细菌感染大鼠下丘脑及垂体ACTH样和β－内啡肽样免疫阳性细胞的相关变化

取正常Ｗｉｓｔａｒ大鼠，雌雄兼用．老龄鼠（２０个月）９只，壮龄鼠（８个月）１０只．通过腹膜腔注入致病量福氏痢疾杆菌Ｆ１ｂ（活菌４９２万个／克体重），２４ｈ后，处死取材；常规脱水，石蜡切片；ＡＢＣ法染色，ＤＡＢ显色．光镜下观察下丘脑及垂体促肾上腺皮质激素样免疫反应（ＡＣＴＨ－ｉｒ）和β－内啡肽样免疫反应（β－ＥＮＤ－ｉｒ）阳性细胞的形态、分布和计数．图像分析仪测其灰度值．结果：多数鼠第三脑室室周层出现许多β－ＥＮＤ－ｉｒ强阳性细胞．ＡＣＴＨ－ｉｒ阳性细胞数量，感染老龄鼠显著低于感染壮龄鼠，β－ＥＮＤ－ｒ阳性细胞数量，感染老、壮龄鼠间无差异．感染老龄鼠弓状核和垂体前叶ＡＣＴＨ－ｉｒ阳性细胞灰度显著高于壮龄鼠，垂体前叶β－ＥＮＤ－ｉｒ阳性细胞灰度则显著低于壮龄鼠．与正常组比较，感染老龄鼠弓状核和垂体前叶的ＡＣＴＨ－ｉｒ阳细胞灰度显著上升，壮龄鼠则下降；老龄鼠弓状核β－ＥＮＤ－ｉｒ阳性细胞灰度上升，垂体则下降，壮龄鼠全上升．提示：ＡＣＴＨ和β－ＥＮＤ与抗感染密切相关．     

人芽囊原虫感染大鼠模型的建立

目的:建立人芽囊原虫感染的大鼠实验动物模型,为致病性研究奠定基础。方法:将32只雄性SPF级SD大鼠随机分成对照组和低剂量、中剂量、高剂量实验组,每组8只。低、中、高剂量实验组按102个/mL、103个/mL、104个/mL经灌胃饲喂包囊液1mL,对照组则饲喂等体积的灭菌生理盐水。饲喂第2天开始检查粪便,隔天一次。2周后解剖全部大鼠,并分别制作盲肠与结肠病理切片,HE染色观察盲肠与结肠组织的病理学变化并评分。结果:高、中、低剂量组粪检均查见芽囊原虫滋养体或包囊,盲肠和结肠组织也出现芽囊原虫侵入、粘膜脱落、炎症细胞浸润等病理学改变。实验组与对照组大鼠的病理评分比较均有显著性差异(P<0.05),但各剂量组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:经口饲喂小剂量包囊,即可成功建立芽囊原虫感染大鼠动物模型。     

人角膜缘干细胞初步建系研究

目的：探讨建立人角膜缘干细胞系，为组织工程研究提供足够的细胞储备。方法：取健康人角膜缘深部色素区组织块，经消化后，在含有RPMI—1640、20％胎牛血清的培养瓶和以羊膜细胞外基质为培养载体的培养皿中分别进行体外培养，并对连续传代的细胞行光镜、扫描电镜观察，比较细胞形态的变化并进行细胞计数与冻存处理。结果：人角膜缘干细胞具有人上皮细胞培养的特性，在培养液中传33代后，细胞仍然保持旺盛的分化、增殖能力，并且更适宜在羊膜细胞外基质上生长；目前我们冻存细胞的复苏率为82．2％。结论：将人角膜缘干细胞经体外培养33代并逐代冻存后初步建立了人角膜缘干细胞系。     

3种培养基体外培养人芽囊原虫的效果观察

目的　观察人芽囊原虫在 3种培养基中的生长繁殖情况 ,以探讨最佳的培养方法。　方法　从大学生粪便中分离人芽囊原虫 ,转种至 3种不同培养基 ,定时观察人芽囊原虫的生长繁殖情况 ,根据原虫密度评价培养效果。　结果培养 96h后 ,Locke’s鸡蛋血清 (LES)双相培养基中的人芽囊原虫密度最高 ,改良Jones单相液体培养基次之 ,Locke’s琼脂血清 (LAS)双相培养基原虫密度最低 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;观察 3种培养基中的原虫密度高峰持续时间分别为 3 60h、96h和 72h ,最长存活时间分别为 5 5 2h、3 3 6h和 168h。　结论　Locke’s鸡蛋血清双相培养基较适用于人芽囊原虫体外增殖培养。     

免疫大鼠下丘脑弓状核ACTH样和β－内啡肽样免疫阳性细胞相关变化

取正常Ｗｉｓｔａｒ大鼠，用福氏痢疾杆菌及福氏完全佐剂免疫动物，免疫成熟后处死取材。石腊切片，ＡＢＣ法染色，ＤＡＢ显色。光镜下观察下丘脑弓状核促肾上腺皮质激素样免疫反应和β－内啡肽样免疫反应阳性细胞的形态、分布和计数。图像分析仪测其灰度值。结果提示免疫老龄鼠神经内分泌与免疫系统间的调节功能紊乱，可能是引起老龄鼠免疫力低下的原因之一。     

一种新型蚯蚓纤溶酶组分的部分性质研究

目的获得一种高效的溶栓药物。方法从赤子爱胜蚓 (Eiseniafoelida)中共提取 6种纤溶酶组分 ,分别命名为F1～F6。取F1用Lowry法测定蛋白质浓度 ,SDS PAGE鉴定纯度及表观相对分子质量 (Mr) ,纤维蛋白平板法测定其纤溶活性 ,测定其水解BAEE(Nα 苯甲酰 L 精氨酸乙酯盐酸盐 )、血浆纤溶酶特异性底物ChromozymPL(苄氧羰酰甘氨酰脯氨酰精氨酰对硝基苯胺盐酸盐 )及组织型纤溶酶原激活剂Chromozymt PA(N 甲磺酰苯丙酰甘氨酰精氨酰对硝基苯胺盐酸盐 )的活性 ,并进行N端氨基酸序列测定。结果F1纯度为 10 0 % ,表观Mr 为 2 85 0 0 ,总纤溶活性为 6 5 .5 1× 10 3 mm2 /mg ,水解BAEE的米氏常数 (Km)为 2 .80 87× 10 -2 mol/L。对chromozymPL及chromozymt PA的亲和力较低。F1的N端氨基酸序列为IIGGSNASPGEFPWQ ,且对天然凝血块有较强的溶解作用。结论F1为纯度很高的单一组分 ,纤溶活性较高。     

LPS对CCI大鼠触诱发痛和热痛敏影响的实验研究

目的:研究免疫激动剂脂多糖(LPS)对大鼠神经性慢性病理性疼痛的影响。方法:16只Wistar大鼠随机分为LPS组和生理盐水(NS)组,每组8只。结扎大鼠右侧坐骨神经建立坐骨神经压榨性损伤(CCI)模型,建模术后第3天,LPS组大鼠腹腔注射LPS(1 mg/kg),NS组注射等量生理盐水,均1次/d,连续给药4周。在CCI术前(当天)和术后3、7、10、14、21、28天测量2组大鼠手术侧(右侧)及对侧触诱发痛针刺-缩足强度和热刺激-缩足时间。结果:成功建立CCI大鼠模型。2组在术后3天手术侧针刺-缩足强度和热刺激-缩足时间与术前比较均明显降低或缩短(P均<0.05)。LPS组大鼠手术侧热刺激-缩足时间在术后7、10、14、28天持续下降,且明显低于NS组。结论:LPS能增强CCI大鼠的热痛敏,可能是刺激了CCI大鼠持续产生免疫应激状态,导致大鼠热高敏,但其与触诱发痛敏无关。     

CsA对CCI大鼠触诱发痛和热痛敏影响的实验研究

目的:研究免疫抑制剂环孢素A(CsA)对大鼠神经性慢性病理性疼痛的影响。方法:16只Wistar大鼠随机分为CsA组和生理盐水(NS)组,每组8只。结扎大鼠右侧坐骨神经建立坐骨神经压榨性损伤(CCI)模型,建模术后第3天,CsA组大鼠腹腔注射CsA(6 mg/kg),NS组注射等量生理盐水,均1次/d,连续给药4周。在CCI术前(当天)和术后3、7、10、14、21、28天测量2组大鼠手术侧(右侧)及对侧触诱发痛针刺-缩足强度和热刺激-缩足时间。结果:成功建立CCI大鼠模型。2组在术后3天手术侧针刺-缩足强度和热刺激-缩足时间与术前比较均明显降低或缩短(P均<0.05)。CsA组手术侧热刺激-缩足时间到10天后逐渐增加,28天基本恢复,但针刺-缩足强度变化不明显。结论:CsA能影响CCI大鼠的热痛敏,对大鼠神经性慢性病理性疼痛有一定程度的干预作用,与触诱发痛敏无关。     

用E花环试验检测人胎盘免疫调节因子活性的研究

用成人外周血T淋巴细胞总E花环法、正常成人血T淋巴细胞45C脱E受体的E花环法以及脐血淋巴细胞E花环法,进行HPIF免疫活性检测的比较研究,结果表明用正常成人外周血淋巴细胞45C脱E受体的E花环法最佳。建议将此法作为HPIF免疫活性检测的常用方法。     

免疫后再感染大鼠下丘脑弓状核ACTH样和β-内啡肽样免疫阳性细胞的相关变化

取经福氏痢疾杆菌免疫后的Ｗｉｓｔａｒ大鼠，老龄鼠（２０个月）１０只，壮龄鼠（８个月）１１只，雌雄兼用。通过腹膜腔注入致病量福氏痢疾杆菌Ｆ１ｂ，２４ｈ后，处死取材；常规脱水，低度石蜡包埋、切片；ＡＢＣ法染色，ＤＡＢ显色。光镜下观察下丘脑弓状核促肾上腺皮质激素样免疫反应（ＡＣＴＨ－ｉｒ）和β－内啡肽样免疫反应（β－ＥＮＤ－ｉｒ）阳性细胞的形态、分布和计数。图像分析仪测其灰度值。结果：光镜下计数下丘脑弓状核ＡＣＴＨ－ｉｒ和β－ＥＮＤ－ｉｒ阳性细胞，老龄鼠明显低于壮龄鼠。多数鼠第三脑室室周层出现许多β－ＥＮＤ－ｉｒ强阳性细胞。再感染老龄鼠弓状核ＡＣＴＨ－ｉｒ阳性细胞灰度值显著高于再感染壮龄鼠；其β－ＥＮＤ－ｉｒ阳性细胞灰度值显著低于再感染壮龄鼠。提示：再感染老龄鼠虽经人工主动免疫，当受细菌攻击时，有呈高ＡＣＴＨ低β－ＥＮＤ趋势；或许与其免疫功能衰退密切相关。