木鳖子抗肿瘤有效作用部位筛选及作用机制探讨

目的:观察中药木鳖子不同提取部位体内体外的抗肿瘤作用,并考察其中抗肿瘤效果显著的木鳖子乙酸乙酯提取部位的抗肿瘤作用机制。方法:采用索氏提取技术将中药木鳖子按照溶剂极性顺序依次提取,得到不同成分,采用细胞增殖实验结合动物抗肿瘤模型方法进行药效评价,运用现代分子生物学技术阐明其中最优部位可能的抗肿瘤作用机制。结果:中药木鳖子乙酸乙酯提取部位在体外和体内实验中均可表现出明显的抑制肿瘤生长能力(P0.05),且对实验动物无明显的毒副作用,本研究首次发现木鳖子乙酸乙酯提取部位可影响表皮生长因子(EGFR)激酶活性(P0.05),并可明显抑制EGFR蛋白磷酸化表达(P0.05),可明显抑制丝裂原活化蛋白激酶家族(mitogen activated protein kinase,MAPKs)通路上重要节点蛋白细胞外信号调节激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK1/2),氨基末端激酶(C-Jun N-terminal kinase,JNK)和丝裂原激活蛋白激酶p38的磷酸化水平(P0.05),且具有浓度依赖关系。结论:中药木鳖子乙酸乙酯提取部位可通过抑制EGFR蛋白及相关通路蛋白活性,在体内外实验中显著抑制肿瘤的生长。     

重楼皂苷Ⅶ对胰腺癌PANC-1细胞增殖、迁移与侵袭作用及机制研究

目的研究重楼皂苷Ⅶ对人胰腺癌PANC-1细胞增殖、迁移与侵袭作用及机制。方法采用MTT法检测重楼皂苷Ⅶ对PANC-1细胞存活率的影响;观察重楼皂苷Ⅶ对PANC-1细胞形态的影响;采用划痕实验和Transwell小室法考察重楼皂苷Ⅶ对PANC-1细胞迁移和侵袭能力的影响;采用流式细胞术检测重楼皂苷Ⅶ对PANC-1细胞凋亡的影响;采用Western blotting法检测重楼皂苷Ⅶ对PANC-1细胞半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、B细胞淋巴瘤-2(B-celllymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-associated X protein,Bax)、聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)、DNA酶抑制物(inhibitor of caspase-activated deoxyribonuclease,ICAD)和程序性死亡分子配体-1(programmed death ligand 1,PD-L1)蛋白表达的影响。结果重楼皂苷Ⅶ可抑制PANC-1细胞存活率,显著抑制PANC-1细胞迁移和侵袭能力(P0.01),显著诱导PANC-1细胞凋亡(P0.05、0.01),显著升高PANC-1细胞中凋亡相关蛋白Cleaved Caspase-3、PARP、Bax表达水平(P0.01),显著降低pro-PARP、ICAD、Bcl-2、PD-L1蛋白表达水平(P0.05、0.01)。结论重楼皂苷Ⅶ能够抑制PANC-1细胞增殖、迁移和侵袭,并可能通过下调PD-L1表达诱导PANC-1细胞凋亡。     

猫眼草乙酸乙酯部分的抗肿瘤活性研究

目的：分离猫眼草乙酸乙酯部分提取物,对其指标成分进行含量测定,并对其抗肿瘤活性进行体外细胞实验研究,以期为猫眼草的利用与开发提供理论基础,为开发天然的抗肿瘤药提供新的方向和更多的选择。方法：高效液相色谱法测定乙酸乙酯部分槲皮素与没食子酸的含量;溶剂洗脱法对猫眼草乙酸乙酯部分进行分离;MTT法测定不同浓度的猫眼草乙酸乙酯各组份对乳腺癌ZR-75-30细胞生长的抑制作用。结果：猫眼草乙酸乙酯部分含有槲皮素19.99%,没食子酸55.04%。从猫眼草乙酸乙酯部分得到17个流份合并为6个组份。猫眼草乙酸乙酯部分分离的各组分（浓度50 μg·ml-1-150 μg·ml-1范围）对乳腺癌细胞ZR-75-30的生长有抑制作用,且呈现一定的梯度关系,随着药物浓度的升高,对乳腺癌细胞的生长抑制率增强。其中组分2的抗肿瘤活性最强。结论：猫眼草乙酸乙酯部分提取物含有黄酮和酚酸类成分,各组分对乳腺癌细胞生长均有抑制作用。     

医学模拟中心国际认证的实践经验与探索

近年来,医学模拟教育在我国迅猛发展,提升了医学教育和医疗服务的整体质量。国际医学模拟协会（SSH）是全球学术影响最大、最权威的医学模拟学术组织,通过实施模拟教育评估认证计划以推动世界医学模拟教育的发展,从而提高医疗质量、保障患者安全。本文全面回顾了中南大学湘雅二医院临床技能训练中心作为国内首家同时通过SSH教育与系统整合双领域认证的医学模拟中心申报认证的实践过程,认真总结了认证的经验与体会,以期促进我国医学模拟中心建设及医学模拟教育事业的进一步发展。     

溶瘤性单纯疱疹病毒G47Δ调节HER2促进人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的机制研究

目的探讨溶瘤性单纯疱疹病毒G47Δ调节HER2促进人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的机制研究。方法用不同滴度G47(MOI=0.00,MOI=0.01,MOI=0.1)处理乳腺癌MCF-7/HER2过表达组(ER+,HER2-high)、MCF-7/HER2低表达组(ER+,HER2-low)和MCF-7对照组(ER+)细胞,CCK-8法检测检测细胞成活率;流式细胞术检测细胞凋亡率;Hoechst33258染色法检测乳腺癌细胞凋亡形态;Western blot检测溶瘤性单纯疱疹病毒G47Δ作用后乳腺癌细胞中HER2和Cleaved-caspase-3凋亡蛋白表达。结果随着溶瘤性单纯疱疹病毒G47Δ给药剂量的增大,MCF-7/HER2过表达组、MCF-7/HER2低表达组和MCF-7对照组细胞存活率明显降低,细胞凋亡率显著上升,HER2和Cleaved-caspase-3凋亡蛋白表达明显上升,差异有统计学意义(P0.05)。与病毒G47ΔMOI=0.01处理MCF-7对照组相比,MCF-7/HER2低表达组细胞存活率显著升高,细胞凋亡率显著下降,HER2和Cleaved-caspase-3凋亡蛋白表达明显下降;MCF-7/HER2过表达组存活率显著降低,细胞凋亡率显著上升,HER2和Cleaved-caspase-3凋亡蛋白表达明显上升;与病毒G47ΔMOI=0.1处理MCF-7对照组相比,MCF-7/HER2低表达组细胞存活率显著升高,细胞凋亡率显著下降,HER2和Cleaved-caspase-3凋亡蛋白表达明显下降;MCF-7/HER2过表达组存活率显著降低,细胞凋亡率显著上升,HER2和Cleaved-caspase-3凋亡蛋白表达明显上升,差异有统计学意义(P0.05)。结论溶瘤性单纯疱疹病毒G47Δ有效诱导HER2过表达乳腺癌MCF-7细胞发生细胞凋亡作用;溶瘤性单纯疱疹病毒G47Δ可以呈浓度依赖性地促进HER2蛋白降解,诱导乳腺癌MCF-7细胞发生凋亡。     

超声酶法对锦灯笼中黄酮和木犀草素提取工艺的优化

目的优选锦灯笼中总黄酮和木犀草素的提取工艺。方法以超声波辅助纤维素酶进行提取,研究酶解时间、料液比、酶解温度、酶用量等4个因素对锦灯笼总黄酮提取率的影响。采用UV法和HPLC法,分别测定锦灯笼的总黄酮和木犀草素的含量。结果超声波辅助酶法提取锦灯笼中总黄酮的最佳工艺条件:酶解时间3 h、料液比1∶10(w/v)、酶解温度60℃、纤维素酶用量75 mg/g,在此条件下得到的总黄酮和木犀草素总评分为3.951。结论该提取工艺简便、易行、高效,是提取锦灯笼总黄酮和木犀草素的可行方法,具有一定的推广价值,为进一步开发利用锦灯笼总黄酮和木犀草素提供了理论依据。     

大骨瓣开颅术治疗重症颅脑创伤临床分析

目的探究开颅术在颅脑创伤治疗中的临床效果,丰富临床经验。方法选取2008年2月至2013年5月接受临床治疗的66例重症颅脑创伤患者,将其分为大骨瓣组和传统组,各33例。大骨瓣组患者采用标准的大骨瓣开颅术治疗,传统组采用传统的额骨瓣或颞骨瓣开颅进行治疗。对所有患者开颅手术的治疗效果以及并发症情况进行综合对比研究。结果大骨瓣组的治疗效果和术后并发症情况均明显优于传统组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论对于重症颅脑创伤患者,大骨瓣开颅术能显著改善预后情况,在提高患者存活率的同时,能大大降低并发症发生率,值得在临床中深入研究,并推广应用。     

下腔静脉人工血管置换术后放疗对血管内膜的影响

目的 观察术后放疗对犬下腔静脉人工血管置换术后人工血管内膜的影响.方法 犬16只完全随机法分为对照组(n=8)和放疗组(n=8),均行下腔静脉膨体聚四氟乙烯(ePTFE)人工血管置换术.放疗组于术后第2N行体外35 Gy放疗,对照组术后不予放疗.2N犬均于术后第8N采集标本,观察人工血管通畅率,并行HE染色、人工血管内膜厚度测量,增殖细胞核抗原(PCNA)及CD34免疫组化检测,计算人工血管内膜100μm内皮细胞数.结果 术后第8周,放疗组人工血管通畅率为100%(8/8),对照组为75%(6/8).放疗组各段人工血管内膜厚度较对照组明显减少[近心端:(610.69±32.90)μm比(753.39+10.36)μm,中段:(530.51±32.14)μm比(636.55±20.23)μm,远心端:(544.52±41.99)μm比(710.39±30.92)μm,均P＜0.01].放疗组各段人工血管内膜的PCNA阳性细胞百分率较对照组减低[近心端:(45.1±7.5)%比(56.3±7.8)%,中段:(29.2±4.1)%比(36.6±4.9)%,远心端:(33.8±5.5)%比(40.7±6.7)%,均P＜0.05].2组人工血管内膜100μm内皮细胞数的比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 下腔静脉人工血管术置换后35 Gy体外放疗不影响移植人工血管通畅率,对内膜血管平滑肌细胞的覆盖亦无明显影响,但可抑制人工血管内膜增生和PCNA的表达.     

大动脉病变的腔内血管外科治疗

目的探讨大动脉病变的腔内血管外科治疗方法.方法回顾性分析33例大动脉病变腔内血管外科治疗的临床资料.结果33例患者均行腔内血管外科技术治疗,3例胸腹主动脉夹层患者术后有近端漏血,2例分别于术后7 d、1个月后漏血停止,1例漏血持续存在;7例腹主动脉瘤患者术后漏血1例,4 d后停;动脉狭窄患者术后远端动脉搏动立即恢复.随访31例,随访时间1个月～3年,均生存良好.结论腔内血管外科技术治疗大动脉病变具有创伤小,术后恢复快,并发症少等优点,有条件者应优先考虑腔内治疗,特别是对某些不能耐受手术的患者可发挥重要的作用.