快速建立裸鼠胶质瘤模型的实验研究

目的:探讨快速建立裸鼠C6犁脑胶质瘤动物模型的方法及在科研实验中应用的可行性.方法:将C6型鼠胶质瘤细胞悬液分别接种至雌雄裸鼠皮下,或用瘤组织块行异体移植至雌雄裸鼠皮下,观察裸鼠皮下移植瘤长出时间,并研究肿瘤的病理组织学及免疫组织化学特征.结果:(1)两种方法所建肿瘤模型其成功率均为100%,肿瘤生长状况良好,肿瘤病理组织学及免疫组织化学检查均符合胶质瘤细胞的形态学特征;(2)采用细胞接种法建立裸鼠脑胶质瘤模型所需的时间长,在雌雄裸鼠皮下生长速度不一,差别有统计学意义,P<0.05;(3)采用瘤组织块行异体移植法建立的肿瘤模型,其所需时间均较细胞接种法明显缩短,雌雄裸鼠肿瘤组织块生长速度基本相同,差别没有统计学意义.P>0.05.结论:(1)利用肿瘤组织块移植的方法可快速建立裸鼠皮下移植瘤模型,并能作为研究胶质瘤发病机制、生物学特性以及基因治疗的可靠动物模型;(2)利用肿瘤组织块异体移植的方法,可以缩短肿瘤研究中用于建立动物模型的时间,节约经济成本.     

RNAi沉默livin基因表达对胶质瘤U251细胞增殖的影响

目的:通过RNA干扰(RNA interference,RNAi)阻断胶质瘤U251细胞中livin基因的表达,研究livin基因沉默后对细胞生长和细胞凋亡的影响.方法:将合成的DNA正义链及反义链变性、退火,形成的双链DNA与pSilencer2.0线性质粒以T4DNA连接酶连接,重组质粒经酶切鉴定后,用脂质体法转染胶质瘤U251细胞,通过RT-PCR、免疫印迹检测干扰效果.MTT法检测细胞生长的影响,流式细胞仪检测转染后胶质瘤U251细胞的凋亡变化.结果:酶切证实设计合成的DNA片段已正确插入载体.RT-PCR、免疫印迹检测实验表明:pSilencer2.0-liv1、pSilencer2.0-liv2重组载体均能有效地阻断胶质瘤U251细胞中livin基因的表达,使livin基因在mRNA和蛋白水平上的表达明显下调(P<0.01),后者抑制效果更佳.转染后的U251细胞生长速度明显变慢.转染pSilencer2.0-1iv2实验组细胞的凋亡增加了17.0%.结论:重组真核载体能有效抑制U251细胞的livin表达,抑制细胞的增殖,诱导细胞凋亡.     

冠状切口双侧标准外伤大骨瓣开颅治疗双额颞部重型颅脑损伤

目的探讨双额颞部重型颅脑损伤的手术方式及疗效。方法回顾性分析重庆市渝北区人民医院神经外科2000年1月至2010年12月收治的124例双额颞部重型颅脑损伤手术患者的临床资料,其中近3年来采用冠状切口双侧标准外伤大骨瓣开颅治疗46例,为治疗组,占37%;常规行双侧皮骨瓣开颅术78例,为对照组,占63%,比较两组患者的预后。结果治疗组患者重残病死率为26.1%,治愈好转率为73.9%;对照组患者重残病死率为50.0%,治愈好转率为50.0%,治疗组明显优于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论采用冠状切口双侧标准外伤大骨瓣开颅治疗双额颞部重型颅脑损伤相比传统的双侧皮骨瓣同时开颅术,能显著提高抢救成功率,改善预后,为双额颞部重型颅脑损伤患者提供了较为理想的手术方式。     

冷光源吸引器辅助下小骨窗开颅血肿清除术治疗基底节区高血压脑出血

2007年1月~2013年6月,运用冷光源吸引器辅助下经侧裂-脑岛入路小骨窗开颅血肿清除术治疗基底节高血压脑出血104例,手术入路为经侧裂-脑岛入路,直视下以冷光源吸引器配合双极电凝清除血肿并止血。选取本院病人术后6h内复查CT示血肿清除率>80%者73例,血肿清除率50%~80%者21例,血肿清除率<50%者10例。术后存活92例,按ADL分级,恢复良好65例,中残22例,重残5例,死亡及放弃治疗12例。冷光源吸引器辅助下经侧裂-脑岛入路小骨窗开颅血肿清除术治疗基底节区高血压脑出血为直视下手术,手术时间短,损伤小,血肿清除率高,止血可靠,疗效确切,是理想的手术方式,值得临床推广运用。