TBL模式在耳鼻咽喉科教学中应用的初步探讨

TBL模式是以PBL为基础发展起来的有助于学生团队合作精神的模式。应用于耳鼻喉教学实践中,可通过明确学习理念,整合学习方法,提高团队合作精神,进而激发学生的学习热情和责任感。现将对TBL模式及其在耳鼻喉教学中实施的方法步骤等方面进行简单介绍。     

反义microRNA-21慢病毒表达载体的构建及对喉癌细胞的增殖抑制作用

目的：克隆反义微小RNA hsa-miR-21并构建其慢病毒表达载体,观察反义寡核苷酸重组慢病毒（ASO-miR-21）对喉癌细胞增殖的调控作用。方法：针对hsa-miR-21核苷酸序列,设计并合成mir-21反义寡核苷酸,将pGCSIL-GFP Vector经双酶切后连接产生pGCSIL-GFP-miR-21慢病毒表达载体,PCR筛选阳性克隆,测序鉴定。pGC-LV-miR-21、pHelper 1.0和pHelper 2.0质粒共转染细胞293T,包装慢病毒。以293T细胞绿色荧光蛋白（green fluorescent protein,GFP）的表达水平测定病毒滴度。采用MTT法及克隆形成实验检测反义miR-21（ASO-miR-21）重组慢病毒对喉癌细胞增殖能力的影响。结果：成功构建反义hsa-miR-21的慢病毒表达载体,采用ASO-miR-21抑制喉癌细胞内高水平表达miR-21的活性后,可显著抑制喉癌细胞增殖。结论：成功构建反义miR-21的慢病毒表达载体,ASO-miR-21可以明显抑制喉癌细胞增殖。