骨碎补活性单体成分调控骨质疏松症相关信号通路的研究进展

骨质疏松症相关分子信号通路的发现及其各通路中关键靶点的明确,为骨质疏松症的防治开辟了新的方向。骨碎补是防治骨质疏松症的一味常用中药,目前骨碎补中被证明具有抗骨质疏松活性的单体成分包括柚皮苷、柚皮素和新北美圣草苷。研究显示,骨碎补通过调控骨代谢相关分子信号通路,如OPG/RANKL/RANK通路、组织蛋白酶K通路、Wnt/β-catenin通路、骨形成蛋白通路上相关靶点,发挥抑制骨吸收或促进骨形成的作用,最终达到防治骨质疏松症的目的。本文综述了骨碎补活性单体成分调控骨质疏松症相关信号通路的研究进展,发现研究者使用的干预药物以骨碎补总黄酮为主,其次是单体成分柚皮苷,尽管有研究表明柚皮素及新北美圣草苷可能比柚皮苷具备更强的抗骨质疏松活性,但相关研究较匮乏。另外,目前相关研究仅停留在单一分子信号通路中的一个或数个调控靶点上,为了阐明骨碎补活性单体成分抗骨质疏松的多靶点、多环节生物学机制,发掘中药防治骨代谢疾病的潜在价值,今后有必要进行骨碎补活性单体成分的进一步分离、鉴定以及各信号通路间的相互交联研究。     

六味地黄生物制剂对衰老小鼠脾淋巴细胞DNA损伤的保护作用

目的探讨六味地黄生物制剂延缓衰老的机制。方法小鼠随机分为正常对照组、阳性药物(维生素E)组、衰老模型组与六味地黄生物制剂组。除正常对照组注射生理盐水外,其余各组皮下注射0.5mL 5%D-半乳糖以建立衰老模型,连续50 d。第10天开始以0.2 mL.10 g-1给予各组小鼠灌胃相应的药物,50 d后处死小鼠,分离脾淋巴细胞并利用单细胞凝胶电泳法检测各组小鼠脾脏淋巴细胞的DNA损伤情况。结果与正常对照组比较,衰老模型组小鼠的脾淋巴细胞有较为严重的损伤(P<0.01),尾长、尾距与DNA拖尾率分别为(145.96±94.63)μm、(51.34±44.67)μm、(23.14±15.90)%;与衰老模型组比较,阳性药物组和六味生物制剂组小鼠的DNA损伤均显著降低(P<0.01)。结论六味地黄生物制剂对D-半乳糖所致的衰老小鼠的脾淋巴细胞有明显的保护作用,这可能是六味地黄生物制剂延缓衰老的机制之一。     

六味地黄生物制剂多糖对果蝇寿命及繁殖力的影响

目的研究六味地黄生物制剂多糖对果蝇寿命及繁殖力的影响。方法采用美国黑腹果蝇为实验材料,经口喂果蝇不同质量浓度(0.1%、0.3%、0.9%)的六味地黄生物制剂多糖提取物,以普通培养基作为空白对照,观察其对果蝇寿命和繁殖力的影响。结果各浓度的六味地黄生物制剂多糖能够延长雌性果蝇的半数死亡时间、最高寿命、平均寿命及延长雄性果蝇的最高寿命,且能增加果蝇子一代和子二代成虫数。结论六味地黄生物制剂多糖对果蝇具有良好的抗衰延寿作用并提高其生殖能力,提示六味地黄生物制剂多糖可能为该制剂抗衰老作用的物质基础之一。     

六味地黄生物制剂多糖对果蝇寿命及繁殖力的影响

目的 研究六味地黄生物制剂多糖对果蝇寿命及繁殖力的影响。方法 采用美国黑腹果蝇为实验材料,经口喂果蝇不同质量浓度(0.1%,0.3%,0.9%)的六味地黄生物制剂多糖提取物,以普通培养基作为空白对照,观察其对果蝇寿命和繁殖力的影响。结果 各浓度的六味地黄生物制剂多糖能够延长雌性果蝇的半数死亡时间、最高寿命、平均寿命及延长雄性果蝇的最高寿命,且能增加果蝇子一代和子二代成虫数。结论 六味地黄生物制剂多糖对果蝇具有良好的抗衰延寿作用并提高其生殖能力,提示六味地黄生物制剂多糖可能为该制剂抗衰老作用的物质基础之一。     

六味地黄生物制剂多糖对果蝇抗氧化作用的影响

目的:观察六味地黄生物制剂多糖(LW-PSB多糖)对果蝇抗氧化作用的影响。方法:采用美国野生型黑腹果蝇为实验对象,收集8 h内羽化未交配果蝇,雌雄分开,在温度为(25±1)℃,相对湿度为(60±5)%的人工气候箱中用培养基进行培养,将果蝇随机分为阴性对照组(普通培养基),阳性对照维生素C组(添加维生素C 1 g·kg-1的培养基),LW-PSB多糖低、中、高剂量组(含不同浓度的LW-PSB多糖的培养基,浓度依次为1,3,9 g·kg-1),共5组,每组雌、雄各500只。果蝇30 d龄时分别制成匀浆,测定果蝇体内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总抗氧化物(TAOC)活性及丙二醛(MDA)含量。结果:与阴性对照组比较,LW-PSB多糖各剂量组能提高果蝇SOD,CAT,GSH-Px和TAOC活性(P<0.05,P<0.01或P<0.001),降低MDA含量(P<0.01或P<0.001);与维生素C组比较,LW-PSB多糖各剂量组能不同程度地提高GSH-Px和TAOC活性(P<0.05或P<0.001),降低MDA含量(P<0.01或P<0.001)。结论:六味地黄生物制剂多糖饲喂果蝇可提高果蝇体内的抗氧化能力。     

六味地黄生物制剂对衰老模型小鼠脑海马区神经元Bcl-2和BaxmRNA表达的影响

目的:观察六味地黄生物制剂(LW-PSB)对衰老模型小鼠脑海马区神经元Bcl-2和Bax mRNA表达的影响。方法:将昆明种小鼠随机分为模型组、阳性对照维生素E(VE 0.27 g.kg-1)组、LW-PSB治疗组(0.50 g.kg-1)和正常对照组,共4组,每组各10只。造模后第15天开始按0.02 mL.g-1体重灌胃给药,模型组、正常对照组灌胃等体积生理盐水,每日1次,连续灌胃30 d。末次给药30 min后处死并分别取各组小鼠脑海马体,采用RT-PCR法检测各组小鼠脑海马区神经元Bcl-2和Bax mRNA的表达。结果:与模型组比较,LW-PSB治疗组Bcl-2 2-△△Ct显著升高(P<0.01),阳性对照组和LW-PSB治疗组Bax 2-△△Ct显著降低(P<0.01),阳性对照组和LW-PSB治疗组Bcl-2/Bax比值显著升高(P<0.01);与阳性对照组比较,LW-PSB治疗组Bcl-2 2-△△Ct升高(P<0.05)、Bax 2-△△Ct降低(P<0.05)和Bcl-2/Bax比值显著升高(P<0.01)。结论:六味地黄生物制剂通过促进脑海马区神经元Bcl-2 mRNA的表达和抑制Bax mRNA的表达起到抗衰老作用。     

六味地黄汤生物制剂对小鼠耐寒、耐缺氧及抗疲劳作用的实验研究

目的 观察六味地黄汤生物制剂对小鼠耐寒、耐缺氧、抗疲劳的影响.方法 昆明种小鼠随机分为空白对照组、六味地黄汤阳性对照组及六味地黄汤生物制剂低、中、高(2.4、4.8、9.6 g/kg)剂量组,灌胃给药7d后分别考察小鼠-5℃寒冷的死亡率、常压耐缺氧时间以及负重游泳时间.结果 六味地黄汤生物制剂能明显降低小鼠-5℃...     

六味地黄生物制剂中多糖脱蛋白方法对比

目的:对六味地黄生物制剂粗多糖中蛋白质的去除方法进行比较研究,探讨不同方法对多糖的提取率及纯度的影响.方法:利用Sevage法、TCA-正丁醇沉淀法、鞣酸沉淀法对六味地黄生物制剂脱蛋白,通过蛋白清除率和多糖保存率比较3种方法的优劣.结果:TCA-正丁醇法脱蛋白时效果最好,最佳条件为TCA-正丁醇试剂的体积比1∶2,TCA-正丁醇试剂的配比1∶5,振摇时间30 min,静置时间1.0h,多糖脱蛋白效率最高,多糖保存率最大.结论:TCA-正丁醇法是目前六味地黄生物制剂脱蛋白效果最好的工艺.     

左归丸对激素性骨质疏松大鼠腰椎骨组织mTORC1 mRNA表达的影响

目的探讨左归丸防治激素性骨质疏松的可能作用机制。方法 18只SD大鼠随机分为空白组、模型组、左归丸组,每组6只。模型组、左归丸组皮下注射地塞米松磷酸钠注射液0.6 mg/kg,每3天注射1次,构建激素性骨质疏松大鼠模型。左归丸组在造模第1天开始给予左归丸溶液1.9 g/(kg·d)灌胃,空白组、模型组给予生理盐水灌胃1 ml/(100 g·d),连续8周。检测大鼠腰椎骨密度、生物力学指标及腰椎骨组织Runt相关转录因子2(Runx2)、组织蛋白酶K(CTSK)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1(m TORC1)mRNA表达,HE染色观察腰椎形态学改变,检测大鼠血清碱性磷酸酶(AKP)活性。结果HE染色显示,模型组骨小梁内骨细胞数量减少,骨小梁表面成骨细胞及破骨细胞稀疏;与模型组比较,左归丸组骨小梁内骨细胞数量、骨小梁表面成骨细胞及破骨细胞明显增多。与空白组比较,模型组大鼠骨密度、骨矿物质含量、压缩强度、能量吸收值、m TORC1 mRNA表达及血清AKP活性降低(P0.05);而左归丸组大鼠腰椎骨密度、骨矿物质含量、压缩强度、m TORC1 mRNA表达及血清AKP活性水平高于模型组(P0.05)。结论左归丸能有效改善激素性骨质疏松,m TORC1可能是其重要靶点。