MnTBAP对大鼠局灶性脑缺血损伤的保护作用

目的探讨锰卟啉(MnTBAP)对大鼠局灶性脑缺血损伤的保护作用及其可能机制。方法采用线拴法建立大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,分为假手术组、缺血组、MnTBAP治疗组。缺血组和治疗组术后立即腹腔注射生理盐水和MnTBAP(10mg/kg体重),缺血24h后处死,用原位末端标记技术(TUNEL)和免疫组织化学方法对缺血侧脑组织神经细胞凋亡和凋亡调控蛋白Caspase-3表达进行检测。结果与假手术组相比,缺血组脑组织神经细胞凋亡及Caspase-3蛋白表达水平明显增加(P<0.01);与缺血组相比,MnTBAP治疗组神经细胞凋亡及Caspase-3蛋白表达水平显著减少。结论 MnTBAP能下调Caspase-3蛋白表达,抑制脑组织神经细胞凋亡,对缺血性脑损伤具有保护作用。     

甲基化DNA对突变的alkA基因转录的影响

目的：认识在适应应答反应中ａｌｋＡ基因表达活性与ｍＤＮＡ的关系，研究ｍＤＮＡ对突变ａｌｋＡ基因体外转录的影响。方法：以突变的ａｌｋＡ基因启动子为模板，观察ｍＤＮＡ对其体外转录产生ｍＲＮＡ量的影响。结果：ａｌｋＡ基因启动子转录体系中加入ｍＤＮＡ，产生的ａｌｋＡｍＲＮＡ是未加ｍＤＮＡ的对照组的１～８倍；ｌａｃ基因启动子转录体系中加入ｍＤＮＡ产生的ｌａｃｍＲＮＡ与对照组基本相同。结论：ｍＤＮＡ对ｌａｃ基因启动子转录无明显影响，而对突变型和野生型ａｌｋＡ基因启动子转录有明显促进作用。这种调节作用可能发生在基因启动子区     

二甲基亚砜对CAOV3细胞端粒酶活性的可逆性抑制作用

目的探讨卵巢癌细胞CAOV3经二甲基亚砜（Dimethyl sulfoxide，DMSO）作用后及停止用药后端粒酶活性变化与细胞周期进展之间的关系。方法台盼蓝拒染法计数活细胞，流式细胞术观察细胞周期分布，端粒重复序列扩增法（TRAP）、聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染法检测端粒酶活性。结果生长曲线显示DMSO对CAOV3细胞具有生长抑制作用，且具有浓度和时间依赖性。经1．4％DMSO作用96h后，CAOV3细胞主要受阻于G0／G1期，其端粒酶活性完全被抑制。去除药物后，细胞逐渐由G0／G1期向S期过渡，其端粒酶活性亦逐渐恢复，并于去除药物24h时，S期细胞百分率与端粒酶活性均明显高于用药前水平。结论DMSO对CAOV3细胞具有可逆性阻滞细胞周期进展，并下调其端粒酶活性的作用。CAOV3细胞端粒酶活性表达可能存在细胞周期依赖性调节。     

苹果酸、γ-氨基丁酸对Hela细胞端粒酶活性的影响

目的:观察苹果酸、γ-氨基丁酸(GABA)对Hela细胞端粒酶活性的影响。方法:苹果酸、γ-氨基丁酸作用于Hela细胞不同时间后,用TRAP-银染半定量法检测端粒酶活性的变化。结果:1.将不同浓度的苹果酸作用于Hela细胞48 h后,端粒酶活性降低,以10μmol/L浓度时作用活性最低。10μmol/L苹果酸作用于Hela细胞不同时间,端粒酶活性于作用8 h时就有所下降,当作用48 h时与对照组相比下降最多达到11%。2.将不同浓度的GABA作用于Hela细胞48 h后,端粒酶活性降低,以1 mmol/L浓度时作用活性最低。1 mmol/L GABA作用于Hela细胞不同时间,结果显示端粒酶活性于作用8 h时就有所下降,当作用48 h时与对照组相比几乎下降最多达到13%。结论:苹果酸,GABA对Hela细胞端粒酶活性起下调作用。     

生物化学学习辅导（七）

生物化学学习辅导（七）中国医科大学生物化学教研室（１１０００１）于成国第八章核酸与蛋白质的生物合成这一章包括四个方面的内容。第一为核酸化学，第二为核酸代谢，第三为核酸与蛋白质生物合成和第四为核酸与医学的关系。本章重点核酸含磷较为恒定，一般含磷为９％～...     

基于校级实验中心模式转化的创新实验教学基地建设与学生创新能力培养实践

构建适应本科生创新人才培养的实验教学模式和支撑体系是医学实验教学改革亟待解决的课题。我校在创新实验教学基地建设中，探讨了创新能力培养及创新实验教学的技术定位，对如何依托校级实验中心资源优势、转变工作模式、合理配置实验技术、设置课程体系、协调实验运行机制等方面初步进行了一系列实践探索。     

甲磺酸甲酯对CAOV3细胞端粒酶活性的影响

目的：探讨卵巢癌细胞CAOV3经烷化剂甲磺酸甲酯(MMS)作用后端粒酶活性变化与生长状态之间的关系。方法：台盼蓝拒染法计数活细胞，噻唑蓝(MTT)法测定药物作用浓度，流式细胞术观察细胞凋亡，端粒重复扩增法(TRAP)、聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染法检测端粒酶活性。结果：用药组与未用药组活细胞百分率无显著差异。MMS主要使CAOV3细胞受阻予S期，未见凋亡峰。用药组与对照组相出较端粒酶活性增强。结论：MMS对OWV3细胞端粒略活性有上调作用。CA0V3细胞对MMS的抗凋亡效应可能与端粒酶活性上调有关。     

E.coli中alKA基因突变启动子及体外转录的研究

用人工突变的方法获得aIKA基因启动子区的突变体,以该突变的启动子DNA为模板进行体外转录试验及β-半乳糖苷酶活性测定。观察到测得的β-半乳糖苷酶活性与体外转录产生的alKA mRNA相平行。