影响脑胶质瘤术后生存时间的因素分析（附56 例随访报告）*

目的:了解脑胶质瘤生长部位、手术方式、病理分级和术后治疗对患者术后生存时间的影响。方法:对第三军医大学西南医院2000年7 月～2007年5 月间经手术治疗的脑胶质细胞瘤患者中56例进行随访，分析肿瘤生长部位、手术切除程度、病理分级和术后治疗与患者术后生存时间的关系。结果:本组病例肿瘤位于大脑半球者48例，术后1 年生存率和3 年生存率分别为43.8% 和12.5% ，位于小脑半球者6 例，术后1 年生存率和3 年生存率分别为100% 和66.7% ，差异显著。肿瘤达肉眼全切的患者1 年和5 年生存率最高，分别为61.1% 和38.9% ，大部分切除者次之，分别为59.1% 和13.6% ，而部分切除或活检或活检者最短，分别为18.8% 和0。Ⅰ～Ⅱ星形胶质细胞瘤术后1 年和5 年生存率分别为68.8% 和28.1% ，而Ⅲ～Ⅳ级者分别为13.6% 和0。单纯手术、手术+ 放疗、手术+ 化疗、手术+ 放疗+ 化疗治疗的患者1 年生存率分别为16.7% 、63.6% 、71.4% 、78.6% ，5 年生存率分别为0、27.3% 、14.3% 、42.9% 。提示高级别胶质瘤患者的生存期短；小脑胶质细胞瘤患者术后生存时间明显高于大脑半球和丘脑区肿瘤；而手术切除肿瘤的彻底性仍是影响胶质瘤患者术后生存期最重要的因素，手术显微镜下肿瘤全切除和大部切除的术后生存时间明显优于部分切除或活检；术后放、化疗等综合治疗能显著延长患者的生存期。结论:手术方式、病理分级及术后治疗均能影响脑胶质细胞瘤患者术后生存时间，其中手术显微镜下全切和有效的术后治疗起决定作用。      

反义GFAP对人恶性胶质瘤细胞系CHG-5增殖及分化的影响

目的观察抑制内源性胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein, GFAP)基因表达对恶性胶质瘤细胞生物学特性的影响,为进一步深入研究GFAP基因在胶质瘤恶性转化及诱导分化治疗中的作用提供实验基础.方法构建反义GFAP 逆转录病毒表达载体,经包装后以病毒上清感染人恶性胶质瘤细胞系CHG-5;采用RT-PCR、原位杂交以及免疫细胞化学方法检测GFAP基因及其蛋白的表达;并通过形态学、细胞生长曲线、软琼脂克隆形成及流式细胞分析等观察抑制GFAP基因表达后CHG-5细胞形态、增殖和细胞周期进程的变化.结果反义逆病毒感染后CHG-5细胞GFAP mRNA及其蛋白表达显著减弱甚至缺失,瘤细胞异型性增加,细胞增殖速度加快,体外成瘤能力增强,S期、G2/M期细胞比例升高.结论抑制内源性GFAP基因表达可使CHG-5细胞呈现更为恶性的表型,提示GFAP基因在调控胶质瘤细胞分化程度及恶性生物学行为方面具有重要作用.     

Ⅰ、Ⅲ型前胶原、透明质酸及层粘蛋白在颅脑创伤后脑积水中的意义

目的 探讨Ⅰ型前胶原（PICP）、Ⅲ型前胶原（PⅢNP）、透明质酸（HA）及层粘蛋白（LN）在颅脑创伤后慢性脑积水发生机制中的意义。方法放射免疫法分别测定32例颅脑创伤后慢性脑积水患者及29例非脑积水患者（对照组）脑脊液（CSF）中的PICP、PⅢNP、HA、LN水平。结果创伤后慢性脑积水脑脊液中PICP、PⅢNP、HA、LN含量均显著高于对照组（P＜0．01）。结论脑脊液中PICP、PⅢNP、HA、LN的增高及蛛网膜纤维化在颅脑创伤后慢性脑积水形成中发挥重要作用。     

不同条件下光动力治疗对C6胶质瘤细胞的作用

目的 分析不同条件下应用血卟啉衍生物(HpD)的光动力学疗法(PDT)对体外培养大鼠C6胶质瘤细胞的作用.方法 MIT法检测PDT后C6细胞的生存率:(1)不同HpD浓度组(0、2、5、10、20、30及40 mg/L)C6细胞PDT(628 nm、20 mW/cm2、照光5 min)后的生存率;(2)C6细胞分别与不同浓度HpD(0、5、10、20、30及40 mg/L)孵育不同时间(0.5、1、3、6、12及24 h)行PDT(628nm,20 mW/cm2)后的生存率;(3)不同照光强度下(10、20及30 mW/cm2)PDT后C6细胞的生存率.结果 不同条件下PDT治疗对C6细胞的作用不同:(1)当HpD浓度低(2mg/L)、HpD与细胞孵育时间短(<3 h)时不能对细胞产生抑制或杀伤效应;(2)PDT后C6细胞的生存率随着HpD浓度的升高而降低,随着细胞与HpD孵育时间的延长而降低(>12 h后各组间差异无统计学意义),随着照光强度的增强而下降(20与30 mW/cm2之间差异无统计学意义).结论 HpD介导的PDT对体外培养大鼠C6胶质瘤细胞的作用与HpD浓度、HpD与细胞孵育时间及照光强度等有关,在不同条件下可表现为促进肿瘤细胞生长或杀伤肿瘤细胞的作用.     

脑出血后慢性脑积水脑脊液中PⅠCP、PⅢNP、HA、LN的水平及意义

目的 探讨组织纤维化标志物Ⅰ型前胶原（PⅠCP）、Ⅲ型前胶原（PⅢNP）、透明质酸（HA）及层黏蛋白（LN）在脑出血后慢性脑积水病人脑脊液（CSF）中的水平及意义。方法 放射免疫法测定36例脑出血后慢性脑积水病人及29例对照者CSF中PⅠCP、PⅢNP、HA、LN的含量。结果 脑出血后慢性脑积水CSF中PⅠCP、PⅢNP、HA、LN含量均显著高于对照组（P〈0．01）。结论 CSF中PⅠCP、PⅢNP、HA、LN的含量升高可能在脑出血后慢性脑积水形成中具有重要意义。     

光动力学疗法治疗兔脑种植VX2肿瘤的实验研究

目的探讨应用光敏药物血卟啉衍生物及光照射方法(光动力学疗法)治疗兔脑种植VX2肿瘤的效果及安全性。方法健康成年新西兰大白兔75只,完全随机化分为正常对照组、假手术组、荷瘤组和光动力学治疗组,分别观察各实验组动物生存期、肿瘤体积、颅内压、脑组织含水量及组织病理学改变。结果种植VX2肿瘤后,荷瘤组动物中位生存期为24.50d,光动力学治疗组为47.50d,两组生存率比较差异有统计学意义(χ2=12.158,P=0.000)。经光照射后,光动力学治疗组动物肿瘤体积停止增大,且明显小于同一时限荷瘤组(均P=0.000);光学显微镜下观察可见肿瘤细胞坏死、血管破坏。光照射治疗后,各实验组动物颅内压和脑组织含水量呈短暂性升高,持续1～5d逐渐降至正常值范围。结论单次光照射治疗可明显延长荷瘤动物的生存期,其作用机制可能是通过直接杀伤肿瘤细胞和破坏肿瘤血管而发挥抑瘤作用。治疗过程中引起的短暂性脑水肿和颅内压升高仍处于较为安全的范围。     

甲基-β-环糊精干扰脂质微区影响脑胶质瘤细胞系C6侵袭和迁移的体外研究

目的观察甲基-β-环糊精(MβCD)破坏脂质微区结构对经体外培养的大鼠脑胶质瘤细胞系C6细胞侵袭和迁移能力的影响。方法采用MβCD(5mmol/L)破坏经体外培养的大鼠脑胶质瘤细胞系C6细胞膜脂质微区,通过Transwell细胞侵袭和迁移实验检测细胞侵袭性和迁移能力;Western blotting检测细胞膜脂质微区结构蛋白Caveolin-1和膜受体表皮生长因子受体表达水平的变化。结果干扰组大鼠脑胶质瘤细胞系C6细胞Caveolin-1和表皮生长因子受体表达水平明显低于对照组(P=0.000,0.001)。对照组大鼠脑胶质瘤细胞系C6细胞穿过聚碳酸酯微膜数目为(54.00±9.59)个/视野,干扰组为(23.94±5.56)个/视野,两组比较差异有统计学意义(P=0.000)。对照组大鼠脑胶质瘤细胞系C6细胞迁移至空白端的细胞数目为(134.00±9.68)个/视野,干扰组为(88.00±6.22)个/视野,两组比较差异有统计学意义(P=0.000)。结论甲基-β-环糊精破坏脂质微区结构后可降低经体外培养的大鼠脑胶质瘤细胞系C6细胞的侵袭性和迁移能力,其机制可能与降低Caveolin-1和表皮生长因子受体等多种膜蛋白和受体表达水平有关。     

Study on biocompatibility of PDLLA／HA／DBM with co-cultured human osteoblasts in vitro

Objective: To evaluate the osteocompatibility of D, L-polylactic/hydroxyapatite/decalcifying bone matrix (PDIZA/HA/DBM), and compare with PDLLA and DBM. Methods: Human primary osteoblasts isolated from the femoral head of patients were inoculated onto PDLLA/HA/DBM, PLA and DBM respectively. The proliferation rate and collagen I expression were detected. The interface between biomaterial and osteoblasts was investigated with phase contrast microscopy and electron scanning microscopy. Results: Best proliferation rate was observed with the PDLLA/HA/DBM and followed by DBM and PLA, suggesting that PDLLA/HA/DBM satisfying most requirements for the cultivation of human osteoblasts. Scanning electron microscopy showed the morphology of osteoblasts was correlated with the proliferation data. The cells, well spread and flattened, were attached closely on the surface of biomaterial with an arched structure and had normal morphology. The extracellular collagenous matrixs covered the surface of bio-material and packed the granules of biomaterial. Conclusion: PDLLA/HA/DBM can form osteointerface early and have a good biocompability.     

应用国产光敏剂光动力学辅助治疗恶性脑肿瘤5例报告

目的分析应用国产血卟啉衍生物（HPD）的光动力辅助治疗（PDT）恶性脑肿瘤的疗效及安全性。方法4例恶性胶质瘤和1例转移性鳞癌病人于显微手术切除术后应用国产HPD进行PDT治疗,HPD剂量为5.0mg/kg,光波长为628nm,总能量为240J/cm^2。通过颅内压监测、并发症观察及影像学随诊观察治疗的效果和安全性。结果5例病人治疗后3d内颅内压有轻微升高,用脱水药物可得到控制,PDT对瘤床1.0cm深的肿瘤有治疗作用,可使肿瘤复发时间延迟2~3个月,未出现过敏反应、肝肾功能损害等并发症。结论应用国产HPD单次PDT治疗恶性脑肿瘤有一定的治疗作用,脑水肿及颅内压可以控制,安全性好。     

光动力学疗法对体外培养大鼠C6胶质瘤细胞的效应研究

目的探讨血卟啉衍生物介导的光动力学疗法对体外培养大鼠C6胶质瘤细胞的杀伤效应。方法①应用MTT法测定不同HpD浓度组(0,2,5,10,20,30及40mg/L)C6细胞PDT(628nm,20mW/cm2,照光5min)后的生存率;②采用光镜及电镜观察PDT后C6细胞的形态学变化;③DNA琼脂糖凝胶电泳检测各组样本的DNA条带;④TUNEL法检测各组样本PDT治疗后的细胞凋亡阳性率。结果①HpD浓度分别为2、5、10、20、30、40mg/L各组样本的细胞生存率分别为:110.31±6.25%、74.63%±6.57%、41.74%±4.16%、36.43%±2.14%、31.94%±2.25%及30.25%±2.88%;②PDT后C6细胞(HpD浓度>5mg/L时)出现细胞回缩等改变;透射电镜观察发现10mg/LHpD组C6细胞出现染色质边集、凋亡小体形成等改变;20mg/LHpD组C6细胞出现胞膜破裂崩解、细胞核肿胀等表现;③DNA琼脂糖凝胶电泳检测发现10mg/L及5mg/LHpD浓度组产生了明显的梯状条带;④TUNEL测定5mg/L及10mg/LHpD浓度组C6细胞凋亡阳性率分别为33%和63%;20mg/LHpD浓度组细胞凋亡阳性率为6%。结论当HpD浓度为2mg/L时PDT对C6胶质瘤细胞无杀伤效应;当HpD≥5mg/L时PDT治疗能够引起C6胶质瘤细胞出现细胞凋亡及坏死,较低浓度(5-10mg/L)时C6细胞以凋亡为主,较高浓度HpD(≥20mg/L)时C6细胞主要以坏死为主。