人禽流感死亡病例不同组织器官中H5N1病毒的检测分析

目的了解H5N1病毒在人禽流感死亡病例组织器官中的分布和含量。方法在BSL-3实验室，测定H5N1禽流感病毒分离株的TCID50，并采用荧光定量PCR制作标准曲线；将人禽流感死亡病例的尸解标本，包括心、肝、脾、肺、肾、脑等组织标本研磨处理后，进行荧光定量PCR检测，并根据标准曲线推算H5N1禽流感病毒的病毒载量。结果心、肝、肾、脑组织标本中H5N1禽流感病毒检测为阴性，在肺、脾组织标本中检测到H5N1病毒，病毒载量分别为10^6.3TCID50／ml和10^4.55TCID50／ml。结论除呼吸系统外，在脾组织中也存在H5N1禽流感病毒。     

广东地区1998～2001年流感分析

目的 探讨广东地区流感流行特征并提出防治措施。方法 根据广东地区流感疫情和监测资料进行流感流行分析。结果 1998－2001年流感流行高峰在每年3－7月，1998－2000年流行优势毒株为H3N2毒株；2001年春季和夏季，B型流感和H1N1亚型流感先后在广东地区发生小流行。1998年和1999年分别从9例和1例流感患者鼻咽拭予中分离到H9N2流感毒株。结论 广东地区2002年将不会发生流感大规模流行；应加强流感监测，及时发现流感病毒新变异出现；指导流感疫苗的免疫接种，保护易感人群。     

新型甲型H_1N_1流感毒株NA基因特征和进化

目的 通过对新型甲型H1N1流感毒株神经氨酸酶(NA)基因序列的变异分析,揭示毒株NA基因变异与进化.方法 检测广东地区分离毒株NA基因核苷酸序列,同时对全球新型甲型H1N1流感毒株NA基因进行检索下载,采用Lasergene 7.1软件比对和分析NA基因核苷酸和氨基酸序列,结合临床资料分析变异基因进化,同时分析糖基化位点.结果 2009年4-12月69株毒株NA基因16个氨基酸位点置换,占3.41%(16/469);NA蛋白主要置换位点在V106I/H和N248D.毒株GD-801-2009(H1N1)和GD-1202-2009的NA基因明显受到的感染宿主选择性作用,而毒株GD-1-2009的NA基因明显受到的感染宿主负选择性作用.与毒株GD-1-2006(H5N1) NA基因比较,毒株GD-801-2009的NA基因插入Nt145-204,导致H1N1 NA蛋白增加第49~68位氨基酸(CNQSVITYENNTWVNQTYVN),其中包括4个糖基化位点.结论 广东新型甲型H1N1流感毒株NA基因正向不同方向进化;新型甲型H1N1流感NA蛋白新增4个糖基化位点.     

华南鸭流感病毒的进一步调查

1981年12月至1882年7月在广东省珠江三角洲调查家鸭感染流感病毒的情况。共收集到当地饲养的鸭咽拭子和泄殖腔拭子292份,分离到甲型流感病毒24株,阳性率为8.22％。经琼脂双扩散试验证实A/鸭/广东/248/82和A/鸭/广东/249/82病毒为甲型流感病毒,经血球凝集抑制和神经氨酸酶抑制试验证实这两株病毒的表面抗原为H_1N_4(Hsw_1Nav_4),经交叉血凝抑制试验鉴定这两株病毒的Hsw_1与A/Swine/Iowa/15/30以及A/New Jersey/8/76病毒抗原性有明显差异。具有Hsw_1血凝素的流感病毒在我国尚未见报告。本文讨论了这两株病毒在流感病毒生态学中的意义和家鸭在人类流感病毒新亚型起源中的作用。     

广东省首例人高致病性禽流感病例病原体的分离与初步鉴定

人禽流感病是由甲型禽流感病毒（AIV）某些亚型的毒株感染人引起的急性呼吸道传染病。人高致病性禽流感病的潜伏期一般为1～3d，起病急，早期表现类似普通流感。主要症状为发热，伴有流涕、鼻塞、咳嗽、咽痛、头痛和全身不适。2006年2月22号，广州市一家医院发现1名患者出现“流感样”症状．表现为发热、咳嗽和白细胞数降低等发热肺炎症状，3月3日因治疗无效死亡。     

禽类流感病毒实验室分析

流行性感冒 (流感 )是第一个实行全球性监测的病毒性急性呼吸道传染病 ,由于流感病毒抗原的易变性 ,目前尚无法完全加以控制。它不仅严重危害人类的身心健康 ,甚至可以夺走人的生命。自 1997年香港报告H5N1禽流感可感染人后 ,更证实禽在流感大流行株的起源作用。为此 ,1998～2 0 0 0年广东省设立 8个流感监测市对禽 (鸡 )进行流感监测 ,分离鉴定禽类流感与人流感病毒 ,并进行H9N2禽流感病毒的抗原分析。现将研究结果报告如下。1　材料和方法1 1　标本采集1 1 1　鸡咽拭子标本采集　各监测市对养鸡场或农贸市场的鸡采集鸡咽拭子 ,采集的咽…     

广东省食品中单核细胞增多性李斯特菌脉冲场凝胶电泳技术分子分型的研究

目的应用脉冲场凝胶电泳技术（PFGE）对广东省食品中分离的单核细胞增多性李斯特菌（Lm）进行分子分型,并建立PFGE数据库。方法参照美国PulseNet的Lm PFGE分子分型标准方法进行检测。应用BioNumerics软件对不同食物种类、时间和地点的分离株进行比对,分析菌株之间的相关性。结果107株Lm分成41个PFGE型,型别较为分散;从鸡肉中分离的菌株数最多（37株）,PFGE分型也最多（19个）;冷藏和冷冻食品的分离率较高,其中有26株菌仅存在1-2个电泳条带的差异,相似度极高;韶关和惠州地区分离的Lm存在着地区特异性;随时间变迁,部分菌株仍存在不同程度的相关性。结论广东省食品中分离的Lm在整体上表现出较大的遗传多样性,但部分菌株有不同程度的相关性。     

广东省食品中单核细胞增生李斯特菌污染状况调查

李斯特菌广泛分布于自然界是人畜共患的重要病源。近年来 ,欧美等国食源性李斯特菌病爆发的报导日益增多[1 ] 。由食物传播的李斯特菌病在人群和动物中暴发流行 ,已引起世界各国食品卫生界的高度重视 ,被列为九十年代食品中四大病原菌之一。目前 ,我国尚无食源性李菌病爆发流行的报导 ,但动物中的单核细胞增生李斯特菌病的暴发流行和禽肉中单核细胞增生李斯特菌污染情况已见报道[2 ] 。为了解广东省地区单核细胞增生李斯特菌在食品中污染状况 ,预防食源性的李斯特菌病的发生和流行 ,我们于 2 0 0 2年选择广东省五个具有代表性的监测点采集生…     

2000-2003年广东省流感监测结果分析

[目的]了解广东省流感流行情况,为预防和控制提供科学依据.[方法]在8个流感监测点采集疑似流感病人的咽拭子,一般人群及职业人群采集血清,用9～11 d鸡胚和(或)MDCK细胞分离病毒,用常量红细胞凝集抑制法(HI)鉴定病毒;用微量半加敏红细胞凝集抑制法(micro-HI)检测流感抗体.[结果]2000、2001年流感疫情较平静,2002、2003年由A(H3N2)引起的局部暴发增多,未发生大流行.4年共分离流感病毒1 425株,A(H3N2)占61. 2%、B型占27.0%、A(H1N1)占11.8%;从鸡标本分离A(H9N2)型禽流感病毒17株.一般人群血清A(H3N2)抗体阳性率较高,B(Yamagata)型较低;职业人群部分A(H9N2)禽流感抗体阳性.[结论]除2003年未分离到A(H1N1)外,2000-2002年都能同时分离到A(H1N1),A(H3N2)亚型和B型.做好流感监测对控制流行与预测有重要意义.     

应用多重TaqMan MGB探针实时聚合酶链反应检测A型和B型流感病毒的研究

目的 应用多重real-time PCR方法检测A型和B型流感病毒,探讨其在快速诊断流感病毒感染中的优越性.方法 根据A型和B型流感病毒M基因的相对保守序列,设计两套特异性引物和TaqMan MGB探针,进行多重real-time PCR检测A型和B型流感病毒.将该方法与病毒分离、免疫层析、传统RT-PCR进行比较,并对多重real-time PCR的特异性进行评估.并应用multiplex real-time PCR方法和常规的病毒分离方法对广东省流感样病例334份咽拭标本进行检测,比较其灵敏性和特异性.结果 多重real-time PCR反应可以检测到A、B型流感病毒的最低病毒量分别为10-1和10-3TCID50/反应.该方法在对流感病毒株以及其他呼吸道病毒株样品的检测中,未发现假阳性和假阴性现象,特异性为100%.该方法对334份临床标本进行检测,结果与经典检测方法(病毒分离鉴定结合血清学检测)的符合率达100%,且灵敏度明显高于病毒分离.结论 该研究建立的多重TaqMan MGB real-time PCR是一种快速、灵敏性和特异性高的流感病毒检测方法,对于流感的早期诊断及指导临床有重要意义.