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目的:探讨虫草素对胆囊癌细胞SNU-308增殖和迁移的影响及其分子机制。方法:MTT法和平板集落形成实验检测不同浓度虫草素对胆囊癌SNU-308细胞活力和集落形成能力的影响;Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡率;Western blot法检测细胞凋亡和自噬相关蛋白以及Akt、ERK1/2和Ezrin蛋白的磷酸化水平;免疫荧光染色法检测细胞内LC3的表达水平;划痕愈合实验和Transwell实验检测虫草素对胆囊癌细胞迁移能力的影响;划痕实验检测Akt抑制剂和ERK1/2抑制剂及Ezrin基因沉默对细胞迁移能力的影响。结果:虫草素可显著抑制胆囊癌细胞的活力和集落形成能力(P0.05)。流式细胞术结果显示,虫草素可诱导胆囊癌细胞凋亡(P0.05)。Western blot结果显示,虫草素处理后Bcl-2表达降低,Bax、细胞色素C(Cyto C)、Fas、Fas L和cleaved caspase-3蛋白水平升高,自噬标识蛋白LC3-II/I比例和beclin 1表达上调(P0.05)。免疫荧光染色结果显示,虫草素处理后SNU-308细胞胞浆中LC3荧光颗粒的数量明显增多。划痕实验和Transwell实验结果显示虫草素可抑制细胞迁移(P0.05)。虫草素明显抑制Akt、ERK1/2和Ezrin蛋白的磷酸化水平(P0.05)。Ezrin基因沉默及Akti-1/2和GDC-0994均可抑制胆囊癌细胞的迁移作用(P0.05)。结论:虫草素通过诱导凋亡和自噬抑制胆囊癌细胞的增殖和迁移,其机制可能与调控ERK1/2,Ezrin和Akt信号通路有关。 相似文献
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子宫颈癌△Np63蛋白表达的临床病理学意义 总被引:2,自引:1,他引:1
目的探讨△Np63蛋白表达在子宫颈癌不同组织学类型中的临床病理学意义。方法43例子宫颈上皮内瘤变(cervi-calintraepithelialneoplasia,CIN)(包括15例CIN1,6例CIN2和22例CIN3),21例角化型和33例大细胞非角化型宫颈鳞状细胞癌(鳞癌)、40例腺癌、4例神经内分泌癌、4例腺鳞癌、2例移行细胞癌、2例玻璃样细胞癌和1例腺瘤样基底细胞癌的标本选自韩国高丽大学安岩附属医院和延边妇幼保健医院病理科,应用免疫组化染色方法检测△Np63蛋白在上述病变组织中的表达情况。结果△Np63蛋白在所有子宫颈鳞癌标本中呈阳性表达,而在所有腺癌则为阴性。随着CIN病变级别的增加,△Np63蛋白表达的分布范围也逐渐增多,而且在不同组织学类型的子宫颈癌中,合并鳞状细胞分化(associatedwithsquamousdifferentiationofuterinecervix)的病变区△Np63表达增强,但在腺性分化和神经内分泌分化的区域△Np63则不表达。结论△Np63蛋白检测对区分子宫颈癌组织学类型的具有重要意义,且对子宫颈腺癌的鉴别诊断是一个非常有用的指标。 相似文献
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目的 探讨乙醇对大鼠血管内皮细胞的促凋亡作用.方法 乙醇灌胃制备大鼠实验模型,选用平铺内皮细胞,苏木素-伊红染色染色、末端脱氧核苷酸转移酶介导的-生物素平移末端标记和分光光度法了解乙醇对大鼠血管内皮细胞的促凋亡作用.结果 正常对照组未见凋亡细胞,而实验各组均可见凋亡细胞,其凋亡率有时间依赖性;实验各组血清中丙二醛含量显著增加和总抗氧化能力显著降低,其值具有时间依赖性.结论 过量乙醇使体内氧化-抗氧化系统严重失衡可导致内皮细胞凋亡. 相似文献
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复方丹参注射液对氧化损伤血管内皮细胞的保护作用 总被引:2,自引:0,他引:2
[目的]探讨复方丹参注射液对氧化损伤血管内皮细胞的保护作用及其机制.[方法]用过氧化氢损伤内皮细胞,MTT法检测其存活率,分光光度法检测细胞培养上清液中的MDA含量,免疫细胞化学染色法检测细胞表面细胞间ICAM-1的表达.[结果]血管内皮细胞受到氧化损伤后,细胞存活率明显降低,MDA含量明显增加,细胞间ICAM-1表达明显增加,而预先加入复方丹参注射液可改善上述结果.[结论]复方丹参注射液通过其抗脂质过氧化作用,对氧化损伤的血管内皮细胞具有保护作用. 相似文献
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子宫颈部肿瘤中DNA甲基化转移酶-1表达和P16/MGMT基因启动子甲基化的临床意义 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 探讨子宫颈部肿瘤中Dnmt-1(DNA甲基化转移酶-1)表达和P16/MGMT基因启动子甲基化的临床意义。方法 用MS—PCR.(Methylation Specific—PCR.)和免疫组织化学染色方法研究Dnmt-1蛋白和P16/MGMT基因启动子甲基化在117例子宫颈部良、恶性病变组织中的表达意义。结果 Dnmt-1在浸润性鳞状上皮癌和腺癌中的表达明显高于慢性宫颈炎和宫颈上皮内瘤变。P16/MGMT基因启动区在慢性宫颈炎中全部表现为非甲基化,而在宫颈上皮内瘤变、浸润性鳞状上皮癌和腺癌中则表现为很高的异常甲基化水平。在子宫颈腺癌中,P16/MGMT基因启动子甲基化率在Dnmt-1表达阳性组明显高于Dnmt-1表达阴性组。结论 Dnmt-1蛋白表达和P16/MGMT基因启动子甲基化在宫颈癌进展过程中的早期就起着非常重要的作用.而且Dnmt-1蛋白表达和P16/MGMT甲基化检测对于恶性肿瘤的诊断有着重要的辅助意义。 相似文献
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目的:探讨黄芩素(BAI)对胃癌MGC-803细胞增殖和迁移的作用及机制。方法:MGC-803细胞用不同浓度BAI处理后,采用MTT法检测细胞的存活率;平板集落形成实验检测细胞的集落形成能力;划痕愈合实验和Transwell小室迁移实验检测细胞的迁移能力;ELISA检测12-羟基二十碳四烯酸(12-HETE)的浓度;Western blot实验检测血小板型12-脂氧合酶(p12-LOX)、血管内皮生长因子(VEGF)、p-ezrin和上皮-间充质转化(EMT)标志物蛋白的表达。结果:BAI可显著抑制MGC-803细胞的增殖、平板集落形成及迁移(P0.05或P0.01),显著下调p12-LOX代谢产物12-HETE的浓度(P0.05或P0.01),并显著下调p12-LOX、VEGF、p-ezrin、vimentin和Snail蛋白的表达水平(P0.05或P0.01),上调E-cadherin蛋白的表达水平(P0.01)。结论:BAI可有效抑制胃癌MGC-803细胞的增殖和迁移,其机制与BAI调控p12-LOX、VEGF、p-ezrin及EMT相关蛋白的表达变化有关。 相似文献
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[目的]探讨P 16INK4A蛋白的过度表达在宫颈癌及其癌前病变早期诊断中的病理学意义[方法]采用免疫组织化学方法检测47例宫颈浸润型鳞状上皮癌、30例宫颈上皮内新生物(CIN)、20例宫颈浸润型腺癌和20例非肿瘤性宫颈病变(慢性宫颈炎)标本中P 16INK4A蛋白的表达[结果]p 16INK4A 蛋白过度表达在100%的宫颈浸润型腺癌,79%的宫颈浸润型鳞状上皮癌和97%的CIN病变标本中出现.[结论]P 16INK4A蛋白的过度表达可作为早期诊断宫颈癌及其癌前病变的指标, 相似文献
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目的:探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)双重抑制剂AZD8055对人胆管癌HuCCT1细胞自噬和凋亡的影响。方法:采用MTT法检测不同浓度的AZD8055对HuCCT1细胞活力的抑制作用;吖啶橙染色检测AZD8055处理胆管癌细胞后,细胞自噬小体形成情况;Western blot法观察细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和cleaved caspase-3以及自噬相关标志蛋白beclin 1、LC3和p62的表达;AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测细胞凋亡。结果:AZD8055显著抑制胆管癌细胞的活力(P0.05)。吖啶橙染色后,AZD8055用药组橙红色颗粒增多。Western blot实验显示,AZD8055处理后,与对照组相比自噬标志蛋白beclin 1表达上调,LC3-II/LC3-I比例上调,p62表达下调;cleaved caspase-3表达降低,促凋亡蛋白Bax表达降低,抑凋亡蛋白Bcl-2表达升高(P0.05)。流式细胞术显示,AZD8055可抑制细胞凋亡。结论:AZD8055可抑制胆管癌细胞的生长,其机制可能与诱导细胞自噬相关。 相似文献
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目的:探讨PI3K/Akt/mTOR双靶点抑制剂NVP-BEZ235诱导多囊肾(polycystic kidney,PCK)大鼠胆管上皮细胞自噬的作用。方法:免疫组化法检测p-mTOR和p-Akt在PCK大鼠胆管上皮细胞中的水平。WST-1比色法检测NVP-BEZ235对胆管细胞活力的抑制作用以及LC3、Beclin 1基因沉默和自噬特异性抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)对细胞活力的影响。蛋白免疫印迹法检测NVP-BEZ235对PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白及自噬标志蛋白LC3和Beclin 1的变化。结果:p-mTOR和p-Akt在PCK大鼠胆管上皮细胞中显著升高,NVP-BEZ235可明显抑制胆管上皮细胞的活力,且呈浓度和时间依赖性改变(P<0.05);NVP-BEZ235明显抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白的水平;并上调自噬标志蛋白LC3 II/LC3 I比值和Beclin 1蛋白的表达水平。LC3、Beclin 1基因沉默和3-MA均可明显减弱NVP-BEZ235对细胞活力的抑制作用(P<0.01)。结论:NVP-BEZ235可抑制PCK大鼠胆管上皮细胞的活力,其机制与自噬密切相关。 相似文献