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1.
目的探讨分枝菌酸(MA)包被聚苯乙烯微球诱导小鼠RAW264.7巨噬细胞泡沫细胞化的条件及特性。方法将RAW264.7细胞分为空白对照组和分别包被(0、25、50、75、100)μg/mL MA的聚苯乙烯微球实验组,分别将细胞与聚苯乙烯微球混匀、共同孵育24、48、72 h、5 d和8 d后,油红O染色后显微镜下观察细胞形态,采用总胆固醇试剂盒和游离胆固醇试剂盒测定各组泡沫细胞内胆固醇酯的含量,采用MTT法检测细胞增殖水平。结果当包被MA浓度为75μg/mL、吞噬时间为24 h时,RAW264.7能形成典型的泡沫细胞,其细胞内胆固醇酯相对含量为60.98%±1.32%;随着吞噬时间延长,形成泡沫细胞所需的MA的浓度逐渐递减;且随着细胞泡沫化程度增加,细胞增殖活力逐渐减弱。结论 MA包被聚苯乙烯微球可快速诱导巨噬细胞形成泡沫细胞,MA浓度与细胞泡沫化程度呈正相关,且有时间依赖性。  相似文献   
2.
目的 应用SYBR实时荧光定量RT-PCR法检测MCPH1/BRIT1 mRNA的表达.方法 提取人宫颈癌总RNA,经逆转录PCR获得靶基因(MCPH1)及管家基因(GAPDH)的CDNA,采用SYBR Green 荧光实时定量法检测,以GAPDH基因作为内参,计算各组MCPH1 mRNA的相对表达量.结果 在31...  相似文献   
3.
[目的]干扰Bmi-1对siRNA转染宫颈癌细胞系Hela中TGF-β、Hey1、Hes1、Bmp7、Smad3、Casp3和Casp6基因的表达影响,为寻找宫颈癌中Bmi-1的靶基因奠定基础.[方法]将Bmi-1 siRNA转染Hela细胞,实时荧光定量RT-PCR方法检测转染前后Hela细胞中TGF-β、Hey1、Hes1、Bmp7、Smad3、Casp3和Casp6基因的表达变化,对有明显变化的基因用Western Blot在蛋白水平进一步验证.[结果] Hela细胞中Bmi-1基因RNA干扰后,TGF-β表达上调,Smad3、Casp3和Casp6基因表达下调.[结论]沉默Bmi-1的表达可使宫颈癌细胞系Hela中TGF-β、Smad3、Casp3和Casp6的表达量均有不同程度的改变,Bmi-1基因在宫颈癌发生发展中可能与TGF-β/Smads信号通路有关.  相似文献   
4.
人MDC1基因shRNA反转录病毒载体的构建及鉴定   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的 建立反转录病毒介导的MDC1基因RNA干扰表达体系并观察其在官颈癌细胞(HeLa)中对MDC1表达的影响.方法 将人MDC1基因的RNA干扰双链DNA片段重组到反转录病毒质粒pSilencer5.1-H1 Retro中,构建携带人MDC1基因的RNA干扰反转录病毒载体psiRNA-MDC1.经PT67细胞包装后,产生的莺组反转录病毒感染宫颈癌细胞株HeLa细胞,并用嘌呤霉素筛选稳定的细胞克隆.采用RT-PCR和Western blotting检测细胞中MDC1 mRNA和蛋白表达的变化.结果 重组psiRNA-MDC1质粒经测序鉴定正确;重组反转录病毒感染HeLa细胞后用嘌呤霉素筛选出稳定的细胞克隆;RT-PCR和Western blotting检测人MDC1 mRNA和蛋白表达水平明显低于阴性对照组和未十扰组.结论 携带人MDC1基因RNA干扰双链DNA片段的反转录病毒感染HeLa细胞后能明显抑制MDC1 mRNA和蛋白表达,为进一步研究MDC1在宫颈癌中的作用奠定了基础.  相似文献   
5.
本研究用微波(2450 MHz)照射兔阴囊及睾丸,使阴囊皮肤温度升至41~42℃,维持20分钟。用电镜观察照射后30分钟至4个月之间不同时间阶段对精子形成的影响。30~60分钟,高尔基期、头帽期、顶体期及成熟期的精子细胞已出现形态学的改变。30~60天后退变的成熟期精子细胞增多。3~4个月后精子细胞一般恢复正常。各期精子细胞对微波都很敏感。损伤改变主要见于顶体、顶体下间隙、核、尾部线粒体鞘、纤维鞘、外致密纤维及顶体后致密膜。早期精子细胞的平滑型内质网和核膜间隙扩大及空泡化也经常见到。本文所见微波致精子细胞的超微结构改变,在许多方面与超声及实验性隐睾所致的改变相似。  相似文献   
6.
毛细胞白血病是少见的特殊类型白血病。由于对此病性质及毛细胞来源存在许多争论,近年来已引起对此病研究的重视。自Bouroncle 等(1958)首先用透射电镜观察该病血液及骨髓后,电镜观察已成为诊断及  相似文献   
7.
防治烧伤及其它创伤后所致的皮肤瘢痕,在临床医学上具有重要的意义。秋水仙硷是一种能破坏细胞微管的生物硷,对于产生胶原纤维的细胞的作用系通过抑止前胶原蛋白的分泌过程,从而抑止胶原蛋白的合  相似文献   
8.
生物化学实验教学改革的几点思考   总被引:3,自引:0,他引:3  
生物化学实验课是生化教学的重要组成部份,有其自身的发生、发展和教学规律。为了提高生化实验教学的效果,改革生物化学教学方式和内容,增设综合性、设计性、开放性实验,培养高素质的医学创新人才。  相似文献   
9.
目的 探讨RNAI沉默Grp94基因表达对人食管癌ECA109细胞迁移及侵袭能力的影响和可能机制.方法 设计、合成靶向Grp94基因的siRNA基因片段,应用脂质体包埋转染食管癌ECA109细胞,采用Real-time PCR和Western blot法分别检测转染后的细胞内Grp94、基质金属蛋白酶MMP2及MMP9的表达,采用Transwell实验检测沉默Grp94基因对细胞迁移及侵袭能力的影响.结果 SiGrp94组中Grp94mRNA和蛋白水平显著下调(P<0.01),MMP2、MMP9表达明显下调(P<0.05);SiGrp94组细胞迁移及侵袭能力明显降低,差异有统计学意义(P<0.05).结论 沉默Grp94基因可明显抑制ECA109细胞的迁移及侵袭能力,Grp94可能通过影响MMP2、MMP9参与其中.  相似文献   
10.
目的 构建hsa-mir-520真核表达载体,并转染大肠癌细胞SW-480细胞,检测细胞中E-钙粘蛋白表达情况.方法 依据miRBase数据库中hsa-mir-520序列,设计并合成寡核苷酸片段,构建hsa-mir-520表达载体和对照载体.采用脂质体转染方法分别将mir-520表达载体、及对照质粒转染大肠癌细胞SW-480细胞株.采用酶切、测序检测载体构建;Western blot检测E-钙粘蛋白的表达.结果 酶切和测序表明hsa-mir-520真核表达载体构建成功.Western blot结果显示与转染对照质粒和未转染的细胞相比,转染了hsa-mir-520重组质粒的细胞中E-cadherin蛋白的表达明显增加(P<0.01),密度扫描半定量分析显示E-cadherin蛋白的表达增加了大约40%.结论 成功构建了hsa-mir-520和对照的真核表达载体,hsa-mir-520质粒转染大肠癌细胞SW-480后可增加E-钙粘蛋白的表达.  相似文献   
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