安宫牛黄丸对大鼠自发性脑出血模型血肿周围脑组织氨基酸表达及超微结构的影响研究

目的:自发性脑内出血发病率高,现代医学不论是外科治疗还是内科治疗效果均不理想.由于血肿形成后的原发性组织损害已无法恢复,继发性的脑损害预防才是治疗的关键.近期对继发性脑损害的研究重点集中在:血肿周围脑组织血流及代谢改变及其调控因素,继发性脑水肿的发生机制,早期血肿扩大的原理和预防,铁离子超载理论的临床证实及治疗,兴奋性氨基酸理论等方面,并取得了很大的进展.但关于脑保护的实验室工作和临床实践不多,应用于临床的成熟技术、方法更少.安宫牛黄丸主治"瘟毒热盛,神昏谵语,狂躁不安,痰浊内闭痉厥抽动,不省人事",所以具有清热解毒、豁痰开窍的功效,主治热病,邪入心包、高热惊厥、神昏谵语;安宫牛黄丸针对病人高烧、神志昏迷、烦躁而乱语及惊厥抽搐等症,属中医临床治疗急症之要药.广泛应用于临床治疗脑血管疾病,但机制不详,本文对大鼠脑出血模型氨基酸变化和超微结构的改变加以研究.方法:成年雄性SD大鼠75只,正常对照组(SD)5只,假手术组(NO)10只,模型组(N)20只,全方组 (A)20只,简方组(a)20只;除正常对照组外,试验大鼠均以北京同仁堂制药厂提供的安宫牛黄丸粉剂预处理;安宫牛黄丸分全方和简方两种,简方缺少朱砂和雄黄;灌胃一周,每日一次,最后一次灌胃后两小时造模;造模采用尾动脉切开取血法,用微量注射器在立体定向仪下缓慢(5min)注入右侧内囊(中线旁3mm,前囟前0.5mm,深5mm) 100μl自体非抗凝血,留针10min,制成ICH大鼠模型.造模成功后4h、24h处死取脑,采用不同方法检测血肿边缘脑组织损害性改变.①氨基酸测定:冰盒上操作,取血肿周边1mm脑组织100mg(必须＞80mg,无血,位置一致,快速),电子天平精确称重,分别放入离心管中,标记后迅速置液氮罐中快速冷冻,后置-70℃冰箱保存,成批检测.采用高效液相色谱分析法(high performance liquid chromatograph,HPLC)检测不同实验组动物血肿周边脑组织兴奋性氨基酸( excit atoryamino acids, EAA) 谷氨酸( glutamic acid, Glu) 和天冬氨酸( aspartic acid, Asp)以及抑制性氨基酸甘氨酸(glycine acid, Gly)、λ-氨基丁酸(λ-aminobutyric acid, GABA)、谷氨酰胺(Glutamine,Gln)的变化规律.②电镜观察:取血肿周围脑组织,切分为1mm3置于盛有4%多聚甲醛-2.5%戊二醛固定液中固定2h;PBS液冲洗3次,每次10min,环氧树脂包埋,超薄切片铅铀染色.切片片厚50nm,组织经锇化,梯度酒精脱水,Epon812包埋,LKB超薄切片,经醋酸铀-枸橼酸铅双重染色,EM208s型透射电镜观察照相.观察神经细胞及细胞器形态、血管形态、髓鞘改变等超微结构.按相同放大倍数摄片.结果:氨基酸变化:①与对照组相比,模型组4h及24h标本内兴奋性氨基酸Glu、Asp以及抑制性氨基酸GABA增高有显著性意义,且差异十分显著;抑制性氨基酸Gln在假手术组增高有显著性意义(P＜0.01);Gly变化不明显.②在4h标本中,与模型组相比,全方祖内兴奋性氨基酸Glu、Asp下降有显著性意义(P＜0.01);GABA、Gly变化不明显.简方组兴奋性氨基酸及抑制性氨基酸均变化不显著.③在24h标本中,与模型组相比,全方祖内兴奋性氨基酸Glu、Asp下降有显著性意义,抑制性氨基酸Gln增高有显著性意义(P＜0.01);GABA、Gly变化不明显.简方组仅兴奋性氨基酸Glu下降有显著性意义(P＜0.01).超微结构变化:在双盲状态下,分组观察,半薄切片观察组织病理形态,超薄切片观察细胞器、血脑屏障、神经纤维丝的变化.①模型组造模后4h即已出现较假手术组明显的神经细胞、血管损伤性变化.②假手术组、模型组、简方组造模后4h、24h均出现严重血管损伤,致管腔变形狭窄.③全方组在造模后4h、24h均表现为神经元、胶质细胞核膜完整清晰,无水肿,细胞器结构正常;血管周边轻度水肿,可见部分内皮细胞核增大.④全组标本神经纤维未见明显损伤.结论:①安宫牛黄丸全方可能通过影响兴奋性氨基酸的表达实现脑组织继发性损害的保护作用.②安宫牛黄丸全方干预的大鼠自发性脑出血后脑损害轻微.③安宫牛黄丸简方效果不明显.     

自发性脑内出血脑组织超微结构变化及中医药影响进展

自发性脑内出血是指脑实质的非外伤性出血,起病凶险,预后差,有着较高的致残率和病死率。研究证实,最重要的病理改变是脑出血后形成血肿,压迫周围区域脑组织,导致脑血流量（CBF）明显降低。脑水肿早期以血管源性水肿为主,中期以后以细胞毒性水肿为主,脑出血后血肿局部血流量的下降以及血脑屏障破坏是引起脑水肿的重要因素之一。同时,大量的研究涉及脑损害超微结构的变化。本文对自发性脑内出血继发性脑损害中超微结构的变化以及干预因素的进展进行综述,以期对临床治疗有所帮助。     

脑室-腹腔分流术后感染13例分析

承德市中心医院1996-2008年采用脑室-腹腔分流术治疗脑积水124例,其中因各部位感染导致分流失败13例,现对分流术后感染的原因及防治报告如下.     

神经胶质瘤E-cd、MMP-2和CD44v6的表达及临床意义

目的 探讨钙粘素(E-cadherin,E-cd)、基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinases-2,MMP-2)和粘附分子(CD44v6)在脑神经胶质瘤中的表达及临床意义。方法 采用免疫组织化学方法对50例神经胶质瘤患者和9例对照者脑组织中E-cd、MMP-2和CD44v6蛋白表达进行检测。结果 (1)对照组脑组织E-cd的阳性表达率为100％;神经胶质瘤Ⅰ～Ⅱ级和Ⅲ～Ⅳ级组阳性表达率分别为40％(10/25)和24％(6/25),两组差异无显著性意义(P>0.05);对照组与神经胶质瘤组之间差异有显著性意义(P<0.05)。(2)对照组MMP-2阳性表达率为11％;在经胶质瘤Ⅰ～Ⅱ级组为32％(8/25),Ⅲ～Ⅳ级组为64％(16/25),两组比较差异有显著性意义(P<0.05)。对照组与神经胶质瘤组相比,MMP-2的表达差异亦有显著性意义(P<0.05)。(3)CD44v6在对照组及神经胶质瘤组均无表达。结论 E-cd和MMP-2在神经胶质瘤的牛物学行为中起重要作用,且可能与其侵袭性有关,而CD44v6则与神经胶质瘤的生物学行为无关。     

PTEN 和钙粘素在胶质瘤中的表达及临床意义

目的探讨PTEN和钙粘素(E-cadherin, E-cd)在胶质瘤中的表达及意义.方法采用免疫组化方法检测50例胶质瘤和9例正常脑组织中的PTEN和E-cd蛋白的表达.结果 PTEN 和E-cd 在正常脑组织中的阳性表达率均为100%;PTEN 在Ⅰ～Ⅱ级和Ⅲ～Ⅳ级胶质瘤中阳性表达率分别为80%、52%,组织学分级之间有显著差异(P＜0.05),与对照组之间有显著差异(P＜0.05);E-cd 在Ⅰ～Ⅱ级和Ⅲ～Ⅳ级胶质瘤中阳性表达率分别为40%、24%,组织学分级之间无显著差异(P＞0.05),与对照组之间有显著差异(P＜0.05);PTEN 和E-cd表达在胶质瘤中呈正相关(P＜0.05).结论 PTEN 和E-cd 均在与胶质瘤的发生发展中起重要作用,且有可能与胶质瘤的侵袭性行为有关.     

安宫牛黄丸对脑出血大鼠脑组织超微结构的影响

目的：研究安宫牛黄丸对大鼠脑出血模型血肿周边脑组织超微结构的影响。方法：实验大鼠分为正常对照组、假手术组、模型组、全方干预组、简方干预组，采用立体定位技术制作脑出血模型，分别于造模后4h、24h取标本，透射电镜观察血肿周边组织超微结构。结果：模型组造模后4h即已出现明显的神经细胞、血管损伤性变化；假手术组、模型组、简方组造模后4h、24h均出现严重血管损伤；安宫牛黄丸全方干预组在造模后4h、24h均表现为受损细胞、血管少见；全组标本神经纤维出现明显损伤少见。结论：安宫牛黄丸全方干预的大鼠自发性脑出血后脑损害轻微，安宫牛黄丸简方效果不明显。     

脑损害与脑内氨基酸递质关系研究概况

本文就脑损害与脑内氨基酸递质的相关性进行文献综述如下:1兴奋性氨基酸EAAs包括内源性和外源性两种;谷氨酸(G lu)和天冬氨酸(Asp)是哺乳动物中枢神经系统(CNS)中最重要的两种内源性EAAs,其突触释放约占中枢突触总数的40%,尤其是G lu,它以脑内含量最高,也是脑组织中含量最高的氨基酸,是Asp含量的3~4倍[1]。正常情况下,脑细胞内血清谷氨酸的浓度约为10mmol/L,细胞外为0.6μmol/L,由于有血脑屏障存在,血液中的血清谷氨酸不能通过血脑屏障而引起脑组织的损伤[2]。神经生理学研究表明,在正常生理条件下,G lu等兴奋性氨基酸在学习记忆机制…     

幕上自发性脑内出血62例外科治疗预后影响因素分析

目的:探讨幕上自发性脑内出血不同外科治疗措施预后的主要影响因素。方法:本组共计62例,男37例,女25例。所有患者均经头颅CT扫描检查确诊为基底节区出血,专科医生根据患者住院时情况及经验决定外科治疗方案,分别采用传统开颅内血肿清除外减压手术,显微微创手术和钻孔引流尿激酶溶解术。治疗结果以患者出院时情况进行评判,标准采用ADL日常能力分级,Ⅰ级~Ⅱ级为预后良好,Ⅳ级~Ⅴ级为预后不良,住院期间死亡患者排除在本次统计之外。使用SPSS forW in-dows 11.5统计软件包,应用Logistic回归分析统计学方法对结果进行处理,P<0.05为有统计学意义。结果:经统计学处理,年龄(B=-0.187,p=0.001),意识水平(B=0.322,p=0.004),出血量(B=-0.041,p=0.000),脑室铸型(B=2.185,p=0.037)为影响该组预后的主要因素。结论:年龄、意识水平、出血量、脑室铸型是影响幕上自发性脑内出血预后的重要因素。     

安宫牛黄丸治疗出血性脑卒中历史和现状

脑血管病是现代严重危害人类生命健康的疾病。目前,现代医学不论是外科治疗还是内科治疗效果均不理想。中医和西医是中国医学的一体两翼,互为补充,各有优势。本文仅就安宫牛黄丸治疗自发性脑内出血的实践进行文献总结,以求对这一方面的研究有所裨益。     

胶质瘤中抑癌基因PTEN及侵袭相关因子E-cd、MMP2、CD44v6研究进展

胶质瘤的发生和发展是多个癌基因过度表达和抑癌基因失活的结果.其中涉及到重要的抑癌基因有P53、P16、PTEN、Rb、NF2等.癌基因有生长因子及其受体基因尤其是EGFR、PDGF、BFGF、VEGF、TGFαβ、及MDM2、CDK4等[1].胶质瘤的侵袭是其重要的生物学行为,是一个连续的多步骤的过程,多种因子参与了这一过程,如CD44、MMP、E-cd,等.本文仅就PTEN和几个肿瘤侵袭相关因子与胶质瘤质之间的关系研究进展做一综述.