PS341对他莫昔芬诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡影响及其机制的探讨

目的:研究蛋白酶体抑制剂PS341是否可增强他莫昔芬(TAM)诱导的乳腺癌细胞凋亡,并探讨可能的机制。方法:采用MTT方法测定细胞活力,采用流式细胞仪检测细胞凋亡,采用蛋白质印迹法检测Caspase-8的活化,PARP的裂解及死亡受体Fas蛋白的表达。结果:TAM以时间及浓度依赖的方式抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖,24及48h的IC50分别为25和6μmol/L,25μmol/L的TAM处理24h可诱导21.9%的MCF-7细胞发生凋亡,10nmol/L的PS341预处理后给予25μmol/L的TAM处理24h细胞凋亡增至34.6%,PS341与TAM均可轻微上调Fas的表达水平,两药联合应用后可显著上调Fas的表达水平,并明显增强线粒体外凋亡通路的活性。结论:PS341与TAM联合应用可通过上调Fas的表达水平,增强TAM诱导的乳腺癌MCF-7细胞凋亡。     

C-12型蛋白芯片在乳腺癌诊断中的临床价值

目的 探讨C-12型蛋白芯片10项肿瘤标志物在乳腺癌患者血清中的表达情况,并筛选出临床价值较高的标志物.方法 采用蛋白芯片检测系统测定32例乳腺癌患者、28例良性肿瘤患者和19例健康对照者血清中10项标志物(CA19-9、NSE、CEA、CA242、CA125、CAl5-3、AFP、Ferritin、HCG、HGH)的表达水平,用SPSS12.0软件包进行统计分析.结果 所检测的10项标志物单项对乳腺癌的敏感度依次为Ferritin(12.5%)CA242(6.25%)、HGH(6.25%)CEA(3.13%)、CA19-9、CA15-3CA125(0%)、AFP、NSE、HCG.筛选出CA15-3+CA242+HGH组合为诊断乳腺癌效率较高的组合.Ⅲ期Ferritin明显高于Ⅰ+ⅡA期(P《0.05).而CA15-3检测水平ER阴性患者明显高于阳性患者(P《0.05),CA242检测水平乳腺癌ER、PR阳性患者明显高于阴性患者(P《0.05).结论 Ferritin对于判断乳腺癌临床分期,可提供有价值的线索.CA15-3并非乳腺癌早期诊断有效标志物,但对于选择治疗方法及判断预后方面,仍可以提供帮助.CA15-3+CA242+HGH联合检测乳腺癌不具有足够的诊断价值.     

ERK通路对胃癌细胞顺铂敏感性的调节作用

目的:研究在人胃癌细胞中,细胞外信号调节蛋白激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)通路对人胃癌细胞顺铂敏感性的影响.方法:采用MTT法测定顺铂对两种胃癌细胞MGC-803、BGC-823的增殖抑制影响,测定PD98059作用BGC-823细胞后顺铂对细胞的增殖抑制影响.Western blot方法检测MGC-803、BGC-823细胞中谷胱甘肽-S-转移酶π(glutathione S-transferases π,GGST-π)蛋白的表达;及PD98059作用BGC-823细胞24 h后BGC-823细胞中p-ERK、GsT-π蛋白的表达.结果:顺铂作用两种胃癌细胞7 2 h后.MGC-803,BGC-823细胞的IC50值分别为0.71和1.21 mg/L,且MGC-803细胞的增殖率明显低于BGC-823细胞的增殖率(P<0.05).MGC-803细胞顺铂的敏感性高于BGC-823细胞.MGC-803细胞不表达GST-π蛋白,BGC-823细胞强表达GST-兀蛋白.20 μmol/LPD98059作用BGC-823细胞24 h后,p-ERK蛋白表达明显下调,GST-π蛋白表达亦明显下调.20 μmol/L PD98059作用BGC-823细胞24 h后,加入顺铂培养48 h,BGC-823+PD98059组增殖率明显低于对照组,BGC-823细胞对顺铂的敏感性明显增强.结论:下调胃癌细胞GST-π蛋白的表达可增强其对顺铂的敏感性;抑制胃癌细胞中ERK通路的活化,可以降低其细胞内GST-π蛋白表达;ERK通路通过调节人胃癌细胞GST-π基因表达影响其对顺铂的敏感性.     

抑制细胞外信号调节激酶对As2O3诱导胃癌细胞系MGC-803凋亡的作用

目的探讨细胞外信号调节激酶在三氧化二砷(As2O3)诱导胃癌细胞系MGC-803凋亡的信号转导途径中的作用.方法采用MTT法检测As2O3对胃癌细胞系MGC-803的增殖抑制作用,采用瑞氏-姬姆萨染色和流式细胞仪检测As2O3诱导MGC-803凋亡以及加入选择性ERK抑制剂PD98059后细胞凋亡率的变化.结果5 μmol/L与10 μmol/L的As2O3作用24 h后凋亡率分别为(4.74±0.03)%和(11.93±0.06)%,而与PD98059联合作用24 h后凋亡率分别增加至(11.65±0.09)%和(18.15±0.10)%,P＜0.05.As2O3抑制MGC-803细胞的增殖,并诱导凋亡.结论预先抑制ERK途径增加了As2O3诱导MGC-803细胞的凋亡效应.ERK途径可能参与了As2O3诱导胃癌细胞系MGC-803凋亡的信号转导途径.     

DNA-PKcs和Bcl-2在急性白血病细胞中的表达及相关性研究

目的：研究DNA-PKcs和Bcl-2在急性白血病（AL）细胞中的表达及相关性。方法：采用免疫组化SP法检测62名初治AL患者骨髓白血病细胞DNA-PKcs和Bcl-2的表达。结果：DNA-PKcs在对化疗药物耐药患者白血病细胞中的表达率（51.5%）明显高于敏感组（20.7%）,P〈0.05。Bcl-2在对化疗药物耐药患者白血病细胞中的表达率（84.8%）明显高于敏感组（62.1%）,P〈0.05。耐药组患者的白血病细胞中DNA-PKcs（＋）/Bcl-2（＋）,DNA-PKcs（＋）/Bcl-2（-）,DNA-PKcs（-）/Bcl-2（＋）和DNA-PKcs（-）/Bcl-2（-）细胞的百分率分别是88.2%,33.3%,44.8%和30.0%,DNA-PKcs（＋）/Bcl-2（＋）与DNA-PKcs（＋）/Bcl-2（-）、DNA-PKcs（-）/Bcl-2（＋）和DNA-PKcs（-）/Bcl-2（-）之间差异均有统计学意义（P〈0.05,P〈0.01,P〈0.01）。33名耐药组患者中,DNA-PKcs和Bcl-2的表达无相关性,r=0.171,P〉0.05。29名敏感组患者中,DNA-PKcs和Bcl-2的表达呈负相关,r=-0.45,P〈0.05。结论：DNA-PKcs可能下调Bcl-2的表达,AL患者的白血病细胞中DNA-PKcs和Bcl-2表达水平增高与临床耐药密切相关。     

FGFR2和C-Cbl在胃癌组织中的表达及其临床意义

背景与目的：FGFR2是受体型酪氨酸激酶,c—Cb1是泛素蛋白酶体通路中的一个新的RING Finger型泛素连接酶,本研究探讨FGFR2和c—Cb1在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法：构建胃癌组织芯片,应用免疫组化SP法,检测两种蛋白的表达情况。结果：FGFR2和c-Cb1在胃癌组织中的阳性表达率分别为77．4％和71．0％。FGFR2蛋白表达与浸润深度及病理分期有关（P〈0．05）,而与性别、年龄、分化程度及淋巴结转移无关;c—Cb1蛋白表达与浸润深度及病理分期有关（P〈0．05）,而与性别、年龄、分化程度及淋巴结转移无关。FGFR2与c—Cb1的表达强度呈正相关。结论：FGFR2和c-Cb1在胃癌中高表达;FGFR2及c—Cb1蛋白的表达强度与胃癌的浸润深度及病理分期均呈正相关;FGFR2与c—Cb1的表达强度均呈正相关。     

急性白血病患者Topo Ⅱα和DNA-PKcs的表达与多药耐药的关系

目的:探讨拓扑异构酶Ⅱα(TopoⅡα)和DNA依赖蛋白激酶催化亚单位(DNA-PKcs)在急性白血病(AL)患者中的表达及其与多药耐药的关系.方法:采用免疫组织化学SP法检测62例AL患者骨髓白血病细胞TopoⅡα和DNA-PKcs的表达.结果:1)TopoⅡα在耐药组和敏感组中阳性表达率分别为33.3%和69.0%,耐药组TopoⅡα阳性表达率明显低于敏感组(P＜0.01).2)DNA-PKcs在耐药组和敏感组中的阳性表达率分别为51.5%和20.7%,耐药组DNA-PKcs阳性表达率明显高于敏感组(P＜0.05).3)在TopoⅡα阳性表达的患者中,DNA-PKcs阳性表达组耐药率(61.5%)明显高于DNA-PKcs阴性表达组(16.7%)(P＜0.05).在DNA-PKcs阴性表达的患者中,TopoⅡα阴性表达组耐药率(61.9%)明显高于TopoⅡα阳性表达组(16.7%)(P＜0.01).TopoⅡα阳性表达DNA-PKcs阴性表达组耐药率最低(16.7%),而TopoⅡα阴性表达DNA-PKcs阳性表达组耐药率最高(90.0%)(P＜0.001).TopoⅡα和DNA-PKcs两者表达之间无相关性.结论:AL患者TopoⅡα表达水平下降,DNA-PKcs表达水平升高与临床耐药密切相关,联合检测TopoⅡα和DNA-PKcs对临床耐药和预后的判断有一定价值.     

急性白血病细胞促红细胞生成素受体的表达

促红细胞生成素（ｅｒｙｔｈｒｏｐｏｉｅｔｉｎ,ＥＰＯ）的主要靶细胞是ＣＦＵ－Ｅ,因而ＣＦＵ－Ｅ具有促红细胞生成素受体（ＥＰＯ－Ｒ）量最多。但于其他一些细胞也有ＥＰＯ－Ｒ的存在。我们已于人白血病细胞株中检测到了功能性的ＥＰＯ－Ｒ。本实验应用免疫组化技术...     

急性白血病MRP1与LRP的表达及临床意义

目的:探讨急性白血病患者多药耐药相关蛋白(MRP1)与肺耐药相关蛋白(LRP)的表达及其临床意义.方法:应用免疫组织化学S-P方法检测52例急性白血病患者及12例正常人的MRP1与LRP表达.结果:急性白血病MRP1阳性表达率为28.8%(15/52),LRP为42.3%(22/52).MRP1表达阳性患者的完全缓解(CR)率为33.3%,表达阴性患者CR率为59.5%,两者差异无显著性.LRP表达阳性患者CR率明显低于表达阴性患者,分别为31.8%和73.3%,有十分显著差异(P<0.01).Pearson相关分析MRP1与LRP表达无明显相关(r=0.254,P>0.05).MRP1/LRP过表达CR率明显低于MRP1/LRP 阴性者(分别为22.2%和75.0%,P<0.01).结论:LRP、MRP1/ LRP过表达与急性白血病患者的预后密切相关,是影响急性白血病患者CR率的重要危险因素.     

PD98059下调GST-π表达增强人肠癌RKO细胞对奥沙利铂的敏感性

目的探讨在肠癌RKO细胞中,MAPK/ERK特异性抑制剂PD98059对奥沙利铂药物敏感性的影响及谷胱甘肽-S-转移酶π(GST-π)在这一过程中的作用。方法采用MTT法测定奥沙利铂和(或)PD98059处理后对人肠癌RKO细胞的增殖抑制影响;Western-blot方法检测PD98059作用人肠癌RKO细胞24 h后,RKO细胞中p-ERK及GST-π蛋白的表达。结果奥沙利铂作用人肠癌RKO细胞24、48和72 h,IC50值分别为38.72、23.41、10.81μg/ml,20μmol/L PD98059预处理RKO细胞24 h后,再加入奥沙利铂培养24、48和72 h,联合用药组细胞增殖率明显低于对照组,RKO细胞对奥沙利铂的药物敏感性显著增强。20μmol/L PD98059作用RKO细胞24 h后,p-ERK蛋白表达明显下调,GST-π蛋白表达亦明显下调。结论 PD98059通过有效抑制ERK通路,进一步下调人肠癌RKO细胞内GST-π的表达,增强RKO对奥沙利铂的药物敏感性。