活血化瘀补肾壮骨中药促进BMP基因克隆转染犬牙髓细胞增殖的实验研究

目的 观察活血化瘀补肾壮骨含药血清对骨形成蛋白2(bone morphogenetic proteins 2,BMP2)绿色荧光融合蛋白(green-fluorescent protein,GFP)真核表达质粒(pEGFP-N1-BMP2)在体外转染的犬牙髓细胞(dog dental pulp cells,DDPCs)增殖情况的影响,探讨活血化瘀补肾壮骨中药在牙本质改建形成中的作用机制.方法 将 BMP2-DDPCs分别于活血化瘀补肾壮骨含药血清组(A组)、无药血清组(B组)和胎牛血清组(C组)中培养.分别于24、48、72h用溴化-3-(4,5-二甲基噻唑基-2)-2,5二苯基四氮唑[3-(4,5-dimethythiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide,MTT]法检测BMP2-DDPCs增殖活性.结果 BMP2-DDPCs分别在A、B、C 3组中培养后,细胞的形态相同.3组细胞随着培养时间的延长,细胞数量逐渐增加,A组增加更为显著,与其他2组差异有统计学意义(P＜0.05).结论 活血化瘀补肾壮骨中药含药血清作用于BMP2-DDPCs,促进了该细胞增殖活性,血化瘀补肾壮骨中药含药血清大大增加了组织工程重要环节的种子细胞的数量.     

肿痛安丁香油糊剂治疗慢性糜烂性唇炎21例临床观察

目的:观察肿痛安丁香油糊剂对慢性糜烂性唇炎的治疗作用.方法:将慢性糜烂性唇炎患者42例,随机分为2组,每组21人.治疗组用肿痛安丁香油糊剂敷于局部;对照组用3%硼酸溶液的消毒纱布湿敷于患处.结果:治疗组的总有效率为95.24%,对照组的总有效率为76.19%,治疗组疗效明显优于对照组.结论:肿痛安丁香油调制成糊剂治疗慢性糜烂性唇炎疗效显著.     

骨形成蛋白2基因转染对犬牙髓细胞生物学特性的影响

目的构建骨形态发生蛋白2（bone morphogenetic proteins 2,BMP2）绿色荧融合蛋白pEGFP-N1-BMP2真核表达质粒,然后再用其在体外转染犬牙髓细胞（DDPCs）形成BMP2-DDPCs细胞,观察BMP2基因转染对牙髓细胞生物学特性的影响。方法构建pEGFP-N1-BMP2真核表达质粒,采用阳离子脂质体转染法将BMP2基因转染体外培养的DDPCs,检测BMP2-DDPCs碱性磷酸酶（ALP）活性,骨钙素（OC）产量和Ⅰ型胶原合成量等指标的测定,研究BMP2基因转染对牙髓细胞生物学特性的影响。结果成功构建pEGFP-N1-BMP2真核表达质粒,对构建的BMP2真核重组质粒用XhoI、HindIII进行双酶切,其产物进行琼脂糖凝胶电泳后,在1.2、4.7kb可见两条特异条带;并进行全基因序列测序,报告100%符合,证明pEGFP-N1-BMP2重组质粒构建成功。BMP2-DDPC中ALP活性,OC产量和Ⅰ型胶原合成量增加,与对照组DDPCs、N1-DDPCs相比差异有统计学意义（P〈0.05）,通过增强ALP、OC和Ⅰ型胶原等成骨标志物的表达,促进牙髓细胞向成牙本质细胞分化。结论 pEGFP-N1-BMP2真核表达质粒转染后的牙髓细胞,具有成牙本质细胞的特征。     

BMP2基因转染犬牙髓成纤维细胞与异种烧结骨复合组织工程的实验研究

目的 构建骨形成蛋白2(bone morphogenetic proteins 2,BMP2)绿色荧光融合蛋白pEGFP-N1-BMP2真核表达质粒,用其在体外转染犬牙髓细胞(dog dental pulp cells,DDPCs),利用构建的种子细胞BMP2-DDPCs与异种烧结骨(xenogeneic bone ceramice,XBC)复合,检测BMP2-DDPCs增殖活性,扫描电镜观察BMP2-DDPCs在异种烧结骨中的生长情况,评价异种烧结骨作为支架材料的可行性,为将人BMP2基因转染的牙髓成纤维细胞与异种烧结骨复合进行牙体修复的研究奠定基础.方法 构建pEGFP-N1-BMP2真核表达质粒,采用阳离子脂质体转染法将BMP2基因转染体外培养的犬牙髓细胞,将构建的种子细胞BMP2-DDPCs与异种烧结骨复合,MTT法检测BMP2-DDPCs增殖活性以及应用扫描电镜观察BMP2-DDPCs在异种烧结骨中的生长情况.结果 成功构建pEGFP-N1-BMP2真核表达质粒,并成功转染犬牙髓细胞.BMP2-DDPCs复合异种烧结骨组的细胞增殖活性与单层贴壁培养BMP2-DDPCs组的细胞增殖情况差异无统计学意义(P＞0.05).说明异种烧结骨上黏附的牙髓细胞增殖情况良好.扫描电镜观察异种烧结骨上BMP2-DDPCs黏附、生长的情况,可见支架材料的孔径为100～600μm,材料表面粗糙,利于细胞的黏附生长;孔隙中可见大量BMP2-DDPCs贴附于材料上,生长旺盛、伸展良好.结论 BMP2-DDPCs可在异种烧结骨表面及孔隙中生长、增殖,异种烧结骨可以作为牙组织工程的支架材料.     

口腔颌面部异物治疗48例临床分析

口腔颌面部异物存留比较常见，诊断不困难，术前异物的准确定位是手术成功的关键，自1990-2003年我科共收治此类病人24例，现报告如下。     

骨形态发生蛋白2基因转染犬牙髓细胞

背景：研究发现骨形态发生蛋白2具有诱导间充质细胞向成骨细胞表型分化以及诱导新骨及修复性牙本质形成的能力。目的：通过对细胞超微结构的分析,探讨骨形态发生蛋白2基因转染的犬牙髓细胞,向成牙本质细胞转化的过程。方法：将培养的性状稳定的第4代犬牙髓细胞分为3组：基因转染组转染pEGFP-N1-BMP-2基因,空白载体转染组转染EGFP-N1空白荧光载体,未转染组不转染。结果与结论：成功构建pEGFP-N1-BMP-2真核表达质粒,并成功将其转染犬牙髓细胞,pEGFP-N1-BMP-2质粒转染促进犬牙髓细胞分泌骨形态发生蛋白2。pEGFP-N1-BMP-2质粒转染有促进牙髓细胞碱性磷酸酶活性的作用。透射电镜观察结果显示：转染后的犬牙髓细胞具有成牙本质细胞的形态特点。说明pEGFP-N1-BMP-2真核表达质粒转染后的牙髓细胞,具有成牙本质细胞的特征。     

中西医结合治疗慢性脱屑性唇炎22例疗效观察

目的:研究中西医结合对慢性脱屑性唇炎的治疗作用.方法:将慢性脱屑性唇炎患者44例,随机分为两组,每组22人.治疗组在对照组治疗基础上进行辨证为脾胃湿热型、风火上乘型 、血虚化燥型3型治疗;对照组以常规治疗.结果:治疗组的总有效率为95.45﹪,对照组的总有效率为77.27﹪,治疗组疗效明显优于对照组.结论:中西医结合、局部与全身治疗相结合治疗慢性脱屑性唇炎,可调节全身状况,改善消除局部病损.     

补肾活血固齿方对小鼠颅顶前成骨细胞碱性磷酸酶活性的影响

目的观察补肾活血固齿方对小鼠颅顶前成骨细胞(MC3T3-E1)碱性磷酸酶(ALP)活性的影响,探讨其对成骨细胞分化的作用机制。方法将20只SD大鼠随机分为含药血清组和无药血清组,各10只。含药血清组大鼠予补肾活血固齿方灌胃,无药血清组予等容积0.9%氯化钠注射液灌胃,均灌胃7 d后抽取腹主动脉血制备成含药血清和无药血清。胎牛血清组为直接购买的PAA胎牛血清。分别用含10%含药血清、10%无药血清及10%胎牛血清的培养基培养MC3T3-E1细胞24、48、72 h,检测MC3T3-E1细胞中ALP的含量。结果含药血清组培养24、48、72 h后MC3T3-E1细胞ALP含量均高于胎牛血清组及无药血清组同期水平,比较差异均有统计学意义(P0.05),但胎牛血清组与无药血清组同期差异无统计学意义(P0.05);含药血清组MC3T3-E1细胞ALP含量随培养时间的延长而明显增加(P0.05)。结论补肾活血固齿方可增强MC3T3-E1细胞中ALP活性,促进MC3T3-E1细胞向成骨细胞分化,且均有一定时间依赖性。     

肿痛安丁香油糊剂治疗慢性糜烂性唇炎21例临床观察

目的：观察肿痛安丁香油糊剂对慢性糜烂性唇炎的治疗作用。方法：将慢性糜烂性唇炎患者42例,随机分为2组,每组21人。治疗组用肿痛安丁香油糊剂敷于局部;对照组用3%硼酸溶液的消毒纱布湿敷于患处。结果：治疗组的总有效率为95.24%,对照组的总有效率为76.19%,治疗组疗效明显优于对照组。结论：肿痛安丁香油调制成糊剂治疗慢性糜烂性唇炎疗效显著。     

骨形态发生蛋白2基因转染犬牙髓细胞

背景:研究发现骨形态发生蛋白2具有诱导间充质细胞向成骨细胞表型分化以及诱导新骨及修复性牙本质形成的能力。目的:通过对细胞超微结构的分析,探讨骨形态发生蛋白2基因转染的犬牙髓细胞,向成牙本质细胞转化的过程。方法:将培养的性状稳定的第4代犬牙髓细胞分为3组:基因转染组转染pEGFP-N1-BMP-2基因,空白载体转染组转染EGFP-N1空白荧光载体,未转染组不转染。结果与结论:成功构建pEGFP-N1-BMP-2真核表达质粒,并成功将其转染犬牙髓细胞,pEGFP-N1-BMP-2质粒转染促进犬牙髓细胞分泌骨形态发生蛋白2。pEGFP-N1-BMP-2质粒转染有促进牙髓细胞碱性磷酸酶活性的作用。透射电镜观察结果显示:转染后的犬牙髓细胞具有成牙本质细胞的形态特点。说明pEGFP-N1-BMP-2真核表达质粒转染后的牙髓细胞,具有成牙本质细胞的特征。