抗 CTLA-4抗体联合阿霉素治疗小鼠乳腺癌的疗效及机制分析?

目的：探讨抗细胞毒性 T 淋巴细胞相关抗原(CTLA-4)抗体联合阿霉素治疗小鼠乳腺癌的疗效及机制。方法以小鼠乳腺癌细胞系4T-1接种 Balb/c 小鼠建立模型,随机分为空白组、溶剂组、单用抗 CTLA-4抗体组、单用阿霉素组、联合用药组。观察各组小鼠肿瘤生长,脾和骨髓的细胞亚型,对肿瘤微环境中凋亡细胞和微血管密度(MVD)进行检测。结果单用抗CTLA-4抗体组、单用阿霉素组、联合用药组小鼠肿瘤体积均显著低于空白组、溶剂组(P <0.05),且联合用药组小鼠肿瘤体积和质量显著低于单用抗 CTLA-4抗体组、单用阿霉素组小鼠肿瘤体积(P <0.05)。与空白组、溶剂组相比,单用抗 CTLA-4抗体组、单用阿霉素组和联合用药组的荷瘤小鼠脾中 CD8+ T 和 CD4+ T 细胞占淋巴细胞的百分比显著增高(P <0.05)。联合用药组肿瘤细胞凋亡的阳性百分率显著高于其他组(P <0.05)。联合用药组 MVD 显著低于其他组,且单用抗 CTLA-4抗体组和单用阿霉素组 MVD 显著低于空白组和溶剂组(P <0.05)。结论联合抗 CTLA-4抗体和阿霉素可在一定程度提高小鼠机体免疫力,明显抑制乳腺癌小鼠肿瘤生长,促进肿瘤微环境中肿瘤细胞凋亡,减少肿瘤微环境中微血管生成,效果优于单一用药。     

DJ-1 shRNA靶向逆转人乳腺癌阿霉素耐药细胞株MCF-7/ADM的耐药性

目的探讨干扰癌基因DJ-1表达对人乳腺癌耐药细胞株MCF-7/ADM多药耐药性(multi-drug resistence,MDR)的影响。方法将构建的DJ-1 shRNA真核表达载体,用脂质体转染至人乳腺癌耐药细胞株MCF-7/ADM;用RT-PCR和Western blot法分别检测细胞MDR 1 mRNA和P-糖蛋白(P-glycopro-tein,P-gp)的表达;MTT法检测细胞对化疗药物的敏感性。结果 DJ-1 shRNA靶向干预MCF-7/ADM细胞DJ-1表达后,DJ-1 shRNA组细胞MDR 1 mRNA和P-gp表达水平较空白与阴性对照组明显下降(P0.0 1);细胞内Adriamycin浓度明显增加;细胞对Adriamycin的敏感性增强2.6 8倍。结论 DJ-1shRNA可降低乳腺癌MCF-7/ADM细胞的MDR,为研究逆转乳腺癌化疗耐药提供了新方法。     

肝细胞癌中Smad7和TGFβRⅠ的表达及与其临床病理的关系

目的　研究Smad7、TGFβRⅠ蛋白在肝细胞癌 (hepatocellularcarcinoma ,HCC)中的表达及与其临床病理的关系 ,探讨Smad7在HCC发生、发展中的作用。方法　应用SP免疫组化染色法 ,检测 62例HCC中Smad7、TGFβRⅠ蛋白表达情况 ,并分析它们与HCC临床病理的关系。 结果　 62例HCC组织中Smad7、TGFβRⅠ蛋白的阳性表达率分别为 85 .48%、2 9.0 3 % ,Smad7表达明显高于正常肝组织 ,而TGFβRⅠ表达明显低于正常肝组织 (P <0 .0 5 ) ,两者在HCC中表达呈负性相关。且Smad7蛋白表达与肿瘤的临床分期及有无瘤栓、包膜完整性、复发时间长短、血AFP、肿瘤结节数及有无转移有相关性。结论　Smad7与HCC发生、发展密切相关。     

Glut1和HIF-1α在原发性肝细胞癌中的表达和意义

目的探讨葡萄糖转运蛋白1（Glut1）和缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）在原发性肝细胞癌中的表达,以及在肝细胞癌发生发展过程中相互关系。方法应用免疫组织化学方法（SP法）,检测108例肝细胞癌及其癌旁组织、15例正常肝组织中Glutl,HIF-1α的表达。结果Glutl和HIF-1α在108例肝细胞癌组织中的阳性表达率分别为74.1%和78.7%,明显高于其在癌旁组织（χ^2=15.27,χ^2=8.727）和正常肝组织（χ^2=31.78,χ^2=27.19）中的表达率（P〈0.05）。Glutl的表达强度与HCC的分化程度（χ^2=27.80）,Edmondson分级（χ^2=6.260）,有无转移（χ^2=11.54）等显著相关（P〈0.05）。HIF-1α在原发性肝癌中的表达强度与HCC分化程度（χ^2=13.05）和肿瘤大小（χ^2=11.74）相关（P〈0.05）。统计学分析显示Glutl和HIF-1α在HCC中的表达呈正相关（χ^2=18.81）。结论Glutl和HIF-1α的异常高表达在原发性肝细胞癌的发生发展中起重要作用,可能促进肝细胞癌的增殖和侵袭转移。Glutl和HIF-1α的表达强度对肝癌的诊断具有临床应用价值。     

复合性骨盆伤的早期失血及救治相关因素

目的 研究复合性骨盆伤的早期失血及损伤特点，及其与救治关系、对预后结局的影响，探讨其分类救治的方法。方法 对233例具有严重骨盆伤伴有血液动力学不稳定患者按暴力方式、骨盆骨折类型及合并伤情分组，采用生理状态、解剖损伤及输血容量等方面的量化指标进行伤情评定分级，并计算生存概率(Ps)，以此进行比较和统计学分析。结果 骨盆骨折多伴有合并损伤，常为高能量交通伤所致；其出血源、出血量及血流动力学改变为非对称相关；其中不稳定型骨盆骨折合并脏器破裂出血者伤后血压改变和早期输血量均较为显著，骨盆AIS和ISS分值较高，生存概率(Ps)较低。结论 高能量所致骨盆伤多为高危性创伤，易合并多发伤，常有多源性出血，加强整体伤势和出血来源的认识，区别不同伤情，有利于对其进行分类救治。     

血清胰岛素样生长因子-Ⅰ水平对癌性恶病质的影响

目的 通过癌性恶病质动物模型探讨血清中胰岛素样生长因子-Ⅰ（IGF-Ⅰ）水平在癌性恶病质中的作用。方法 将小鼠结肠腺癌26细胞悬液接种于肝脏特异性IGF-Ⅰ基因缺失（LID）组鼠和对照组鼠皮下，各30只接受了肿瘤细胞接种。接种后监测两组小鼠的一般情况、体重和皮下肿瘤大小以及自然生存时间。结果 LID鼠和对照鼠进入恶病质的时间分别为（14．6±1．3）d、（24．1±2．5）d；生存时间分别为（19．3±1．3）d、（31．9±2．7）d，两者差异有极显著性意义（P〈0．01）。结论血清中低水平的IGF-Ⅰ虽然可以延缓肿瘤的生长，但是却促进了癌性恶病质的发生和发展。     

肝动脉化疗栓塞对原发性肝癌组织中树突状细胞浸润和VEGF表达的影响

目的研究原发性肝癌经肝动脉化疗栓塞术(transcatheter arterial chemoembolization,TACE)后肝癌组织中树突状细胞(DCs)浸润和VEGF表达的变化及其意义。方法选取经TACE治疗后二期手术切除的原发性肝癌病人标本17例(TACE组)和未经TACE单纯手术切除的原发性肝癌病人标本30例(单纯手术组),应用免疫组织化学方法检测肝癌组织中的树突状细胞含量及VEGF表达情况。结果TACE组标本中DCs数量明显少于单纯手术组(P<0.05);而其标本中VEGF表达明显强于单纯手术组(P<0.05)。结论TACE治疗后,肝癌组织中浸润的DCs数量明显减少与VEGF的表达增强有关,并可能是TACE后肝癌易复发、转移的重要原因之一。     

原发性肝癌经肝动脉化疗栓塞术后共刺激分子4-1BB(CD137)配体的变化和意义

目的　探讨原发性肝癌经肝动脉化疗栓塞(TACE)前后肝癌细胞的共刺激分子4 -1BB(CD13 7)的配体(4- 1BBL)的变化及意义。方法　选取经TACE治疗后二期手术切除的原发性肝癌患者标本14例(TACE组)和未经TACE单纯手术切除的原发性肝癌患者标本2 1例(单纯手术组) ,应用免疫组织化学方法和RT -PCR方法检测肝癌细胞的4 -1BBL及4- 1BBLmRNA表达情况。结果　TACE组肝癌细胞中4 -1BBL和4- 1BBLmRNA的表达明显低于单纯手术组。结论　TACE后肝癌细胞中4 -1BBL的表达下调会影响机体的抗肿瘤免疫反应,并可能是TACE治疗原发性肝癌难以根治并易复发、转移的原因之一。     

肝细胞癌中Ephrin-A1及其受体的表达与血管生成的关系

目的:探讨Ephrin-A1 及其受体与肝细胞癌血管生成之间的关系。方法:采用免疫组织化学SP法和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测52例肝细胞癌（肝癌组）和癌旁组织（癌旁组）标本中Ephrin-A1及其受体EphA1和EphA2蛋白及mRNA的表达情况，并分析其与肝细胞癌的临床病理因素及微血管密度(microvessel density, MVD)之间的关系。结果:在52例肝癌组中 Ephrin-A1及其受体EphA1，EphA2的蛋白阳性表达率分别为59.6%(31/52)，53.8%(28/52)和17.3%(9/52),而癌旁组织中的蛋白阳性表达率分别为23.1%(12/52)，28.9% (15/52)以及21.2%(11/52)。Ephrin-A1及其受体EphA1在两组中的差异有统计学意义(P<0.05)，而EphA2在两组间的差异无显著性（P>0.05）。Ephrin-A1及其受体EphA1mRNA在肝癌组的阳性表达率为67.3%(35/52)和73.7%(38/52)，明显高于癌旁组中的阳性表达42.3%(22/52)和48.1% (25/52) (P<0.05)，而EphA2mRNA在两组间的差异无显著性（P>0.05）。Ephrin-A1蛋白的高表达与患者的甲胎蛋白(AFP)水平及有无门静脉癌栓有关(P<0.05)。Spearman等级相关分析显示，在肝癌组中Ephrin-A1的表达与EphA1的表达呈正相关(r=0.671,P<0.01);而Ephrin-A1与EphA2的表达无相关性;肝癌组中Ephrin-A1的表达与MVD呈正相关(r=0.826,P<0.01)。结论:Ephrin-A1通过与其受体EphA1相结合，促进肝细胞癌的血管生成，从而促进肝细胞癌的生长、浸润和转移; Ephrin-A1及其受体EphA1有望成为肝癌抗血管生成治疗新的靶点。