基因打靶技术及其在寄生虫学研究的应用

基因打靶是近年来发展起来的现代分子生物学重要的实验技术之一。其原理是通过外源性DNA与细胞内基因组DNA同源序列可发生重组这一性质，人为地定点修饰改造基因组中某些基因的结构和组成，以研究该特定基因在活性中的功能或相关疾病的致病柚是，本仅就该技术的原理和基本操作以及该技术在寄生虫学研究右的应用和进展作一介绍。     

热休克蛋白HSP90β在人胃癌组织及耐药细胞系中的表达

了解热休克蛋白ＨＳＰ９０β在人胃癌组织及多药耐药细胞系中的表达。方法ＳＡＢＣ免疫组化法：７０例胃癌组织，其中高分化腺癌１３例，中分化腺癌３２例，低分化腺癌１８例，粘液癌７例（包括粘膜癌和印戒细胞癌）。正常胃粘膜１７例，胃炎２３例及癌旁组织３５例作为对照。组织切片用正常羊血清封闭后，加入一抗（山羊抗人ＨＳＰ９０β多克隆抗体１：２００），４℃冰箱过夜；加二抗（生物素化兔抗山羊ＩｇＧ１：２００）３７℃３     

不同小剂量多巴酚丁胺超声心动图与18F-脱氧葡萄糖心肌代谢显像对比检测冠心病左心室收缩功能严重受损患者存活心肌

目的 :与18F 脱氧葡萄糖单光子发射计算机断层摄影术 (SPECT)心肌代谢显像对比 ,评价不同小剂量多巴酚丁胺超声心动图 ,检测冠心病左心室收缩功能严重受损患者存活心肌的准确性和安全性。方法 :冠心病心肌梗死伴左心室收缩功能严重受损 (平均左心室射血分数 0 3 8± 0 0 5 )的患者 3 3例 ,1周内分别进行不同小剂量多巴酚丁胺 [3、5、10 μg/(kg·min) ]超声心动图和99m锝 甲氧基异丁基、18F 脱氧葡萄糖SPECT心肌灌注及代谢显像。图像分析均采用 16节段半定量法。以18F 脱氧葡萄糖SPECT检测结果为标准 ,评价不同小剂量多巴酚丁胺超声心动图检测存活心肌的敏感性、特异性、准确性和安全性。结果 :3 3例患者的 3 65个运动异常节段中存活心肌检出率 :18F 脱氧葡萄糖SPECT心肌代谢显像检出的存活心肌节段为 67 4% ,多巴酚丁胺 3、5和 10 μg/(kg·min)分别为 3 8 9%、61 4%和 70 4%。多巴酚丁胺 3 μg/(kg·min)检出的存活心肌节段显著低于18F 脱氧葡萄糖SPECT心肌代谢显像检出的存活心肌节段 (P <0 0 0 1)。多巴酚丁胺 3、5、10μg/(kg·min)超声心动图检出存活心肌的敏感性分别为 5 1 6%、82 9%和 91 8% ,准确性分别为 63 6%、81 6%和87 8% ,均显著递增 (P <0 0 5～ 0 0 0 1) ;副作用发生率分别     

小剂量多巴酚丁胺、硝酸异山梨酯单用及合用的超声心动图检测冠心病左心室收缩功能严重减低患者的存活心肌

目的与99mTc-甲氧基异丁腈(MIBI)/18F-脱氧葡萄糖(18FDG)双核素同时采集法(DISA)SPECT心肌显像对比,评价小剂量多巴酚丁胺(Dob)、硝酸异山梨酯单用及合用的二维超声心动图(2DE)试验检测冠心病伴左心室收缩功能严重减低患者(左室射血分数,LVEF≤45%)存活心肌的效果.     

军队医院门诊部的职能作用探析

门诊是医院的重要组成部分,门诊工作质量是衡量一个医院管理水平的重要标志之一.随着医改的不断深入,患者需求的不断提高,对门诊工作质量和工作效率提出新的更高的要求.为此,我们针对军队医院的特点,从明确门诊部的管理职能定位人手,充分发挥门诊部的组织协调作用,加大门诊工作管理力度,提高门诊工作质量效率,门诊量以每年10余万的速度递增,2010年达到138万人次.     

妇女妊娠期及分娩前后宫颈的超微结构研究

透射电镜观察证明,分娩前后人宫颈组织内出现以胶原纤维溶解和重建为主要特征的适应性改建过程.平滑肌细胞,成纤维细胞,巨噬细胞,中性白细胞及肥大细胞等多种细胞成分参与这一改建过程.它们既参与胶原纤维的溶解和吸收,又参与重新形成.文内还讨论了这些细胞之间的相互作用及调控它们形态与功能状态的因素.     

恶性疟原虫pGST—HTl融合表达载体的构建及在大肠杆菌中的高效表达

目的 构建pGST—HT1融合表达载体,并观察其在大肠杆菌中的表达情况。方法 基因扩增,融合表达载体的构建,SDS—PAGE电泳和Western blot分析。结果 对重组质粒进行酶切鉴定证实HT11片段已克隆到pGSTag的EcoRI和Sall位点之间。表达产物经SDS—PAGE电泳后显示在相对分子质量82000处出一条新生蛋白带,与HT1／GST(56／26)融合蛋白大小一致,提示成功表达HT1融合蛋白。Western印迹杂交结果也显示在相对分子质量82000处出现阳性着色条带。结论 本实验成功构建pGST—HTl表达载体,并诱导表达出HTl融合蛋白,为HTl蛋白功能和免疫原性的进一步研究奠定了基础。     

恶性疟原虫反义HRPⅡ基因荧光真核表达重组质粒的构建

目的 构建恶性疟原虫组氨酸富集蛋白Ⅱ（ＨＲＰⅡ）反义真核表达载体,为研究ＨＲＰⅡ反义核权的抗疟作用奠定基础。方法 应用基因重组技术,将我们已经克隆的恶性疟原虫ＨＲＰⅡ基因从ＨＲＰⅡ／ｐＵＣ１９反向亚克隆入荧光表达载体ｐＥＧＦＰ－Ｎ３,用含卡那霉素ＬＢ培养基平板筛选转化菌,阳性重组子经ＨｉｎｄⅢ和ＳａｃⅠ双酶切分析、ＰＣＲ鉴定。结果 恶性疟原虫ＨＲＰⅡ基因从ＨＲＰⅡ／ｐＵＣ１９重组质粒中,成功地亚克     

静脉穿刺辅助装置在儿童患者静脉输液中的应用

目的 验证静脉穿刺辅助装置辅助护士进行静脉穿刺操作在儿童患者静脉输液中的应用效果.方法 将256例输液患儿按随机抽样法分为观察组(静脉穿刺辅助装置应用组,124例)和对照组(非装置组,132例),比较两组患儿的一次性穿刺成功率、建立单个静脉通路时间、患儿依从性、静脉穿刺疼痛程度.结果 观察组患儿的一次性穿刺成功率、依从性高于对照组,建立单个静脉通路时间及静脉穿刺疼痛程度低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 静脉穿刺辅助装置能够在显示屏上实时动态显示静脉走形,有效提高护士穿刺成功率、患儿依从性,降低患儿疼痛程度,缩短建立静脉通路时间,减轻了护士工作压力,适用于儿科病房、门急诊输液室等静脉穿刺工作.