HCV RNA含量与肝脏组织病理学损伤之间的关系

目的:探讨丙型肝炎病毒感染者血清HCV RNA含量和ALT浓度与肝脏组织病理学损伤之间的关系.方法:应用TaqMan实时荧光定量PCR技术检测681例HCV感染患者血清HCV RNA,电化学发光分析技术检测HBsAg,ELISA检测抗HAV IgM、抗HCV IgG和抗HEV IgM,Bayer全自动生化分析仪检测ALT浓度.H-E染色,光学显微镜观察组织病理损伤程度.结果:681例血清标本中,HCV RNA和抗HCV抗体均阳性和均阴性者分别是150例和420例,HCV抗体阴性而HCV RNA阳性40例,HCV RNA阴性而HCV抗体阳性71例.在排除了甲型、乙型和戊型肝炎病毒感染后,190例HCVRNA阳性患者中,36例患者在HCV RNA检测前后7 d内,曾进行过肝脏组织病理学检测,轻度、中度和重度肝脏病理学损伤患者血清中,HCV RNA浓度及ALT浓度相差均不显著.结论:血清学标志物和病毒核酸都是监测HCV感染的重要指标.HCV RNA浓度、血清ALT浓度与肝脏病理损伤相关性不显著,HCV RNA水平不能反映肝脏病理损伤程度.     

肾移植患者术后BK病毒感染的检测及危险因素分析

目的:检测肾移植患者术后BK病毒(BKV)感染率,分析BKV感染的危险因素.方法:收集63例肾移植患者术后第1、 2、3、4、6 和8个月的尿液和血液标本,实时荧光定量PCR方法检测标本中BKV DNA含量,并根据检测结果进行分组:尿液、血液BKV DNA均阳性者为UV PV 组,尿液阳性而血液阴性者为UV PV-组,尿液、血液均阴性者为UV-PV-组.尿沉渣涂片寻找含有病毒包涵体的脱落尿路上皮细胞(Decoy细胞),并对Decoy细胞进行细胞免疫学检测;对临床高度怀疑为BK病毒相关性肾病患者(BKVAN)行移植肾活检.比较3组患者的年龄、术前冷缺血时间、术前血透时间、免疫抑制方案、群体反应性抗体(PRA)致敏程度、术后是否合并其他病毒感染等临床指标的差异,应用Logistic回归法分析筛选BKV感染和BKVAN发生的危险因素.结果:UV PV-组19例(30.1%), UV PV 组患者9例(14.3%),UV-PV-组患者35例;前两组首次发现BKV的中位时间分别为术后4个月和3个月.63例患者Decoy细胞检出率为39.7%,Decoy细胞免疫染色阳性率为54.3%.1例移植肾活检未见BKVAN表现.Logistic回归法发现BKV DNA感染与冷缺血时间有显著联系(P=0.048;OR=1.151),与其他指标无显著相关(P=0.069).结论:实时荧光定量PCR能较好地监测术后BKV感染,术后3～4个月是BKV排泄高峰,术前冷缺血时间可能是BKV感染的危险因素之一,而术后免疫抑制方案对BKV感染可能无明显影响.     

实时荧光定量PCR检测肾移植患者术后BK病毒感染

目的:建立肾移植术后患者尿液和外周血BK病毒(BKV)感染负荷的实时荧光定量PCR检测方法,并初步探讨其临床应用价值.方法:构建含有BKV VP1蛋白保守区核苷酸序列片段的质粒作为外参照品,采用TaqMan荧光探针检测技术,建立定量检测BKV DNA方法;并对112例肾移植术后患者,40例正常体检者的尿液和外周血标本BKV含量进行检测.结果:本研究建立的BKV实时荧光定量PCR检测方法灵敏度、特异度及重复性较好,定量PCR方法最低检测下限为8×102copy/ml,测量批内差异为0.54%～3.78%,批间差异为0.62%～4.58%.112例肾移植术后患者尿液和外周血BKV DNA的检测阳性率分别为27.7%和11.6%,BKV DNA阳性者尿液和外周血BKV中位数水平分别为8.2×104copy/ml和2.4×103copy/ml.40例正常人BKV尿液和外周血阳性率为2.5%和0%;与正常体检者相比,肾移植术后患者尿液及外周血BKVDNA阳性率及水平明显升高(P＜0.01).尿液BKV阳性率较外周血明显升高(P=0.02),但尿液和外周血中BKV含量无明显相关性.结论:实时荧光定量PCR检测肾移植患者术后BKV感染方法简便、可靠、准确,为进一步研究BKV感染与肾移植术后移植物丢失的关系奠定了基础.