“师生共创、专思融合”的基础医学课程思政模式探索

推进课程思政是落实立德树人根本任务的战略举措,基础医学课程是医学教育的开端,在医学生成长过程中起着重要的作用。本文分析了开展基础医学课程思政的必要性、重要性,介绍了西南医科大学基础医学院开展的“师生共创、专思融合”基础医学课程思政模式,以期为兄弟院校提供参考。     

miR-221/222在肝癌细胞抵抗内质网应激凋亡中的作用

目的 研究内质网应激对miR-221/222的调控及其在肝癌细胞抵抗内质网应激诱导细胞凋亡中作用.方法 采用miR-221/222抑制物和miR-221/222类似物分别阻断或模拟内源性miR221/222的功能,并利用Western blot和流式细胞技术分析内质网应激条件下miR-221/222对肝癌细胞周期和凋亡的调控作用.结果 内质网应激诱导miR-221/222表达下调,miR-221/222类似物和抑制物分别抑制和促进内质网应激诱导的p27Kip1表达上调,干扰p27Kip1不仅抑制了内质网应激诱导的肝癌细胞G0/G1期阻滞,也促进了内质网应激介导的肝癌细胞凋亡.结论 内质网应激诱导miR-221/222下调能够通过促进p27Kipl表达对内质网应激条件下肝癌细胞周期和凋亡起重要调控作用.

Abstract：

Objective To investigate the role of miR-221/222 in inhibiting endoplasmic reticulum stress-induced human hepatocarcinoma cells apoptosis. Method miR-221/222 mimics and inhibitors were used to mimic or block the function of endogenous miR-221/222 respectively. Western blot and flow cytometry were used to test the effects of miR-221/222 on cell cycle and apoptosis under endoplasmic reticulum stress in human hepatocellular carcinoma cells. Results Endoplasmic reticulum stress resulted in miR-221/222down-regulation in human hepatocellular carcinoma cells. miR-221/222 mimics and inhibitors inhibited and promoted respectively endoplasmic reticulum stress-mediated p27Kip1 induction. Moreover, p27Kip1 suppression not only resulted in reduction in the fraction of G1 phase cells, but also promoted the endoplasmic reticulum stress-mediated apoptosis in human hepatocellular carcinoma cells. Conclusions miR-221/222 were downregulated by endoplasmic reticulum stress in human hepatocellular carcinoma cells, which subsequently protected human hepatocellular carcinoma cells against endoplasmic reticulum stress-induced apoptosis through p27KiP1 regulation.     

免疫层析试纸条检测技术的研究进展

<正>免疫层析试纸条检测技术是20世纪70年代兴起的适用于患者床旁检测或家庭检测的检验技术,相较于酶联免疫吸附试验(ELISA),其具有普适性、快捷性等优点。免疫层析试纸条检测技术具有操作简便、结果快速且稳定、不需要大型设备及成本低廉等     

肝癌细胞蛋白质组在DTT诱导内质网应激条件下的表达

目的:研究内质网应激条件下肝癌细胞SMMC-7721蛋白质组的表达,为人类肝细胞癌的诊治提供新的靶点.方法:培养肝癌细胞株SMMC-7721,随机分为两组,即实验组和对照组.实验组加入二硫苏糖醇(DTT,2.5 mmol/L),对照组加入等量的培养基,裂解细胞,提取全细胞蛋白.双向电泳(2-DE)分离,Image Ma...     

系统方法与现代医学

医学方法乃医学知识增长和医学技术创新的工具。系统方法则是从系统的观点出发，把研究对象当作一个整体，着重从整体和要素之间、要素与要素之间、整体与外界环境之间相互联系、相互作用、相互制约的关系中综合地考察对象。达到全面、精确了解对象，对问题作出最佳处理的目的，     

乙醛刺激大鼠肝星状细胞活化的动力学分析

目的:从动力学角度分析乙醛刺激大鼠肝星状细胞活化的时间变化,以确定大鼠肝星状细胞活化的最佳时间,从而为后续肝纤维化的相关研究提供实验数据。方法:培养大鼠肝星状细胞,同步化处理12h,随机分为乙醛刺激组和对照组。其中乙醛刺激组细胞加入乙醛(终浓度200μmol/L)分别刺激12h、24h和36h,每12h补加一次乙醛;对照组加入等量培养基。采用MTT法测定各组细胞增殖;ELISA法检测Ⅰ型胶原蛋白、纤维黏连素;Western blotting检测α-SMA的表达。结果:加入乙醛后,细胞的增殖活性随时间的延长而增强,24h细胞增殖活性达最高峰;ELISA测定结果显示,乙醛刺激组较对照组有明显上调;Western blotting检测结果,乙醛刺激组明显促进α-SMA表达量上调,且在24h达高峰。结论:乙醛可激活大鼠肝星状细胞且活化的最佳作用时间为24h。     

Akt和胞外信号调节激酶通路间的信号交流对内质网应激条件下肝癌细胞周期的调控

目的 研究内质网应激介导的磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/Akt和丝裂原活化蛋白激酶(MEK)/胞外信号调节激酶(ERK)途径间的信号交流及其对内质网应激条件下肝癌细胞周期的调控作用.方法 采用PI3K抑制剂LY294002、Akt激活型突变载体myr-Akt和MEK抑制剂U0126分别阻断或激活内质网应激介导的Akt和ERK活化,并利用Western blot和流式细胞技术分析内质网应激条件下PI3K/Akt和MEK/ERK途径间的信号交流及其对肝癌细胞株SMMC-7721、Hep3B和HepG2细胞周期的调控作用.数据处理采用Sperman等级相关分析,P＜0.05为差异有统计学意义.结果 阻断PI3K/Akt明显促进内质网应激介导的MEK/ERK活化,而过度激活PI3K/Akt则抑制内质网应激介导的MEK/ERK活化.阻断MEK/ERK对内质网应激介导的PI3K/Akt活化无影响.持续活化的Akt突变载体myr-Akt和MEK抑制剂U0126均明显抑制了内质网应激诱导的压力细胞G0/G1期阻滞.结论 PI3K/Akt和MEK/ERK信号途径在内质网应激肝癌细胞中存在信号交流,该信号交流对细胞周期起重要调控作用.     

新生大鼠皮层神经元的培养与鉴定

目的 建立一种新生大鼠大脑皮层神经元原代培养方法.方法 体外原代培养新生大鼠大脑皮质神经元,应用免疫细胞化学法鉴定神经元.结果 用神经基础培养基(Neurobasal-A)+B27培养的神经元纯度可达70%,生长状态较佳.结论 该培养技术是大鼠皮层神经元体外培养的一种较理想的方法.     

miR-26a mimics转染人肝癌细胞株HepG2的表达蛋白质组分析

目的: 通过分析microRNA-26a(miR-26a)mimics转染对人肝癌细胞株HepG2 表达蛋白质组的影响,以确定miR-26a与肝癌发生发展的相关性。方法: 常规培养人肝癌细胞株HepG2,经miR-26a mimics转染48 h后进行细胞周期分析,并裂解转染72 h的HepG2细胞提取蛋白,双向电泳分离,匹配对比各蛋白斑点的表达量,筛选主要差异表达蛋白进行质谱鉴定。结果: HepG2细胞经miR-26a mimics转染后细胞增殖受到抑制;其蛋白2-DE图谱与对照组比较,差异表达超过2倍的蛋白斑点有11个。其中,有3个蛋白斑点为表达上调,有8个蛋白斑点为表达下调。质谱鉴定为:膜联蛋白A1、过氧化物酶4、增殖细胞核抗原、载脂蛋白A1、细胞色素C 氧化酶5a、细胞周期蛋白E2、磷酸核糖焦磷酸激酶3、周期素依赖性蛋白激酶1和磷脂酰乙醇胺结合蛋白。 结论: miR-26a可能通过影响上述蛋白分子的表达,直接或间接地调控HepG2肝癌细胞的增殖、分化和死亡,以发挥其抗癌作用。     

真核起始因子2α的磷酸化抑制顺铂介导的肝癌细胞凋亡

目的 探讨真核起始因子2α (eIF2α)的磷酸化对顺铂诱导肝癌细胞凋亡的影响. 方法 将肝癌细胞随机分为对照组和实验组,在用突变载体eIF2αS51A转染和小分子抑制剂salubrinal 改变实验组细胞在顺铂作用条件下eIF2α磷酸化的基础上,用流式细胞和Western blot分别检测细胞凋亡的百分率和细胞凋亡的分子标志物.多组间比较采用方差分析,两组间比较采用t检验. 结果 顺铂诱导肝癌细胞eIF2 α发生51位丝氨酸磷酸化.在突变载体转染条件下,顺铂(10μg/m1)诱导对照组和实验组SMMC-7721细胞在24 h凋亡的平均百分率分别为21.7％±1.5％和50.7％±2.1％(t=19.454,P＜0.05);顺铂诱导对照组和实验组HepG2细胞在24h凋亡的百分率分别为21.0％±1.0％和57.3％±2.1％ (t=27.250,P＜0.05).在抑制剂作用条件下,顺铂(15 μ g/ml)诱导对照组和实验组SMMC-7721细胞在36 h凋亡的百分率分别为50.3％±2.5％和16.3％±2.1％ (t=18.031,P＜0.05);顺铂诱导对照组和实验组HepG2细胞在36 h凋亡的百分率分别为42.0％±2.6％和12.0％±2.0％ (t=15.667,P＜0.05).同时,Western blot检测显示eIF2α的磷酸化抑制顺铂诱导的凋亡蛋白抗多聚ADP-核糖聚合酶的剪切. 结论 eIF2α的磷酸化在肝癌细胞抵抗顺铂介导的凋亡中起重要作用.