参三七皂苷Rg1预适应对5-氮胞苷诱导大鼠骨髓间充质干细胞向心肌细胞转化的干预

目的:用药物预适应方法进行干细胞诱导已有报道,本实验观察中药参三七皂苷Rg1对5-氮胞苷诱导大鼠骨髓间充质干细胞向心肌细胞转化中的作用。方法:实验于2003-01/05在南京医科大学药理教研室完成。①实验材料:清洁级SD大鼠8只。参三七皂苷Rg18mg,批号20021017,由云南省长春花生物制剂公司提供,加入不含胎牛血清的IMDM培养液10mL,调配成10-4mol/L溶液,4℃保存。5-氮胞苷(Sigma公司,批号021209)。②实验方法:贴壁法体外培养大鼠骨髓间充质干细胞。设立4组:空白对照组常规培养后进行无血清处理,每3d换液1次;5-氮胞苷单用组单纯以10μmol/L的5-氮胞苷进行处理,其终浓度为1×10-8moL/L,连续诱导15d;5-氮胞苷 参三七皂苷Rg1预适应组分别加入0.1,1μmol/L参三七皂苷Rg1培养液处理24h,再各以10μmol/L的5-氮胞苷进行诱导,其终浓度为1×10-8moL/L,连续诱导15d。③实验评估:取第2代骨髓间充质干细胞,绘制生长曲线并计算群体倍增时间。观察诱导后骨髓间充质干细胞的生长形态学特征和细胞超微结构变化。激光共聚焦显微镜测定细胞表面积变化和细胞内钙离子浓度。结果:①5-氮胞苷诱导后骨髓间充质干细胞的生长形态学特征和细胞超微结构变化:骨髓间质干细胞胞体逐渐增大并伸出细长突起,在突起末端出现分支,部分相邻细胞的突起连接成网,形态学上表现出向心肌细胞方向转化的特征。其超微结构呈梭形,有明显的肌丝,细胞核呈单椭圆形,位于细胞中央,间质干细胞形似心肌细胞。②参三七皂苷Rg1预适应对5-氮胞苷诱导的骨髓间充质干细胞增殖特性的影响:与5-氮胞苷单用组比较,5-氮胞苷 参三七皂苷Rg1预适应组从第3天开始细胞数明显增加,细胞生长曲线均无明显的生长平台期,达到高峰后细胞数开始减少。③参三七皂苷Rg1预适应对5-氮胞苷诱导的骨髓间充质干细胞表面积的影响:与空白对照组骨髓间充质干细胞表面积比较,5-氮胞苷单用组明显降低,0.1,1μmol/L参三七皂苷Rg1预适应则能显著升高5-氮胞苷诱导的骨髓间充质干细胞表面积(P<0.01)。④参三七皂苷Rg1对5-氮胞苷诱导的骨髓间充质干细胞内游离钙水平的影响:与空白对照组比较,5-氮胞苷诱导4周后骨髓间充质干细胞内游离Ca2 相对荧光强度均明显升高(t=6.72,P<0.01),且5-氮胞苷 1μmol/L参三七皂苷Rg1预适应组升高幅度大于5-氮胞苷单用组(t=3.13,P<0.05)。结论:①参三七皂苷Rg1预适应在体外可显著刺激5-氮胞苷诱导的鼠骨髓间充质干细胞向心肌细胞转化和增殖,改善细胞形态,刺激细胞内钙离子增加。②参三七皂苷Rg1与5-氮胞苷对骨髓间充质干细胞向心肌细胞定向分化产生协同效应。     

5-氮胞苷对培养大鼠骨髓基质细胞β肌球蛋白重链表达的影响 骨髓干细胞移植与心肌修复的相关效应

目的研究5-氮胞苷(5-AZ)对体外培养大鼠骨髓基质细胞(BMSC)中心肌特异性β肌球蛋白重链(β-MHC)表达的影响,探讨骨髓基质细胞向心肌样细胞分化的条件。方法体外分离培养大鼠BMSC,用不同浓度5-AZ诱导培养,以RT-PCR方法测定诱导前后β-MHC的表达。结果正常培养大鼠BMSC不表达β-MHC。经5-AZ诱导24h并继续培养后,BMSC表达β-MHC,第1～4周内由1.89±0.37增至16.41±3.63(t=0.495～5.446,P<0.01=;(1×10-7)～(1×10-5)mol/L5-AZ使β-MHC的表达由7.30±1.77增至16.28±3.72(t=0.442～2.669,P<0.01)。结论5-AZ诱导体外培养大鼠BMSC表达心肌特异性β-MHC,与诱导时间及浓度呈正相关,提示可诱导大鼠BMSC向心肌样细胞分化。     

扩张型心肌病患者血清可溶性细胞间黏附分子与血管功能和心功能的关系

目的:观察扩张型心肌病(DCM)患者外周血中可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)的水平及与血管功能和心功能的关系.方法:DCM患者65例,正常对照组49例.用酶联免疫吸附法测定2组血清中sICAM-1的水平;用无创动脉功能测定仪测定大动脉弹性指数(C1)和小动脉弹性指数(C2).用NYHA分级评价心功能.结果:①DCM组外周血sICAM-1的水平显著高于正常对照组,而DCM组C2显著低于正常对照组,2组间C1差异无统计学意义;②血清sICAM-1与C2呈负相关.sICAM-1是影响C2的重要因素;③随着心功能下降,血清中sICAM-1的水平逐渐升高,两者呈等级相关.结论:DCM患者心功能和血管内皮功能下降与sICAM-1升高有关.     

心肌成形术的进展

心肌成形术是心肌重建治疗的有效方法 ,分为动力性、细胞性和分子性心肌成形术。随着研究的深入 ,可望为心肌异常性疾病的治疗开辟新的途径。     

siRNA靶向干扰IL28RA基因对缺氧复氧心肌细胞损伤的保护作用

目的:探讨小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)靶向干扰白细胞介素28受体α(interleukin 28 receptor alpha,IL28RA)基因对心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用?方法:设计合成干扰IL28RA基因表达的3对siRNA(siRNA-6158?siRNA-6160?siRNA-6162),采用脂质体转染原代乳大鼠心肌细胞,分为正常对照组?单纯缺氧复氧组?缺氧复氧+阴性对照转染组?缺氧复氧+siRNA-6158转染组?缺氧复氧+siRNA-6160转染组?缺氧复氧+siRNA-6162转染组,探索siRNA转染心肌细胞的合适浓度,检测心肌细胞存活率?培养液中LDH的水平及心肌细胞IL28RA蛋白表达,观察siRNA干扰IL28RA基因对心肌细胞缺氧复氧过程中的保护作用?结果:采用脂质体转染法,siRNA浓度在80 nmol/L对心肌细胞具有较高的转染效率?与单纯缺氧复氧组和缺氧复氧+阴性对照转染组比较,缺氧复氧+siRNA-6158转染组和缺氧复氧+siRNA-6160转染组的LDH活性明显降低(P < 0.05),心肌细胞存活率明显升高 (P < 0.05),IL28RA蛋白表达明显减少(P < 0.05)?结论:干扰IL28RA基因的表达有望成为保护缺氧复氧心肌损伤的重要手段?     

从2017加拿大高血压指南看肾素血管紧张素醛固酮系统阻断剂+利尿剂固定复方制剂的临床优势

正加拿大高血压学会发布的《2017年成人高血压的诊断、风险评估、预防和治疗指南》(新指南)与1999年加拿大高血压指南及每年更新的加拿大高血压教育计划相比,新指南涵盖了近年公布的多项重要循证证据,并对高血压治疗中的关键问题进行了更新。他山之石可以攻玉,该更新指南,或为我国高血压防治带来一些重要启示。1再次肯定强化降压理念新指南认为,对于无合并症的高血压患者,年龄与衰弱状态不应成为启动降压治疗的依据。这一观点来     

在家测血压 要注意细节

随着人们对高血压危害认识的提高，越来越多的人开始在家自测血压。以下是一些读者咨询关于家庭自测血压和血压计的问题。 Q我家中备有电子血压计，夏天量时血压基本正常，但冬天量时血压就偏高了。是不是电子血压计受温度影响大，不太准？     

血管紧张素Ⅲ的研究进展

肾素-血管紧张素系统(RAS)是机体生理活动调节的重要组成部分.经典的RAS包括肾素、血管紧张素原(AGT)、血管紧张素Ⅰ(Ang Ⅰ)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及其受体、代谢过程中的相关酶,其中AngⅡ在RAS中起主要作用,参与压力反射、水盐调节、醛固酮释放、抗利尿激素释放等.     

高血压患者肿瘤坏死因子α与动脉顺应性的关系

目的探讨高血压患者肿瘤坏死因子α(TNF-α)与动脉顺应性的关系。方法按照SBP和(或)DBP≥140/90mmHg诊断为高血压的标准,将366例受试者分为正常对照组和高血压组,用CVProfilorDO-2020动脉脉搏分析仪分别测定各组受试者大动脉弹性指数(C1)、小动脉弹性指数(C2),用放免法分别检测其血清TNF-α和胰岛素浓度,用胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)评价胰岛素抵抗(IR)。结果(1)高血压组C1(10·55±3·11)mL/mmHg×10,C2(3·62±1·51)mL/mmHg×100均低于正常对照组[(C1=13·24±4·27)mL/mmHg×10,(C2=6·04±2·66)mL/mmHg×100,P均<0·01],而TNF-α(0·31±0·05)ng/mL高于正常对照组(0·24±0·07)ng/mL,P<0·01;(2)偏相关分析显示,在正常对照组中TNF-α与HOMA-IR、体重指数(BMI)正相关(r=0·171,r=0·229,P均<0·05);在高血压组中TNF-α与C1、C2负相关(r=-0·132,r=-0·392,P均<0·05),与BMI、HOMA-IR、舒张压(DBP)、脉压(PP)正相关(BMI:r=0·427,HOMA-IR:r=0·154,DBP:r=0·144,PP:r=0·182,P均<0·05)(3)在高血压组进行多元回归分析显示,影响C1、C2的因素为年龄与SBP。当自变量排除年龄后,TNF-α和HOMA-IR可进入影响C1、C2的回归模型。结论高血压患者TNF-α浓度增高,TNF-α及HOMA-IR与动脉顺应性的相关性依赖于年龄。     

甲状腺素对老年慢性心力衰竭患者外周血淋巴细胞β受体基因表达的影响

目的 观察补充甲状腺素对老年慢性心力衰竭(CHF)患者外周血淋巴细胞β肾上腺素能受体(β受体)密度及其β1肾上腺素能受体(β1受体)基因表达的作用,并评价此疗法的安全性.方法 42例扩张型心肌病和缺血性心肌病所致的老年CHF患者,随机分为常规治疗组和联合治疗组,联合治疗组在常规治疗基础上加服左甲状腺素钠片(优甲乐,德国Meck药业产品),初始量12.5μg/d,1周后逐渐增加剂量,维持在25～100μg/d.治疗前、治疗后1个月分别测定血清甲状腺素水平、同位素放射配基法测定外周血淋巴细胞β受体密度、逆转录聚合酶链反应法测定外周血淋巴细胞β1.受体基因表达水平,并与健康人对照比较.结果 (1)常规治疗组、联合治疗组外周血淋巴细胞β受体密度分别为(51.3±25.4)和(52.3±.2)fmol/106cells,β1基因表达水平低于健康对照组的(69.6±4.2)fmol/106cells;(2)左甲状腺素钠片可上调外周血淋巴细胞β受体密度[两组分别为(51.6±3.4)和(58.3±3.7)fmol/106 cells];(3)小剂量甲状腺素增加CHF患者外周血淋巴细胞β1受体基因表达水平.结论 补充小剂量甲状腺素,可增加CHF患者外周血淋巴细胞β受体密度及其β1受体基因表达.