继发耐药肺结核104例分析

目的：分析抗结核治疗过程中出现的耐药情况。方法：对化疗超过1个月的患者痰标本进行酸性罗氏培养基培养；采用改良罗氏培养基用浓度比例法进行药物敏感测定。结果：789例痰标本培养出分枝杆菌220例，其中耐药菌104例，总耐药率47．2％，其中异烟肼（H）、链霉素（S）、乙胺丁醇（E）和利福平（R）耐药率分别为29．5％，26．8％，19．5％和15．5％，耐多药率10．5％。结论：本地区继发耐药率及耐多药率与全国第四次结核病流行病学抽样调查报告接近，提示NTP在我地区有效发挥作用，结核病控制取得一定成效。     

苦参素治疗拉米夫定耐药乙型肝炎17例分析

目的:探讨门诊运用苦参素对耐拉米夫定乙型肝炎患者安全停药的临床效果。方法:对17例门诊就诊的耐拉米夫定乙型肝炎患者,口服苦参素600 mg/d,拉米夫定有计划停药,通过检测有计划停药过程中的肝功能、血清转换和HBV-DNA载量进行分析。结果:17例患者均安全停药,肝功能恢复并维持正常,HBV-DNA滴度下降。结论:长期苦参素治疗可使拉米夫定耐药病例安全停药,并有护肝和抗乙肝病毒效果。     

刚地弓形虫LDH-Like MDH cDNA的克隆和序列分析

目的获取弓形虫RH株速殖子苹果酸脱氢酶(MDH)的cDNA全长序列，并对推导翻译出的氨基酸(aa)序列进行分析。方法将NCBI GenBank中登录的弓形虫MDH EST序列进行比对、拼接和电子延伸，发现近5’末端的部分核酸序列缺失。基于分析，设计的上游、下游引物分别包含起始密码子ATG和终止密码子TGA(TGA→UGA)，使经RT-PCR扩增出的片段对应完整的CDS或者ORF。之后对MDHCDS推导翻译出的aa序列进行了保守功能域和同源性分析。结果本研究克隆的MDH的cDNA全长951bp，推导翻译出的蛋白质有316个aa组成，约35kDa，与预期大小接近。保守功能域分析表明，弓形虫MDH最接近类-乳酸脱氢酶型(lactate dehydrogenase-like)MDH，其准确定名缩写为LDH-like MDH，同时弓形虫MDH还具有其它脱氢酶类的特征。弓形虫MDH除与隐孢子虫和恶性疟原虫高度同源外，还与很多细菌等物种同源，但与人的同源性最低(22％)。弓形虫MDH cDNA序列在NGBI GenBank中登录号为AY650028，对应aa序列的登录号为AAT67462。结论本研究首次获得了弓形虫MDH基因的全长cDNA序列和对应的aa序列。MDH是三羧酸循环中的重要酶类，该酶活性的改变。将直接影响弓形虫的存活。弓形虫MDHaa序列与人MDH蛋白间的同源性很低，提示基于MDH蛋白作为药靶，经高通量技术筛选抗弓形虫药具有可行性。     

刚地弓形虫RH株微线体蛋白MIC3成熟肽的克隆与表达

目的 克隆编码刚地弓形虫(Tazoplasma gondii)RH株微线体蛋白MIC3成熟肽的基因，构建原核表达载体pET-MMIC3．并在大肠杆菌BL21株中表达。方法 采用PCR技术从刚地弓形虫RH株基因组DNA中扩增编码微线体蛋白MIC3成熟肽的基因。并克隆到T载体上，经测序鉴定后，将目的基因亚克隆到表达载体per30a( )上，构建质粒pETMMIC3。表达产物用Western blot进行进一步确认。结果 经初步菌液PCR鉴定，提取质粒双酶切鉴定并测序，确认插入T载体的序列为所需的目的序列；亚克隆构建pET-MMIC3，转化到宿主菌大肠杆菌BL21，得到分子量为37．2kDa的重组表达蛋白。Western blot的结果与预测相符。结论 成功的克隆并融合表达了刚地弓形虫RH株微线体蛋白MIC3成熟肽，为进一步研究其在弓形虫粘附和入侵中的作用奠定了基础。     

乙型肝炎病毒核酸定量检测中不确定度的研究

目的研究应用实时荧光定量PCR（Fluorescence Quantitative PCR,FQ-PCR）开展乙型肝炎病毒（Hepatitis Bvirus,HBV）核酸定量检测中的测量不确定度。方法通过实时荧光定量PCR进行乙型肝炎病毒核酸定量检测的实验分组设计与数据处理分析,计算分析该检测方法不同来源的测量不确定度值。结果对3组不同水平浓度值样本来源的数据采用两种方法进行统计分析,QDNA的组标准差远远大于LGQDNA的标准差,初始浓度数值经过对数转化后离散程度降低,统计平均值也发生了偏离。LGQDNA为3.465、4.927和6.018的样本,其浓缩过程来源的相对不确定度分别为0.020、0.019和0.009;LGQ无偏估计在3.706、6.750的样本的核酸提取来源相对不确定度分别为0.016和0.009;数据分析来源的LGQ不确定度为0.000～0.008;热循环仪来源的LGQ不确定度为0.002～0.008。结论使用核酸浓度值QDNA与使用其对数值LGQDNA进行数据统计分析的结果存在差异;标本制备过程中的浓缩和DNA提取是实时荧光定量PCR进行HBV核酸定量检测时测量不确定度的重要来源,标本制备环节是影响该项检测的关键因素,包括试剂、方法和操作者的准确操作能力。     

脂血标本的核酸定量检测效果评价

目的评价脂血标本的核酸定量检测实时扩增曲线，以探讨此类标本进行HBVDNA定量检测的可接受性。方法建立扩增曲线观察法、扩增效率Grubbs离散值分析法及扩增效率置信区间估计法，评价接收脂血标本进行荧光定量PCR法HBVDNA定量检测的有效性。结果该2批次扩增的各样品扩增效率数值未发现离散值，3例脂血标本的扩增效率在同批样品扩增效率的90％置信区间内，与扩增曲线观察法结果一致。结论3种评价方法均对修正标准操作程序以接收该类标本提供了支持性的依据。     

加味桃红四物汤治疗气滞血瘀型经行腹痛28例

自 1 997年 1月以来 ,我们用加味桃红四物汤治疗气滞血瘀型经行腹痛 2 8例 ,疗效满意 ,现报道如下。1　临床资料本组 2 8例中 ,年龄 2 0～ 2 5岁 1 8例 ,2 6～ 3 0岁 5例 ,3 0～ 4 0岁 4例 ,4 1岁以上 1例。其中已婚 1 0例 ,未婚 1 8例 ;病程最短者 1年 ,最长者 1 0年。临床表现为经前或经行下腹胀痛 ,月经量少。气滞为主者胀甚于痛 ,胀甚连及两胁 ,胸闷 ,或乳房胀痛 ,经行不畅 ,善叹息 ,舌暗红 ,脉弦 ;血瘀为主者经前经行腹痛或剧痛 ,经色黯红 ,血块多 ,或经血夹膜样物 ,血块排出后痛减 ,唇色紫暗或唇有黯斑、舌紫黯、边有瘀斑或有瘀点 ,脉…     

人乳头瘤病毒16型早基因E6/E7编码区序列变异研究

目的获取人乳头瘤病毒16型早基因E6/E7的编码区序列并进行变异分析,为新型分子诊断方法的研发提供目标序列。方法通过导流杂交基因芯片技术获取人乳头瘤病毒16型感染宫颈脱落细胞。设计特异性引物,扩增人乳头瘤病毒16型早基因E6/E7的编码区序列,克隆后测序并对序列进行变异分析。结果通过导流杂交基因芯片技术进行宫颈脱落细胞的分型检测,获得了人乳头瘤病毒16型感染阳性标本;选择其中3份阳性标本核酸为模板,通过特异性引物均成功扩增出大小介于750 bp和1 000 bp之间的目的序列;分别克隆到T载体上并测序,得到3条人乳头瘤病毒16型早表达基因E6/E7的编码区序列,克隆并测序后向GenBank核酸数据库提交获收录,登录号分别为EU869316、EU869317和EU869318;经BLAST分析,3条序列与GenBank序列PPH16（Accession：K02718）的E6/E7编码区序列一致性均为99%,且存在8种碱基置换,其中4种为同义突变,另4种则可引起所编码的相应氨基酸残基改变。结论本研究得到了与HPV高危型16型PPH16高度相似的E6/E7编码序列,为HPV致病机制和新型分子检测方法研究奠定了基础。     

脐血乙型肝炎病毒核酸载量检测

评价脐血乙型肝炎病毒（hepatitis Bvirus,HBV）核酸载量检测结果。方法：通过建立扩增效率分析法，评价脐血进行HBV-DNA定量检测的有效性；通过比较脐血HBV血清学标志物的检测结果与脐血标本HBV-DNA定量检测结果，评价检测方法。结果：HBV血清学标志物检测结果为大三阳，即HBsAg（＋）、HBeAg（＋）和HBcAb（＋）的乙型病毒性肝炎产妇．其新生儿脐血标本在HBV-DNA定量检测中。20例中有13例（65％）发生扩增，扩增效率分析与其他血清标本差异无显著性：该20例脐血标本的HBV血清学标志物检测结果HBcAb（＋）12例（60％），HBeAg（＋）11例（55％），而其中HBsAg（＋）仅1例（5％）。结论：脐血标本可用于检测HBV核酸载量。     

Graves眼病的内科治疗

Ｇｒａｖｅｓ眼病（Ｇｒａｖｅｓｏｐｈｔｈａｌｍｏｐａｔｈｙ，ＧＯ）又名甲状腺相关性眼病，是一种器官特异性的自身免疫性疾病，按病情的严重程度分为六级，本文就其预防、治疗及近年的进展综述如下。１Ｇｒａｖｅｓ眼病的防治在甲亢的病人中，有１０％的甲亢与眼病并...