蒜素对神经样细胞RhoA活性和轴突生长的影响

【目的】探讨蒜素（Allicin）对神经样PCI2细胞Rho亚家族蛋白A（RhoA）活性和轴突生长的影响。【方法】体外培养神经样PCI2细胞,RhoA激动剂溶血磷脂酸（lysophosphatidic acid,LPA）诱导RhoA活化,并使用Allicin干预,Western blot检测RhoA、相关卷曲螺旋形成蛋白激酶1（R0ck1）、相关卷曲螺旋形成蛋白激酶2（Rock2）、轴突生长蛋白神经微丝（NF）、突触蛋白（synapsin）、突触素（synaptophysin）表达并比较。【结果1I。PA作用诱导RhoA活化,RhoA、ROCK1、ROCK2过表达,NF、synapsin、synaptophysin表达显著降低。Allicin干预处理后,RhoA活化被抑制,RhoA、ROCK1、ROCK2表达下调;恢复NF、synapsin、synapto—physin表达。【结论】Allicin干预能有效缓解LPA处理PCI2细胞诱导的RhoA活化和对轴突生长的抑制;提示Allicin可通过抑制RhoA的活化促进轴突生长。     

可长时间缓释骨形态发生蛋白2的聚己内酯复合支架的制备及应用

目的 制备一种可长时间缓释骨形态发生蛋2(BMP-2)的聚己内酯(PCL)复合支架,并通过检测其对人源骨髓间充质于细胞(BMSC)成骨分化的影响探讨其在骨组织工程中的应用.方法 将磷脂(PL)和BMP-2混合形成的BMP-2/PL混合物(B/P)分散在二氯甲烷中,与PCL混合后,采用相分离法制备负载BMP-2的三维PCL-B/P复合支架和PCL-B传统支架,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测两种支架的BMP-2缓释效果.将BMSC种植在PCL-B传统支架和PCL-B/P复合支架中,分别采用CCK-8法和实时定量PCR(qPCR)检测两种支架上BMSC的增殖和成骨分化能力.结果 与PCL-B传统支架对比,PCL-B/P复合支架对BMP-2缓释效果更佳,缓释时间更长,可达22 d.在BMSC培养的第7、14和21天,PCL-B/P复合支架上BMSC的增殖能力均优于PCL-B传统支架(P＜0.05),且PCL-B/P复合支架上BMSC中碱性磷酸酶和Ⅰ型胶原蛋白、骨钙、骨桥蛋白3种成骨基因mRNA的表达均高于PCL-B传统支架(P＜0.05,P＜0.01).结论 成功地制备出一种可长时间缓释BMP-2的高分子三维PCL-B/P复合支架,其较PCL-B传统支架能更好地诱导BMSC的增殖和成骨分化.     

蒜素对大鼠急性脊髓损伤的保护作用研究

[目的]研究蒜素对大鼠急性脊髓损伤的保护作用.[方法]采用改良的Allen's法制备大鼠急性脊髓损伤模型,18只健康雌性SD大鼠随机分为假手术组(sham)、急性脊髓损伤组(ASCI)和急性脊髓损伤+蒜素组(ASCI+allicin).给药组于手术开始前1 h腹腔注射蒜素,术后每日1次,持续2周.术后1 d、4 d、7 d、14 d、21 d分别对各组大鼠进行BBB评分,评估用药后蒜素对大鼠运动功能的影响;术后21 d处死大鼠取材,HE染色观察各组大鼠脊髓组织的形态学变化,Real-time PCR检测脊髓组织中炎性因子白介素6(IL-6)和白介素10(IL-10)mRNA的表达.[结果]蒜素治疗21 d,同ASCI组比较,大鼠的BBB评分显著升高(P<0.01),炎性细胞浸润程度明显减轻,促炎因子IL-6的表达显著降低(P<0.01),抗炎因子IL-10的表达显著升高(P<0.01).[结论]蒜素对大鼠急性脊髓损伤具有明显保护作用,其机制可能与抗炎作用有关.     

可同时释放两种骨形态发生蛋白复合支架的制备

目的 研制一种可同时释放骨形态发生蛋白2 (BMP-2)和骨形态发生蛋白7(BMP-7)的生物活性复合支架,以应用于骨组织工程的研究.方法 分别采用复乳溶剂挥发法和相分离法制备负载BMP-2和BMP-7的聚乳酸/羟基乙酸-聚乙二醇(PGLA-PEG)微球和三维多孔的聚己内酯(PCL)支架.然后采用改良的二氯甲烷熏蒸法将PGLA-PEG微球黏附在PCL支架上,形成同时负载BMP-2和BMP-7的复合支架,并检测BMP-2和BMP-7的缓释效果.将人成骨细胞系hFOB1.19分别种植在复合支架和传统支架中,研究支架上的细胞增殖能力和成骨分化能力.结果 制备的复合支架能同时缓慢地释放BMP-2和BMP-7.细胞培养第10天,复合支架上的细胞活性优于传统支架(P＜0.01),细胞形态正常.复合支架上细胞的碱性磷酸酶和Ⅰ型胶原蛋白、骨钙素、骨桥蛋白3种成骨基因的mRNA水平均高于传统支架(P＜0.05,P＜0.01).结论 成功研制出一种可同时释放BMP-2和BMP-7的生物活性复合支架,并可用于骨组织工程的研究.