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2016年 | 1篇 |
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1998年 | 5篇 |
1997年 | 3篇 |
1996年 | 2篇 |
1995年 | 1篇 |
1991年 | 1篇 |
1989年 | 1篇 |
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2.
3.
目的:设计针对A组β溶血性链球菌M1和M12蛋白的复合多肽;构建含M蛋白基因(emm基因)1型和12型特异性抗原决定簇基因及其保守区J14肽基因的GST标签的重组表达载体;并诱导和优化GST融合蛋白的表达.方法:在NCBI Genebank和Olig0 6引物设计软件中选择分别编码M蛋白emm基因1型和12型信号肽后35个氨基酸及其相同的保守区14肽基因序列(全长270 bp),通过重叠PCR(Overlap PCR)合成所需的核苷酸序列,经测序确定序列完全和设计的相匹配后,将该重组片段克隆到pGEX-4T-1表达载体中,阳性克隆经双酶切和测序鉴定正确后建立稳定表达该重组质粒的大肠杆菌BL21株系(pE/B);通过聚丙烯酰胺凝胶的考马斯亮蓝染色和Western blot来检测在不同时间(O、2、6、8、18和24小时)和温度(25℃、30℃和37℃)以及不同浓度(0.01、0.1、1 mmol/L)异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导GST融合蛋白(GST/emm)表达情况,并对诱导表达的GST/emm切胶进行质谱分析鉴定.结果:成功构建含有emml和emm12抗原决定簇及M蛋白保守区J14肽基因的原核表达载体;并诱导其稳定表达,在1 mol/L IPTG诱导6~8小时达高峰,不同温度下均有过量表达;质谱检测诱导蛋白GST/emm条带结果正确.结论:成功构建A组p溶血性链球菌的emm1型和emm12型原核表达载体,并稳定诱导GST/emm表达,为下一步研究GST/emm的纯化、酶切以及免疫原性的鉴定和疫苗研制打下夯实的基础. 相似文献
4.
目的探讨着色性干皮病基因B(xeroderma pigmentosumB,XPB)对白介素-6(IL-6)介导人血管平滑肌细胞(VSMC)增殖及凋亡的影响。方法用脂质体转染法将重组质粒pcDNA3.1-XPB和空载质粒pcDNA3.1稳定转染VSMC,然后给予100 U/mL的IL-6孵育48 h。实验分为6组:空白对照组;pcDNA3.1组;pcDNA3.1-XPB组;IL-6组;IL-6+pcDNA3.1组;IL-6+pcDNA3.1-XPB组。用RT-PCR和Western blot法检测XPB、Bcl-2、Bax和野生型p53(wtp53)表达量的变化;用MTT法观察细胞增殖活力;用流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率。结果 RT-PCR和Westernblot检测发现,重组质粒pcDNA3.1-XPB的转染使得细胞XPB表达增高(P<0.05或P<0.01),同时使得Bcl-2表达降低、Bax和wt-p53表达增高(P<0.05或P<0.01),并能抑制IL-6促进VSMC的Bcl-2表达增高、Bax和wt-p53表达降低的作用(P<0.05或P<0.01);MTT结果显示,XPB高表达抑制了细胞增殖活力(P<0.05),并能抑制IL-6促进VSMC增殖的作用(P<0.05);流式细胞仪结果显示,XPB高表达引起了细胞G0/G1期增加(P<0.05)、S期减少(P<0.05)、凋亡率增加(P<0.01),并能抑制IL-6促进VSMCG0/G1期减少、S期增加、凋亡率降低的作用(P均<0.01)。结论 XPB基因能抑制VSMC增殖并促进其凋亡,并能抑制IL-6促进VSMC增殖和降低其凋亡的作用,有望成为治疗动脉粥样硬化的靶点。 相似文献
5.
【目的】 了解近期广州市儿童致咽炎β溶血性链球菌(BHS)的流行情况及其emm基因分型。【方法】 对我院儿科门急诊1 190例急性咽扁桃体炎的患儿进行咽拭子培养。鉴定为BHS者包括A、B、C和G组溶血性链球菌(group A、B、C、G streptococcal,GAS、GBS、GCS和GGS)进行细菌组DNA的提取;通过PCR扩增emm基因并测序;其结果与NCBI和CDC Home中已知的基因序列进行同源性比对大于95%则认为是同型菌株,藉此确定其分型。【结果】 在1 190例符合条件的患儿咽拭子标本中[男:678例,(6.96±2.73)岁;女:512例,(6.70±2.60)岁],鉴定为BHS的共有46例(3.87%)。其中GAS、GBS、GCS和GGS分别有4例、20例、2例和20例,分别占BHS 约8.7%、43.5%、4.3%和43.5%;而GAS、GBS、GCS和GGS的阳性率分别约为0.37%、1.68%、0.17%和1.68%。男患儿BHS的阳性率约为5.01%,女患儿约为2.34 %,两组比较(χ2 = 26.431,P < 0.001)有统计学意义。除了GBS外,其他BHS(GAS、GC/GS)均有emm基因表达(1 000 ~ 1 500 bp)。经测序共有15型emm,其中4株GAS分别表达emm 1和emm 12(7.69%)。【结论】 致咽炎GAS阳性率低于0.5%,而GBS、GGS阳性率接近2%。但GBS无emm表达,GAS表达emm 1和emm 12,而GCS、GGS无明确的emm优势型。 相似文献
6.
淀粉样变病(amyloidosis)是指以细胞外异常折叠(β折叠)蛋白为主的淀粉样物质在器官组织细胞外沉积所引起的一组疾病。淀粉样变病症状表现多种多样,常被误诊[1]。本文结合免疫球蛋白轻链(immunoglobulin light-chain)心脏淀粉样变病临床病例并文献复习,分析其临床特征,以提高对该病的认识。 相似文献
7.
目的:用气相色谱法测定"冬病夏治"贴膏中的冰片含量。方法:以水杨酸甲酯为内标物,采用内标物预先加入法,弹性石英毛细管柱Agilent HP-5(30m×0.32mm,0.25μm),FID检测器,氮气为载气,柱温为100℃。结果:在该色谱条件下,冰片中异龙脑和龙脑及内标物水杨酸甲酯均得到良好的分离,冰片进样量在0.2785~5.5700mg/mL范围内与峰面积线性关系良好(r=0.9999),冰片的回收率为99.86%(RSD=2.01%)。结论:该法灵敏、准确,重复性好,可用于控制该制剂的质量。 相似文献
8.
9.
广州市省公医系统部分干部血脂改变近况 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 了解广州市省公医系统 40岁以上部分干部近三年血脂水平的改变。方法 1995~ 1998年 2次对2 6 10例和 2 970例干部采用常规酶法检查血清总胆固醇(TC)、甘油三酯 (TG)、高密度脂蛋白 -胆固醇 (HDL -C)水平。结果 1998年组TC水平 [(5 5 1± 1 0 0 )mmol/L]与 1995年组 [(5 5 3± 1 0 6 )mmol/L]无明显差异 ;1998年组TG水平[(1 5 9± 1 0 4)mmol/L]明显高于 1995年组 [(1 2 7± 0 84)mmol/L];1998年组HDL -C水平 [(1 0 1± 0 33)mmol/L]明显低于 1995年组 [(1 35± 0 37)mmol/L]。 1995年组和 1998年组女性TC水平明显高于男性 ;1998年组男性TG水平明显高于女性。结论 近三年来TG明显升高 ,HDL -C明显降低 ,应继续加强对血脂的调控。 相似文献
10.