点突变Uchl1不影响小鼠卵母细胞成熟

目的 通过观察突变蛋白与野生蛋白过量对卵母细胞成熟过程的影响,分析Uchl1在小鼠卵母细胞离体成熟中发挥的作用及其作用方式。方法 通过原核重组蛋白技术制备点突变（C90S和I93M）和野生型Uchl1蛋白,通过蛋白微量注射技术将突变蛋白与对照蛋白注射到未成熟卵母细胞,或体外培养液中添加突变蛋白与野生型蛋白,分析野生型Uchl1过量,或突变Uchl1-I93M蛋白添加,或泛素水解酶活性缺失的Uchl1-C90S突变蛋白添加,对于卵母细胞体外成熟的影响。结果 显微注射UCHL1融合蛋白的各组之间以及与注射PBS之间, GVBD率差异没有达到统计学显著性;同时培养液中添加Uchl1的GST融合蛋白,相对于无注射对照组,也没有统计学显著差异（P>0.05）。注射GST-C90S融合蛋白组少量GV期卵母细胞体外发育为MII期卵母细胞后呈现极体偏大于对照组。I93M点突变小鼠与WT小鼠比较,GV期卵母细胞体外GVBD率无显著差异。结论 在小鼠卵母细胞中,添加外源性Uchl1,或者有毒性作用的I93M突变体,或者水解酶活性结构改变的C90S突变体,均不影响卵母细胞成熟的GVBD进程。即使构建的I93M点突变小鼠卵母细胞GVBD率无异常。但是,其水解酶活性位点突变影响极体的形成。     

移植日注射人绒毛膜促性腺激素对冻融胚胎移植妊娠结局的影响

目的：探讨移植日注射人绒毛膜促性腺激素（human chorionic gonadotropin,hCG）是否影响冻融胚胎移植（frozen-thawed embryo transfer,FET）的妊娠结局。方法：回顾性分析第二军医大学附属长海医院生殖医学中心2015年5月—2017年8月1 636例FET周期不孕症患者临床资料,根据胚胎移植日是否注射hCG分为hCG组（1 084例）和对照组（552例）,分析2组患者胚胎移植后临床妊娠结局。结果：2组患者年龄、体质量指数、不孕时间、基础卵泡刺激素水平和子宫内膜准备方案、移植日子宫内膜厚度、移植胚胎数差异均无统计学意义（P＞0.05）。2组的临床妊娠率、胚胎着床率、异位妊娠率、流产率、活产率差异均无统计学意义（P＞0.05）。根据移植胚胎期别进行卵裂期、桑葚胚期、囊胚期胚胎移植亚组分析后,2组的妊娠结局差异无统计学意义（P＞0.05）。Logistic多因素回归分析结果提示年龄、移植胚胎数以及移植优质胚胎数是影响临床妊娠的因素;而年龄是影响活产率的独立影响因素：年龄越大,活产率越低。结论：FET移植日注射hCG对妊娠结局没有显著的影响,年龄是影响妊娠结局的主要因素。     

尿胰蛋白酶原-2与淀粉酶联合检测诊断急性胰腺炎的价值探讨

近年来我们采用血、尿淀粉酶与尿胰蛋白酶原 2联合检测诊断急性胰腺炎 ,现报告如下。对象与方法一、对象 :对 1999年 10月至 2 0 0 0年 5月因急腹痛来院急诊的 4 5 0例病人取尿检测胰蛋白酶原 2和淀粉酶 ,同时抽血测淀粉酶。二、方法 :尿胰蛋白酶原 2检测 :按说明书操作。将试纸条的浸渍区浸入尿液中。液体被吸收 ,渗透到试纸条上。标本中的胰蛋白酶原 2将和乳胶粒子结合 ,粒子随着液体一起流过试纸条 ,胰蛋白酶原 2结合的粒子将与固定的抗体结合。如果标本含有超过常量的胰蛋白酶原 2 (>5 0ｎｇ/ｍｌ) ,将形成一条蓝色线条 (阳性线 )…     

冻融胚胎复苏后培养时间对临床妊娠率的影响

【摘要】 目的 探讨卵裂期冻融胚胎复苏后体外培养时间对冻融胚胎移植（FET）周期临床妊娠率的影响。 方法 收集2016年1月至12月在海军军医大学（第二军医大学）长海医院生殖医学中心接受FET助孕的692例患者的临床资料。根据胚胎复苏后移植前体外培养的天数将患者分为3组：D0组（复苏后当天未培养）、D1组（复苏后培养1d）、D2组（复苏后培养2 d）,分析比较三组间的妊娠结局。结果 三组患者年龄、体质量指数、不孕年限、基础FSH水平以及内膜准备方案组成均没有统计学差异（P>0.05）;随着冷冻胚胎复苏后培养时间的增加,胚胎丢失率逐渐增加（D0组0.0%→D1组13.3%→D2组43.0%,P<0.05）。三组移植日子宫内膜厚度及平均移植胚胎数均无差异（P>0.05）;尽管D2组及D1组优质胚胎移植率均低于D0组（P<0.05）,但D2组临床妊娠率却高于D0组（62.7% VS 38.6%,P<0.05）、D1组与D0组无统计学差异（45.2% VS 38.6%,P>0.05）。 结论 解冻卵裂期胚胎进行体外培养1～2天后移植,虽然增加胚胎丢失率,但可筛选具有发育潜能的胚胎,显著提高临床妊娠率,因此临床医生需要权衡利弊及风险。     

阴道B超下输卵管盆腔显影术在不孕症诊治中的应用

输卵管性不孕是女性不孕的主要原因之一，为了提高对输卵管性不孕的判断准确性，我们开展了阴道B超(阴超)下输卵管显影术，现报道如下。     

移植日注射人绒毛膜促性腺激素对冻融胚胎移植妊娠结局的影响

目的:探讨移植日注射人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,hCG)是否影响冻融胚胎移植(frozen-thawed embryo transfer,FET)的妊娠结局。方法:回顾性分析第二军医大学附属长海医院生殖医学中心2015年5月—2017年8月1 636例FET周期不孕症患者临床资料,根据胚胎移植日是否注射h CG分为hCG组(1 084例)和对照组(552例),分析2组患者胚胎移植后临床妊娠结局。结果:2组患者年龄、体质量指数、不孕时间、基础卵泡刺激素水平和子宫内膜准备方案、移植日子宫内膜厚度、移植胚胎数差异均无统计学意义(P0.05)。2组的临床妊娠率、胚胎着床率、异位妊娠率、流产率、活产率差异均无统计学意义(P0.05)。根据移植胚胎期别进行卵裂期、桑葚胚期、囊胚期胚胎移植亚组分析后,2组的妊娠结局差异无统计学意义(P0.05)。Logistic多因素回归分析结果提示年龄、移植胚胎数以及移植优质胚胎数是影响临床妊娠的因素;而年龄是影响活产率的独立影响因素:年龄越大,活产率越低。结论:FET移植日注射h CG对妊娠结局没有显著的影响,年龄是影响妊娠结局的主要因素。     

受精第3天胚胎卵裂速度和囊胚发育潜能的关系

目的 探讨受精第3天胚胎卵裂速度是否可以预测囊胚发育潜能及辅助生殖临床结局.方法 回顾性分析2016年1月1日至2018年12月31日于我中心行体外受精/卵胞质内单精子注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)治疗的150例不孕症患者的临床资料及所有366枚新鲜囊胚移植的胚胎数据.根据受精第3天卵裂球的细胞数目将胚胎分为慢发育组(细胞数目≤6个,n=78)、正常发育组(细胞数目7～9个,n=230)和快发育组(细胞数目≥10个,n=58).分析比较3组的囊胚形成率、优质囊胚形成率、胚胎种植率、临床妊娠率及活产率.结果 慢发育组、正常发育组和快发育组囊胚形成率分别为7.7％(6/78)、55.7％(128/230)和29.3％(17/58),其中正常发育组的囊胚形成率最高,与其他两组比较差异均有统计学意义(P均<0.01);3组优质囊胚形成率分别为0(0/6)、7.0％(9/128)和11.8％(2/17),其中快发育组最高,与正常发育组比较差异有统计学意义(P<0.05);胚胎种植率分别为0(0/18)、50.6％(80/158)和63.3％(19/30),其中快发育组最高,与正常发育组比较差异有统计学意义(P<0.05).正常发育组临床妊娠率为53.7％(58/108)、活产率为41.4％(24/58);快发育组临床妊娠率为63.0％(17/27),活产率为47.1％(8/17);正常发育组与快发育组临床妊娠率和活产率比较差异均有统计学意义(P均<0.05).结论 受精第3天细胞数目7～9的卵裂胚囊胚形成率最高,细胞数目≥10的卵裂胚优质囊胚形成率、胚胎种植率、临床妊娠率及活产率较高,提示快速发育的胚胎有正常的发育潜能.     

泛素羧基末端水解酶L1 C90S和I93M点突变不影响小鼠卵母细胞成熟

目的 通过观察泛素羧基末端水解酶L1(UCHL1)点突变蛋白与野生型蛋白过量对小鼠卵母细胞成熟的影响,并分析其在小鼠卵母细胞离体成熟过程中的作用及作用方式.方法 通过原核重组蛋白技术制备UCHL1点突变(C90S和I93M)和野生型蛋白与谷胱甘肽S-转移酶(GST)的融合蛋白,通过显微注射技术将UCHL1野生型蛋白与GST的融合蛋白、UCHL1点突变蛋白与GST的融合蛋白、GST、PBS分别注射到小鼠未成熟卵母细胞,或在体外培养基中添加UCHL1野生型蛋白与GST的融合蛋白,分析野生型UCHL1过量、UCHL1(I93M)点突变蛋白添加及泛素水解酶活性缺失的UCHL1(C90S)点突变蛋白添加对卵母细胞生发泡破裂(GVBD)率的影响.分离UCHL1(I93M)点突变小鼠与野生型小鼠的生发泡期卵母细胞,体外培养3 h后比较其GVBD率.结果 显微注射UCHL1野生型蛋白及其点突变体与GST的融合蛋白的各组之间、注射GST组、注射PBS组卵母细胞GVBD率差异均无统计学意义,在培养基中添加UCHL1蛋白与GST的融合蛋白组卵母细胞GVBD率与无注射无添加对照组相比差异也无统计学意义(P均>0.05).注射UCHL1(C90S)与GST的融合蛋白组有少量生发泡期卵母细胞体外发育为MⅡ期卵母细胞后呈现极体较对照组偏大的现象.UCHL1(I93M)点突变小鼠生发泡期卵母细胞体外GVBD率与野生型小鼠比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 在小鼠卵母细胞中添加外源性UCHL1、有致病作用的UCHL1(I93M)突变体或泛素水解酶活性丧失的UCHL1(C90S)突变体均不影响卵母细胞成熟的GVBD进程,UCHL1(I93M)点突变小鼠卵母细胞GVBD率亦无异常,但UCHL1(C90S)点突变可能影响极体的形成.     

染色体多态性不影响体外受精胚胎移植技术的生殖结局

目的 探讨染色体多态性对体外受精/卵胞质内单精子显微注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)助孕患者临床妊娠结局的影响.方法 回顾性分析2015年3月-2016年6月在第二军医大学长海医院生殖医学中心首次进行IVF/ICSI-ET周期不孕不育夫妻的临床资料.根据夫妻一方或双方染色体是否存在多态性分为2组:染色体多态性组(夫妻一方或双方存在染色体多态性)和染色体正常组(夫妻双方染色体均正常).比较分析两组夫妻在IVF/ICSI-ET治疗后的胚胎种植率、临床妊娠率、早期流产率和每移植周期活产率.结果 共纳入1 108对行IVF/ICSI-ET助孕的不孕不育夫妻,其中染色体多态性组69对,染色体正常组1 039对.染色体正常组和染色体多态性组的胚胎种植率(34.91％vs 34.62％,P＞0.05)、临床妊娠率(49.09％ vs 50.72％,P＞0.05)、早期流产率(11.37％ vs 8.57％,P＞0.05)、每移植周期活产率(41.67％vs 43.47％,P＞0.05)差异均无统计学意义.结论 染色体多态性不影响IVF/ICSI-ET助孕患者的临床结局.     

中国优生及辅助生殖的挑战与出路

人类辅助生殖技术给我国日益增长的不孕不育患者带来了希望,但同时也增加了后代出生缺陷甚至成人疾病的发生风险.本文阐述了影响优生的配子、胚胎、母源因素以及辅助生殖安全性,旨在强调提升下一代健康水平应以配子/胚胎健康为本,可借助基因组学新技术降低遗传性出生缺陷发生率,防控胚胎发育源性成年病风险.