丙型肝炎病毒包膜蛋白基因片段的克隆与表达

应用ＲＴ－ＰＣＲ和基因重组技术，从湖南地区丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染者血清中克隆了ＨＣＶ包膜蛋白基因片段（Ｅ１，Ｅ２／ＮＳ１），经与已知基因型的ＨＣＶ－１，ＨＣＶ－Ｊ，ＨＣＶ－Ｊ６和ＨＣＶ－Ｊ８进行核苷酸序列的比较分析，这些基因片段属１ｂ型ＨＣＶ基因。将克隆基因重组于表达质粒ＰＭＡＬ－ＣＲＩ中，在大肠杆菌内进行高效表达，获得了融合蛋白ＭＢＰ－Ｅ１，ＭＢＰ－Ｅ２／ＮＳ１，经ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ分析证实这些融合蛋白具有ＨＣＶ的特异抗原活性，提示这些融合蛋白可用于ＨＣＶ感染的临床诊断和发病机理的研究。     

输血后丙型肝炎患者不同功能区抗体的研究

为了了解丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）不同功能区抗体的诊断价值，利用体外表达的ＨＣＶＣ、Ｅ１、Ｅ２／ＮＳ１、ＮＳ３、ＮＳ５蛋白作为重组抗原，按ＥＬＩＳＡ方法检测了已确诊为输血后丙型肝炎患者的血清１１２份。结果，检出率最高的是抗ＨＣＶ－Ｃ（８１．３％），最低的是抗ＨＣＶ－Ｅ１（１０．７％），输血后１个月内检出率最高的也是抗ＨＣＶ－Ｃ（８０％）。表明Ｃ蛋白是进行ＨＣＶ诊断的最重要抗原。另外，动态观察１０例输血     

TGF-β1Ⅱ型受体部分基因表达质粒对实验性大鼠肝纤维化的影响

目的　观察缺陷型TGF β1 Ⅱ型受体表达质粒在大白鼠体内阻断TGF β1 的作用后对免疫性大鼠肝纤维化的影响。方法　运用基因重组技术 ,构建人的含有细胞外结合区、跨膜区和少量细胞质区的缺陷型TGF β1 Ⅱ型受体真核细胞表达质粒 ,经脂质体包埋后 ,通过腹腔注射将其导入免疫性大鼠肝纤维化模型体内 ,观察其对大鼠肝纤维化的影响。结果　早期接受缺陷型TGF β1 Ⅱ型受体表达质粒治疗的大鼠 ,其血清透明质酸 (HA)、层黏连蛋白 (LN)、Ⅲ型前胶原 (PCⅢ )、Ⅳ型胶原 (Ⅳ C)的水平均比模型组低 (P <0 .0 1) ,晚期组与模型组之间差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;在病理形态学的观察方面 ,早期、晚期运用缺陷型TGF β1 Ⅱ型受体表达质粒进行治疗 ,均可使大鼠肝纤维化程度较模型组减轻 (P <0 .0 1)。结论　在肝纤维化形成的早期应用缺陷型TGF β1 Ⅱ型受体表达质粒进行治疗可以预防肝纤维化的形成 ,而晚期应用只能阻止肝纤维化的进一步发展 ,尚不能有效逆转肝纤维化     

丙型肝炎病毒E1,E2／NS1,NS5蛋白基因在大肠杆菌内的表达及其产物的？…

目的 在体外表达及纯化ＨＣＶ不同功能区的病毒蛋白，用于研究ＨＣＶ各功能区抗体的临床意义。方法 将ＨＣＶ Ｅ１，Ｅ２／ＮＳ１，ＮＳ５区的部分基因片段克隆到表达质粒ＰＭＡＬ－ＣＲ１中ＭＢＰ编码基因的下游，在大肠杆菌中进行表达。     

品味椰油,美味与健康并存

最近,您在阅读健康杂志时,是否总少不了关注椰子油益于健康的有关资讯,一时间给人一种"满城尽读椰子油"的感觉!这到底是怎么回事?以前因为富含饱和脂肪酸而饱受争议的椰子油是如何挽回名声,成为超级食物大家庭中"名声大噪"的最新宠儿呢?     

乙型肝炎病毒全S基因疫苗与HBSAg基因疫苗诱导小鼠的特异性免疫应答比较

乙型肝炎病毒 (ＨＢＶ)感染是我国常见病及多发病 ,ＨＢＶ难以清除的原因之一就是机体的免疫功能障碍。目前虽然基因重组ＨＢＶ表面抗原 (ＨＢｓＡｇ)疫苗预防ＨＢＶ感染取得了较好的效果 ,但基因重组ＨＢｓＡｇ疫苗主要诱导特异性体液免疫 ,不能刺激机体的细胞免疫应答。近年来发现基因疫苗可诱导机体产生细胞及体液免疫反应 ,特别是诱导细胞免疫反应的能力优于蛋白、多肽类疫苗 ,更适应于慢性病毒感染的预防与治疗[1,2 ] 。为了探讨应用ＨＢＶ基因疫苗预防ＨＢＶ感染的可能性 ,我们构建了ＨＢＶ全Ｓ基因和ＨＢｓＡｇ基因疫苗 ,观察和比较…     

重症肝炎病人低T3综合征的临床意义探讨

肝脏和病变常导致甲状腺激素的代谢异常，其中低T3综合征是常见的病变之一，在肝硬化病人，低T3综合征的严重程度与肝功能损害程度相关。重症肝炎病人有严重的肝细胞坏死，也可能出现低T3综合征。但目前这方面的研究报道较少，本主要检测了重症肝炎病人的T3水平，重点探讨了低T3综合征与重症肝炎病情的关系。     

重型肝炎病人血清胰岛素的测定及临床意义

放射免疫法检测３６例重型肝炎病人的空腹血清胰岛素水平，其中２４例慢性重型肝炎病人数值为４３．１８±２７．１２ｍｕＬ－１，１２例亚急性重型肝炎病人为２８．９１±１２．７７ｍｕＬ－１，二者均明显高于正常对照组（Ｐ＜０．０１）。比较重型肝炎病人存活与死亡组，发现死亡组病人的空腹血清胰岛素水平明显高于存活组，而存活组病人危重期却又明显高于恢复期。结果提示重型肝炎病人可出现高胰岛素血症，其严重程度对判断患者病情及预后有一定的参考价值。     

丙型肝炎病毒核心区蛋白在HepG2细胞中的表达

目的 :构建能稳定表达丙型肝炎病毒核心区蛋白的哺乳动物细胞系 ,以便对丙型肝炎病毒核心区蛋白的抗原性及其他功能作进一步研究。方法 :通过PCR扩增丙型肝炎病毒核心基因 ,将其亚克隆入真核表达质粒pcDNA3.1( )中 ,用脂质体包裹后转染肝癌细胞系HepG2 ,通过G4 18筛选获得稳定转染细胞系 ,并通过间接免疫荧光法检测HepG2中丙型肝炎病毒核心区蛋白的表达。结果 :克隆的基因全长 5 94bp ,并经测序和重组质粒双酶切证实为所需目的基因 ;经间接免疫荧光验证实转染了目的基因的HepG2细胞中有丙型肝炎核心区蛋白的表达。结论 :丙型肝炎病毒核心区蛋白能在HepG2细胞中稳定表达。     

重型肝炎病人血清胰岛素的测定及临床意义

放射免疫法检测３６例重型肝炎病人的空腹血清胰岛素水平，其中２４例慢性重型肝炎病人数值为４３．１８±２７．１２ｍｕ．Ｌ＾－１，１２例亚急性重型肝炎病人为２８．９１±１２．７７ｍｕ．Ｌ＾－１二者均明业高于正常对照组（Ｐ〈０．０１），比较重型肝炎病人存活与死亡组，发现死亡组病人的空腹血清胰岛素水平明显高于存活组，而存活线病人危重期却又明显高于恢复期，结果提示重型肝炎病人可出现高胰岛素血症，其严重程度对判