0.05)。60和120μmol/L DADS分别作用K562细胞24和48 h后,G_2/M期细胞分别增加到18.6%与34.4%和17.5%与28.5%(P0.05)。沉默MCL-1可阻滞K562细胞于G_2/M,沉默MCL-1加DADS(60μmol/L)较单独DADS和沉默MCL-1明显增强(P0.05)。DADS可明显下调MCL-1、PCNA与CDK1表达(P0.05)。DADS处理K562细胞8 h,MCL-1与结合的PCNA和CDK1较对照组显著下调(P0.05)。结论:DADS可通过下调MCL-1继而降低PCNA与CDK1表达,抑制K562细胞增殖,细胞阻滞于G_2/M期,沉默MCL-1可增强DADS的作用。     

Mcl-1在二烯丙基二硫诱导人白血病HL-60细胞G_2/M阻滞中的作用

目的:探讨Mcl-1在二烯丙基二硫(DADS)诱导人白血病HL-60细胞周期阻滞过程中的作用。方法:CCK-8检测DADS抑制HL-60细胞的作用;流式细胞术观察DADS对HL-60细胞的周期阻滞效应;West-ern blotting分析DADS处理HL-60细胞后Mcl-1、PCNA(细胞核增殖抗原)、CDK1(周期依赖激酶1)表达情况;RNAi干扰Mcl-1观察Mcl-1对白血病细胞周期的影响;免疫共沉淀分析Mcl-1与PCNA、CDK1结合作用。结果:CCK-8比色结果显示,15、30、60、120、240μmol/L DADS处理HL-60细胞,细胞增殖抑制率分别为31.15%、55.88%、66.14%、75.29%、80.35%,呈浓度依赖性增加(P0.05)。流式细胞术检测显示,60μmol/L和120μmol/L DADS作用HL-60细胞24 h和48 h后,呈时间和浓度依赖性诱导HL-60细胞G2/M期阻滞(P0.05)。Western blotting分析发现60μmol/LDADS处理HL-60细胞后PCNA、Mcl-1、CDK1表达下调(P0.05)。Mcl-1基因沉默24 h后G2/M期百分率增加到19.4%,与对照组比较有显著差异(P0.05)。而Mcl-1基因沉默后加入60μmol/L DADS作用时,G2/M期百分率比60μmol/L DADS处理组增加6.0%(P0.05)。免疫共沉淀发现,HL-60细胞中存在Mcl-1与PCNA、CDK1的相互结合,DADS处理HL-60细胞后Mcl-1与PCNA、CDK1的结合作用减弱。结论:DADS能诱导HL-60细胞增殖抑制和G2/M阻滞,其抑制增殖作用与PCNA表达下调有关。Mcl-1基因沉默可增强DADS对HL-60细胞G2/M期阻滞作用。