精准医疗时代转化序贯外科方案会成为晚期肝癌治疗的有效选择吗?

肝癌是我国常见的恶性肿瘤,多数患者就诊时已属晚期,生存期短,预后极差,是严重影响我国国民身体健康的重大疾病,通过多学科综合治疗延长生存期改善生活质量是医学界的广泛共识。近年来,免疫阻断点抑制剂联合抗血管生成靶向药物用于晚期肝癌的治疗取得了令人鼓舞的疗效。本文重点探讨免疫阻断点抑制剂联合抗血管生成靶向药物转化序贯外科治疗方案在晚期肝癌治疗中的几个焦点问题,并就免疫阻断点抑制剂联合抗血管生成靶向药物转化序贯外科方案在晚期肝癌治疗方面的前景做一展望。     

再次肝移植单中心16例分析

目的 研究再次肝移植术的手术适应证、临床效果和预后.方法 回顾性分析2004年4月至2013年4月我中心进行的612例肝移植临床资料.结果 共有16例再次肝移植,再次肝移植率2.61％(16/612).两次移植间隔时间(即首次移植物存活时间)为(16.2±18.3)个月(10 d至64个月,中位时间9.5个月).再次肝移植后总体病死率50％(8/16),围手术期病死率18.75％(3/16);再次移植物存活时间为(37.4±34.3)个月(3d至94个月,中位时间39.5个月);受者平均生存时间(53.6±33.9)个月(10 d至94个月,中位时间57个月),5年总体生存率48.3％.结论 对于肝移植术后常规方法难以治疗的严重并发症,再次肝移植是合理、必要和可行的救治手段.再次肝移植在首次移植6个月后进行,有利于降低再次肝移植的围手术期病死率.     

肝移植术后乙肝主动免疫重建受体停用乙肝免疫球蛋白和(或)抗病毒药物的可行性

目的 探讨乙肝肝移植术后乙肝主动免疫重建成功受体停用乙肝免疫球蛋白(HBIG)和(或)抗病毒药物的可行性及临床指征.方法 检测乙肝主动免疫重建成功受体体内的HBV DNA和ccc DNA的水平,并监测其停用HBIG和(或)抗病毒药物后的乙肝复发情况.结果 共20例乙肝主动免疫重建成功受体纳入本研究.所有受体血浆均未检测到HBV DNA,1例受体的外周血单个核细胞中检测出微量HBV DNA (0.023 6 copies/cell),另1例受体的肝组织中检测出微量HBV DNA,但均未检测到ccc DNA.随访期间,所有受体均停用HBIG,13例停用抗病毒药物.1例外周血单个核细胞中检测到HBV DNA的受体有乙肝复发,并检测出HBV变异(变异位点G145R).结论 乙肝肝移植术后乙肝主动免疫重建成功受体停用HBIG和(或)抗病毒药物是安全可行的,但必须在停药前检测体内的HBV和病毒变异情况.     

腹腔镜射频消融治疗肝脏肿瘤的初步观察

<正>随着生物医学技术的进步,射频消融已成为治疗小肝癌的一个重要手段。临床上,常用的肝癌射频消融途径有影像引导经皮射频消融及开腹射频消融。但经皮途径较难处理特殊位置肝癌且易导致合并症[1-2],而开腹射频消融对某些全身情况差或重要脏器功能不全患者也不适宜[3-4]。肝癌腹腔镜射频消融(laparoscopic radiofrequency ablation,LRFA)可在一     

卵巢癌相关成纤维细胞的培养及其对癌细胞侵袭力的影响

目的 探讨卵巢癌相关成纤维细胞(CAFs)对卵巢癌细胞株CAOV3侵袭力的影响.方法用组织块贴壁培养法获得原代卵巢CAFs和卵巢正常成纤维细胞(NFs);通过倒置相差显微镜观察细胞形态和多种蛋白的免疫组化染色,对卵巢CAFs进行鉴定,观察CAFs对CAOV3侵袭力的影响.结果获得纯化的卵巢CAFs,其波形蛋白、α-平滑肌肌动蛋白染色呈阳性,角蛋白呈阴性;CAFs可显著提高CAOV3的侵袭能力(P<0.01).结论与NFs相比,CAFs在形态结构、蛋白表达等方面均有显著差异,卵巢CAFs可增强CAOV3侵袭作用.     

吲哚胺2,3双加氧酶在病毒感染中的作用

吲哚胺2,3双加氧酶(indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO)是色氨酸犬尿氨酸代谢途径的限速酶.IDO在抗病毒免疫中起重要作用,他能介导IFN-γ病毒及有免疫调节和致免疫耐受功能.本文就其在抗病毒免疫方面作一综述.     

肝组织中HBV cccDNA荧光定量聚合酶链反应检测法的建立

目的 建立和优化一种灵敏、特异的检测肝组织中乙型肝炎(乙肝)病毒(HBV)共价闭合环状DNA(cccDNA)荧光定量聚合酶链反应(荧光定量PCR).方法 设计检测HBV DNA(tDNA)和cccDNA特异性引物及探针,用3.44×100-3.44×109copies/μl含HBV全基因组序列(C基因型)质粒作为标准品,建立荧光定量PCR检测标准曲线.取33例乙肝肝癌患者肝组织标本、13例慢性乙肝患者肝活检组织标本和10例非乙肝患者肝组织标本,验证该法灵敏度和特异度.提取肝组织中DNA,取一部分进行质粒安全ATP依赖的DNA酶(PSAD)酶切;另一部分不酶切作为tDNA和β-globin检测样本,分别进行HBV cccDNA、tDNA和p-globin定量检测,以β-globin为参比,对每个细胞的HBV cccDNA和tDNA含量进行标准化.结果 检测肝组织中HBV cccDNA和tDNA定量的线型范围均为3.44 × 100-3.44×109 copies/μl.检测HBV cccDNA和HBV DNA下限均为3.44×100copies/μl.33例乙肝肝癌患者和13例慢性乙肝患者的肝组织中HBV cccDNA最低含量分别为0.003 copies/cell和0.031 copies/cell;检测10份非乙肝肝癌患者的肝组织标本均为阴性.应用PSAD消化肝组织中提取的DNA可减少假阳性,提高cccDNA检测法特异度达7.24× 102倍.对2例乙肝肝癌患者的肝组织标本重复检测5次,Ct值的变异系数为0.224%～0.609%.结论 该方法灵敏度和特异度高,重复性好,可用于检测肝组织中HBV cccDNA.

Abstract：

Objective To establish and optimize a sensitive and specific quantitative realtime polymerase chain reaction(PCR)method for detection of hepatitis B virus covalently closed circular DNA(HBV cccDNA)in liver tissue. Methods Specific primers and probes were designed to detect HBV DNA(tDNA)and cccDNA. A series of plasmids(3.44 × 100-3.44 × 109 copies/μl)containing a full double-stranded copies of HBV genome(genotype C)were used to establish the standard curve of real-time PCR. Liver samples of 33 patients with HBV related hepatocellular carcinoma(HCC), 13 Chronic hepatitis B patients(CHB)and 10 non-HBV patients were collected to verify the sensitivity and specificity of the assay. A fraction of extracted DNA was digested with a Plasmid-Safe ATP-dependent Dnase(PSAD)for HBV cccDNA detection and the remaining was used for tDNA and β-globin detection. The amount(copies/cell)of HBV cccDNA and tDNA were measured by a real-time PCR, using β-globin housekeeping gene as a quantitation standard. Results The standard curves of real-time PCR with a linear range of 3.44 × 100 to 3.44 × 109 copies/μl were established for detecting HBV cccDNA and tDNA, and both of the lowest detection limits of HBV cccDNA and tDNA were 3.44 × 100 copies/μl. The lowest quantitation levels of HBV cccDNA in liver tissues tested in 33 HBV related HCC patients and 13 CHB patients were 0.003 copies/cell and 0.031copies/cell, respectively. HBV cccDNA and tDNA in liver tissue of 10 non-HBV patient appeared to be negative. The true positive rate was increasing through the digestion of HBV DNA by PSAD, and the analytic specificity of cccDNA detection improved by 7.24 × 102 times. Liver tissues of 2 patients were retested 5 times in the PCR for detecting cccDNA and the coefficience of variations on cycle threshold (Ct)were between 0.224%-0.609%. Conclusion A highly sensitive and specific quantitative real time PCR method for the detection of HBV cccDNA in liver tissue was established and could be used for clinical and epidemiological studies.     

肝硬化患者肝移植前后心电图改变的分析

目的研究肝硬化患者肝移植术前及术后心电图改变,从而探讨肝移植对心电生理的影响。方法选取2007～2010年住院行肝移植术的患者37例,对其心电图结果进行分析;另设健康体检者60例为对照组。结果肝移植患者术前组与对照组心电图异常率比较,差异有统计学意义(P<0.01);肝移植术后围手术期组与术后其他组比较,差异有统计学意义(P<0.01);术前组与术后≤6个月组比较差异有统计学意义(P<0.05);术前组与术后>6个月组比较差异有统计学意义(P<0.01);肝功能A级、B级、C级术后组QTc间期分别与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论肝硬化患者心电图异常率明显升高,主要表现为QTc间期延长,且随肝损害严重程度加重而延长;肝移植术后,心电图异常率下降,QTc间期较术前缩短,心电生理得到改善;围手术期心电图异常率增高,临床医师应密切注意肝移植患者围手术期心电图的变化,及时治疗心脏并发症。