失血性休克鼠肺组织Toll样受体基因的表达

目的探讨单纯性失血性休克（无复苏）对肺组织中Toll样受体（TLR）mRNA表达的影响及意义。方法C57BL／6小鼠45只。随机分为失血组、脂多糖（LPS）组（阳性对照组。尾静脉注射LPS5mg／kg）、假手术组（阴性对照组）。每组15只。心脏穿刺复制失血性休克模型，在不同时间点取出肺组织。提取总RNA，通过逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）半定量方法检测肺组织TLR2 mRNA和TLR4 mRNA的表达水平。结果在失血性休克和LPS刺激后肺出现明显的中性粒细胞浸润、红细胞渗出。正常肺组织中有TLR2 mRNA、TLR4 mRNA表达；住失血性休克和LPS刺激后0、1、2、4和6h肺组织TLR2 mRNA、TLR4 mRNA表达均逐渐增加；而假手术组未发生明显改变。结论失血性休克后肺组织TLR2 mRNA、TLR4 mRNA表达增加与急性肺损伤（ALI）的发生有密切关系。除增强了机体非特异性免疫能力外，同时增加了宿主对随后各种刺激的易感性。过度表达的TLR2、TLR4可能造成组织、器官结构和功能损害。     

烧伤延迟复苏诱导心肌细胞凋亡

目的 探讨烧伤延迟复苏能否引起心肌细胞凋亡及其发生机制。方法 30％Ⅲ度烧伤6h后进行复苏，再灌注2、10、18h后抽提心肌组织中基因组DNA，用PCR试剂盒检测凋亡，PCR产物行琼脂糖凝胶电泳，观察基因组DNA是否出现特征性的凋亡图像并观察心肌组织中一氧化氮(NO)和脂肪酸含量的变化。结果烧伤延迟复苏后心肌组织基因组DNA出现标志凋亡的“梯形”图像，随延迟复苏时间的延长大鼠心肌组织凋亡的发生率增加。NO在延迟复苏后2h显降低，延迟复苏后不饱和脂肪酸含量显低于烧伤后立即复苏大鼠，细胞膜僵硬度显增加。结论烧伤后延迟复苏导致心肌组织细胞凋亡，其发生与NO含量减少、氧自由基产生增加有关。     

体液内毒素及深部真菌快速定量检测方法

目的:应用MB-80微生物快速动态检测系统,建立快速体液内毒素及深部真菌定量检测方法. 方法:在无菌条件下,留取20例正常人、10例严重腹腔革兰阴性菌感染及5例深部真菌感染病人的血浆,经前处理后,用MB-80系统动态浊度定量法,1 h完成检测.内毒素检测采用鲎试验动态浊度法,通过检测真菌细胞壁上1-3-β-D-葡聚糖的含量来反映深部真菌的水平.经计算机光电检测动态浊度变化,计算出内毒素及真菌含量. 结果:本法操作快速、简便,前处理过程标准化,结果重复性好,两种物质的检测可以同时在一台仪器上进行.正常人血浆内毒素和真菌水平在(2.03±2.32)ng/L和(2.46±2.15)ng/L,符合试剂盒提供的正常值范围(均<10 ng/L).严重感染病人不同时相点血浆内毒素含量范围在50～3 958 ng/L.深部真菌感染病人血浆真菌含量范围在20～ 2 381 ng/L. 结论:应用MB-80微生物快速动态检测系统,可以定量检测体液内毒素及真菌实际含量,作为临床上早期难以确诊的内毒素血症和深部真菌感染的辅助性诊断手段.     

硫苷脂对烧伤延迟复苏大鼠脏器血管通透性的影响

目的 研究硫苷脂对烧伤延迟复苏大鼠远隔脏器损伤的保护作用。方法 SD大鼠给予30%Ⅲ度烧伤延迟复苏,伤后随机分为对照组和硫苷脂治疗组。在烧伤后9h,测定两组动物肺、心、肝,肾的血管通透性,含水量,髓过氧化物酶（MPO）活性。结果 硫苷脂治疗组在伤后9h,肺、心、肝、肾的血管通透性明显降低,MPO活性明显减少,结论 硫苷脂对烧伤延迟复苏大鼠远隔脏器血管通透性的增高有保护作用。硫苷脂对中性粒细胞聚集的抑制是其重要机理之一。     

The relationship between tumor necrosis factor-a gene polymorphisms and acute severe pancreatitis

Objective To investigate the relationship between the presence of the TNF2 allele and plasma concentrations of tumor necrosis factor-α (TNFα) and soluble TNF receptor (sTNF-R) with the development of acute severe pancreatitis (ASP) and severe sepsis.Methods Genomic DNA was prepared from peripheral blood leukocytes. The TNF1 and TNF2 biallelic polymorphisms were identified by analyzing Ncol-digested DNA fragments obtained from PCR products. Plasma levels of TNFa and sTNF-R were measured by EASIA.Results The overall TNF2 allele frequency in ASP patients was comparable to that found in healthy volunteers (29. 2% vs. 29. 3% , P>0. 05). Severe sepsis occurred in 26 of 72 patients. Patients with severe sepsis showed a significantly higher prevalence of TNF2 than those without (46. 2% vs. 19.6%, P<0. 05). Plasma TNFα, sTNF-R Ⅰ, and sTNF-R Ⅱ levels were (36± 31) pg/ml, (5. 4± 3.5) ng/ml, and (11.2±7.8) ng/ml, respectively, in patients with severe sepsis, and (31 ±25) pg/ml, (4.6±3.8) ng/ml, and (8.8      

烧伤大鼠延迟性复苏对心肌组织Na+,K+-ATPase、Ca2+-ATPase活性的影响

目的:研究烧伤休克延迟复苏对心肌组织Na+,K+-ATPase和Ca2+-ATPase活性及含水量的影响.方法:雄性SD大鼠造成30%体表面积的Ⅲ度烧伤,分为烧伤不复苏(B)组、早期复苏(BE)组和延迟复苏(BD)组,伤后8 h取左心室肌组织,测定含水量,并匀浆后用比色法测定Na+,K+-ATPase和Ca2+-ATPase活性.结果:B组心肌组织Na+,K+ATPase和Ca2+-ATPase活性均明显低于正常对照(C)组(P＜0.01);BD组2种酶活性均非常显著低于BE组(P＜0.01),并明显低于B组(P＜0.05);B组心肌组织含水量非常明显低于BE组和BD组,BD组比BE组有增高趋势,但无显著差异.结论:烧伤休克延迟复苏严重损害心肌组织Na+,K+-ATPase和Ca2+-ATPase活性,引起心肌的缺血再灌注损伤.     

钙拮抗药及烧伤血浆对大鼠PBMC内NF-кB活化和炎症介质产生的影响

目的：探讨外周血单个核细胞(PBMC)内上游信号分子及核因子-кB(NF-кB）在烧伤后炎症级联反应中的作用。方法：体外检测在烧伤血浆作用下的PBMC内游离Ca^2 及NF-кB活化的变化，观察钙通道阻断药对NF-кB活化及IL-6、NO表达水平的调控作用。结果：不同时相点的烧伤血浆可使体外PBMC内Ca^2 明显增加，培养的PBMC核内NF-кB的积累明显增加，培养上清中NO和IL-6高表达。应用尼莫通(Nimodipine)和丹曲林(Dan-trium)对NF-кB的活化有调节作用，对IL-6和NO亦有下调作用。结论：烧伤血浆可使PBMC内信号分子浓度明显增高，NF-кB过度活化，并易位进入细胞核内，NF-кB介导的促炎性细胞因子和NO过度表达。两种钙通道阻断药有调控细胞内信号转导的作用，对烧伤后全身炎症反应综合征(SIRS)可能有防治作用。     

胸腺肽α1对严重外科感染病人免疫功能和细胞因子的影响

目的 观察胸腺肽α1（Tα1）对严重外科感染病人炎症因子及免疫功能的影响，探讨Tα1在外科感染治疗中的作用。方法 将2005年2月至2006年5月南京军区南京总医院ICU收治的45例严重外科感染病人，随机分为用药组（24例）和对照组（21例），在控制感染的基础上用药组加用胸腺肽α1，并观察细胞因子水平的变化以及T细胞亚群CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋及NK细胞百分率的变化。结果 两组病人肿瘤坏死因子（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）水平均呈升高趋势，但对照组趋势更加明显，而白介素-10（IL-10）在用药组病人中呈升高趋势，治疗第4天用药组的CD3^＋、CD4^＋较用药前升高，明显高于对照组。结论 Tα1可以调节严重感染病人肿瘤坏死因子（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）、白细胞介素10（IL-10）等细胞因子的水平，减轻炎症反应，改善病人的免疫功能。     

钙拮抗药及烧伤血浆对大鼠PBMC内NF-κB活化和炎症介质产生的影响

目的 :探讨外周血单个核细胞 (PBMC)内上游信号分子及核因子 κB(NF κB)在烧伤后炎症级联反应中的作用。　方法 :体外检测在烧伤血浆作用下的PBMC内游离Ca2 及NF κB活化的变化 ,观察钙通道阻断药对NF κB活化及IL 6、NO表达水平的调控作用。　结果 :不同时相点的烧伤血浆可使体外PBMC内Ca2 明显增加 ,培养的PBMC核内NF κB的积聚明显增加 ,培养上清中NO和IL 6高表达。应用尼莫通 (Nimodipine)和丹曲林 (Dantrium)对NF κB的活化有调节作用 ,对IL 6和NO亦有下调作用。　结论 :烧伤血浆可使PBMC内信号分子浓度明显增高 ,NF κB过度活化 ,并易位进入细胞核内 ,NF κB介导的促炎性细胞因子和NO过度表达。两种钙通道阻断药有调控细胞内信号转导的作用 ,对烧伤后全身炎症反应综合征 (SIRS)可能有防治作用     

肠内营养对克罗恩病血清二胺氧化酶的影响及机制研究

目的:动态观察肠内营养对活动期克罗恩病(CD)病人血清二胺氧化酶(DAO)活性的影响及其机制研究.方法:38例活动期克罗恩病病人,单独给予全肠内营养支持,观察肠内营养使用后第2、4周血清DAO水平的变化,并同步观察血清清蛋白(ALB)、C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和IL-6的变化.以53例健康志愿者的血清DAO水平为正常对照.结果:在使用肠内营养前,CD病人血清DAO活性显著低于健康志愿者;使用后第4周,血清DAO水平显著升高,ALB水平呈升高趋势,而CRP、TNF-α、IL-1β、IL-6水平显著下降,并与血清DAO水平的变化呈负相关.结论:肠内营养能够提高CD病人血清DAO活性,并改善病人的营养状况.