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3.
目的 比较超滤管法、超速离心法及病毒浓缩液法浓缩慢病毒后绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的转染效率。方法 用摇床过夜摇pMD2.G、psPAX2及GFP载体菌种并用试剂盒提取这三种质粒;将pMD2.G、psPAX2及GFP载体质粒与转染试剂按比例混合后转染293T细胞生产病毒;收集病毒上清液并用超滤管法、超速离心法及病毒浓缩液法浓缩慢病毒;将接种的293T细胞分为3组,并向每组接种有293T细胞的培养液中加入2、4、8、16 μl三种方法浓缩的病毒浓缩液,48 h后用荧光显微镜观察和流式细胞仪检测三种方法浓缩慢病毒后转染293T细胞的GFP表达情况。结果 荧光显微镜观察结果显示随着转染量的增加,GFP表达率增加,超滤管法浓缩病毒转染293T细胞后GFP的表达效率最高;流式检测显示病毒浓缩液法组2、4、8、16 μl GFP的表达率分别为(2.4±0.1)%、(3.8±0.3)%、(8.2±0.6)%、(12.2±0.3)%;超滤管法组2、4、8、16 μl GFP的表达率分别为(5.4±0.3)%、(7.4±0.4)%、(12.7±0.1)%、(17.3±0.6)%;超速离心法组2、4、8、16 μl GFP的表达率分别为(0.7±0.1)%、(1.2±0.1)%、(2.1±0.1)%、(0.4±0.2)%。超滤管法组与其他两组比较,P<0.05,差异有统计学意义。结论 不同方法浓缩慢病毒后的GFP转染效率不同,三种慢病毒浓缩方法中超滤管法浓缩慢病毒后的GFP转染效率最高。 相似文献
4.
5.
目的:观察某部军人在急性应激和非应激状态时动态心电图的变化,了解心律失常发生的情况及心率变异性等电生理指标的变化。方法:对某驻京部队在执行维和任务或进行集中军事演练的103名现役军人进行动态心电图监测,作为应激组;同时对该部队在3个月内未参加重大集中军事训练的150名现役军人监测动态心电图,作为对照组,对两组动态心电图进行分析比较。结果:①应激组的总心搏数、最高心率、最低心率及平均心率均高于对照组(P<0.05或P<0.01);②房早发生率对照组稍高,但两组无统计学差异,但平均房早数应激组明显高于对照组(P<0.01)。应激组房速的发生率高于对照组(P<0.05);③室性早搏的发生率两组无明显差异,但平均室性早搏数量应激组明显高于对照组(P<0.01);④应激组SDNN、SDANN、PNN50、HRVTI等均低于对照组(均P<0.05)。结论:急性应激是我国军人心律失常产生或/和加重的原因之一。应激状态下,心脏自主神经调节失衡可能是心律失常发生的机制之一。 相似文献
6.
免疫机制贯穿动脉粥样硬化性疾病的整个过程,固有免疫、获得性免疫均参与其中,研究了解这些机制有助于更好地防治冠心病. 相似文献
7.
目的 观察肿瘤坏死因子(TNF)-α对血栓调节蛋白(TM)在原代人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的表达和活性的影响,并初步探讨其作用机制。方法 体外培养HUVECs,实验分为3组:1对照组:加入与TNF-α等体积的PBS培养细胞6 h;2 TNF-α组:TNF-α终浓度为10 ng/ml孵育细胞6 h;3 BAY11-7082抑制组:BAY11-7082终浓度2μg/ml孵育细胞1 h阻断NF-κB通路后再用10 ng/ml的TNF-α干预细胞6 h。分别采用流式细胞技术、荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)和酶标仪检测TM蛋白、mRNA表达及活性强度。结果 TNF-α组相比与对照组和BAY11-7082抑制组在TM的蛋白、mRNA水平上均明显降低(P<0.05),TM活性也明显减弱(P<0.05)。而BAY11-7082抑制组相比与对照组在TM蛋白水平和活性均无差异,在mRNA水平上升高(P<0.05)。结论 TNF-α可明显降低TM表达,并抑制其活性,NF-κB通路参与了这一过程。 相似文献
8.
目的探讨创伤后应激障碍(PTSD)大鼠下丘脑-垂体激素分泌的变化。方法选择8周龄雄性SD大鼠40只,随机分为空白组和模型1d、4d、7d、14d组。运用放射免疫法(Radioimmunoassay,RIA)测量大鼠血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)和皮质醇(COR)的含量,以及血清中促甲状腺激素(TSH),四碘甲状腺原氨酸(T4)和三碘甲状腺原氨酸(T3)的含量。结果①各组大鼠血浆ACTH和COR含量的变化:与空白组比较,血浆ACTH含量有升高趋势,其中模型14d组最明显,具有显著差异性,P〈0.01;血浆COR含量也呈现升高趋势,其中模型14d组最明显,具有显著差异性,P〈0.05。②各组大鼠血清TSH、T4和T3含量变化:与空白组比较,模1d组T4含量明显上升,两组比较差异有统计学意义,P〈0.05。模4d组、模7d组,模14d组T4含量呈下降趋势,且模14d组Ta含量降低最明显,与空白组比较,差异有统计学意义,P〈0.01。5组大鼠的TSH、T3水平差异无统计学意义,P〉0.05。结论创伤后应激障碍早期大鼠体内存在下丘脑一垂体分泌调节功能紊乱。 相似文献
9.
目的:研究不同浓度烟焦油与尼古丁对人脐静脉内皮细胞增殖的影响。方法采用Ⅰ型胶原酶消化法从人脐静脉中分离人脐静脉内皮细胞,Ⅷ因子免疫细胞化学染色方法鉴定分离、培养的脐静脉内皮细胞(HUVECs),CCK-8法、BrdU染色法检测不同浓度焦油与尼古丁对HUVECs增殖的影响。结果1、Ⅷ因子免疫细胞化学染色法显示人脐带中分离、培养的HUVECs阳性率大于95%。2、细胞培养至6 h,50 mg/L焦油组A(450)值低于对照组A(450),具有统计学意义(P<0.05);细胞培养至24 h,50 mg/L 焦油组A(450)值低于其他各组 A(450)值,具有统计学意义(P<0.05);而不同浓度尼古丁组6 h、24 h 与对照组相比随浓度的升高,A(450)值呈现逐渐升高的趋势,但无统计学意义。3、细胞培养至6 h,不同浓度焦油组BrdU 阳性率无统计学意义;细胞培养至24 h,50 mg/L 焦油组BrdU 阳性率低于其他各组,具有统计学意义(P<0.05);不同浓度尼古丁组6 h、24 h与对照组相比BrdU阳性率无统计学意义。结论50 mg/L焦油抑制HUVECs的增殖,尼古丁具有增强HUVECs增殖的趋势。 相似文献
10.
正心血管疾病(CVD)仍然是全世界最常见的死亡原因,尽早的正确诊断对于降低CVD的死亡率具有极大的益处。心血管系统的疾病,如急性心肌梗死(AMI)、心力衰竭(HF)、高血压、心律失常和冠状动脉疾病,其发病率和死亡率在全球居于首位,是目前临床进展快、研究较活跃的领域之一[1-2]。虽然在过去的20年中,对CVD的诊断、治疗和预后方面取得了很大进步,有助于降低死亡率,然而,目前临床上仍然需要一种新的诊断生物标志物和新的治疗方案来降低 相似文献