经静脉移植间充质干细胞在脊髓损伤鼠体内的迁移

目的:观察67Ga-Oxine标记间充质干细胞的可行性,检测经静脉移植的间充质干细胞在脊髓损伤鼠体内的迁移和分布。方法:实验于2004-01/2005-01在北京大学干细胞研究中心完成。①从人脐带血分离培养间充质干细胞,体外进行67Ga-Oxine和Hoechst33342标记。②SD大鼠40只随机分为两组,实验组(脊髓损伤大鼠20只)和对照组(正常大鼠20只)均经尾静脉注射相同标记细胞悬液。③分别于1d和1周后取材,新鲜组织(脊髓、肺、肝、脾、肾、骨髓、静脉血)称湿重后伽玛计数仪检测其放射性,计算肺、肝、脾、肾、骨髓分别与静脉血单位质量放射性计数的比值,两组比较分析;实验组损伤脊髓和对照组相同部位脊髓分别与其临近正常脊髓放射性计数的比值之间比较。相应组织做冷冻切片(包括骨髓涂片),荧光显微镜观察Hoechst33342标记细胞在各组织内的分布。结果:40只SD大鼠全部进入结果分析。①体外间充质干细胞的67Ga-Oxine标记率为82.5%,放射活性为15.26MBq/106细胞,标记48h后细胞存活率>95%。②移植1d和1周后肺、肝、脾、肾、骨髓与静脉血单位质量放射性计数的比值,实验组与对照组对比差异均无显著性(P>0.05)。实验组损伤脊髓和对照组相同部位脊髓分别与其临近正常脊髓放射性计数的比值之间比较,1d后差异无显著性(P>0.05),1周后实验组明显高于对照组(1.441±0.038,1.003±0.022,P<0.01)。③相应组织连续冷冻切片荧光显微镜观察显示移植初期Hoechst33342标记细胞主要集中于肺部,而后在肝、脾、骨髓逐渐增加可持续到1周后。移植1d后脊髓未见明显标记细胞,1周后实验组损伤脊髓部位标记细胞明显增加并相对聚集于灰质。结论:间充质干细胞可在体外应用67Ga-Oxine成功标记,为核素显像示踪移植间充质干细胞的相关研究提供了依据。经静脉移植的间充质干细胞可以迁移到损伤脊髓,为应用间充质干细胞移植治疗脊髓损伤提供了一种可能的无创性移植方法。     

中医综合疗法治疗膝骨关节炎临床疗效分析

目的：分析中医综合疗法治疗膝骨关节炎的临床疗效。方法：选取50例膝骨关节炎患者,随机分为实验组和对照组各25例。实验组采用中药汤药内服加针灸治疗及中药外敷治疗,对照组口服非甾体抗炎镇痛药布洛芬进行治疗,观察和记录两组患者的疾病恢复情况。结果：实验组总有效率为92．0％,明显优于对照组的60．0％,差异有统计学意义（P〈O．05）。结论：中医综合疗法治疗膝骨关节炎具有安全有效、副作用小等特点,值得临床推广应用。     

特殊人群断肢(指)再植的临床观察

随着社会的发展，各种人群参与工作及社会活动的日益增多，小儿及高龄合并糖尿病等患者发生断肢(指)患者明显增多，给再植工作带来更多的难题。1993～2002年，本院共收治61例特殊人群的断肢(指)，无1例死亡，再植存活率为96．7％。     

β和γ射线照射肿瘤细胞的生物效应比较

目的 比较低剂量率β射线和高剂量率γ射线照射诱发肿瘤细胞生物效应特点。方法采用^32Pβ射线和^60Coγ射线照射人宫颈癌HeLa细胞系，用台盼蓝排除法和X-gal衰老细胞染色法比较两种照射肿瘤细胞死亡方式的差异。结果 ^32Pβ射线(0．375cGy/min)和^60Coγ射线(206cGy/min)照射HeLa细胞后72h的结果表明，低剂量率β射线抑制细胞增殖为渐进性，使多数的细胞在一个或几个细胞倍增周期后死亡，以增殖性死亡为主；高剂量率γ射线对细胞的抑制作用直接、迅速，细胞坏死比例高，增殖性死亡(衰老)比例低于持续低剂量照射方式。结论 不同的辐射方式对细胞的杀伤方式不同，了解其放射生物学机理有助于临床治疗方案的选择。     

永生化神经前体细胞系hNPC-TERT体内外D2受体的表达

目的 验证神经前体细胞系hNPC-TERT移植入动物中枢神经系统前后多巴胺D2受体的表达.方法 免疫荧光定性鉴定体外培养hNPC-TERT的D2受体表达,并进一步应用放射受体分析方法测定hNPC-TERT细胞表达D2受体数量.实验组兔脊髓内移植3×106 hNPC-TERT,对照组动物脊髓内移植同等数量HeLa细胞,移植后第7天,以11C-raclopride为示踪剂,移植动物活体或处死动物剥离出脊髓进行D2受体PET显像,并行移植段脊髓切片免疫荧光染色,验证hNPC-TERT在体内的D2受体表达.结果 免疫荧光和放射受体分析显示体外培养hNPC-TERT细胞表面表达大量D2受体(Bmax=8×104).移植入兔脊髓后,D2受体显像显示移植部位有明显的放射性浓聚,经ROI半定量分析,与对照组差异显著(P=0.0017),离体脊髓PET显像、组织免疫荧光进一步证实了活体显像结果.结论 神经前体细胞系hNPC-TERT高表达多巴胺D2受体,并且在移植入体内后仍保持该特性,具有移植治疗帕金森综合征等D2受体缺乏性疾病的潜力.     

脊髓内移植间充质干细胞的转铁蛋白受体显像

目的 探索放射性核素显像活体追踪移植干细胞的可能性.方法 用放射性受体分析定量测定体外培养人间充质干细胞(hMSCs)的转铁蛋白受体表达.兔脊髓内移植人间充质干细胞,蛛网膜下腔注入 131Ⅰ标记铁胞和转铁蛋白后不同时间,用伽玛相机采集图像.感兴趣区(ROI)技术对图像进行半定量分析.磷屏放射自显影验证活体显像.结果 hMSCs高表达转铁蛋白受体(10,770/细胞),并且对铁饱和转铁蛋白具有高亲和力(KD=0.982nmol/L).实验组动物在注射显像剂后16和24h观察到了移植区放射性浓聚灶,而以PBS作为移植物和以 131Ⅰ标记的血清白蛋白作为显像剂的2个对照组均呈阴性显像,ROI分析显示实验组与对照组之间具有显著的统计学差别(P＜0.05).磷屏放射自显影证实了间充质干细胞移植部位能够特异结合铁饱和转铁蛋白.结论 应用核素显像活体示踪移植干细胞具有可行性,经过进一步改进,有望为干细胞移植治疗提供无创的监测手段.     

高功能甲状旁腺~(99)Tc~m-MIBI扫描:半定量分析与组织学检查的相关性

99Tcm-甲氧基异丁基异腈 (99Tcm- MIBI)甲状旁腺闪烁显像是临床上高功能甲状旁腺术前定位方法之一。目前认为 ,高功能甲状旁腺组织摄取 99Tcm- MIBI与病变部位灌注增强、功能增强及线粒体丰富的细胞增多有关。因而 ,对此进行了研究。方法 :选择 31例生化检查提示为甲状旁腺功能亢进(HPT)的患者 (2 0例男性 ,11例女性 ) ,其中 13例原发 HPT,18例继发 HPT。分别给予 740 MBq99Tcm- MIBI后 15 m in行早期显像 ,2 h行延迟显像。延迟显像时病变区域内放射性高于甲状腺者为阳性 ,计算甲状旁腺与甲状腺的放射性比值(P/ T)。术后病理检…     

S期H1299细胞热损伤后的延迟性DNA双链断裂

目的研究S期细胞热损伤后DNA双链断裂形成规律,以阐明S期细胞热敏感原因,并分析DNA双链断裂延迟性形成的 可能机制。方法流式细胞术分析热损伤后细胞周期阻滞;EdU掺入实验检测DNA复制能力;血清饥饿法同步H1299细胞周 期;中性彗星实验动态观察热损伤后DNA双链断裂形成;台盼蓝拒染实验研究热损伤后细胞存活率;蛋白免疫印记实验检测 ATM磷酸化及DNA结合RAD18情况。结果流式结果显示H1299细胞经45 ℃热损伤1 h后S期细胞较未加热组明显增多（P< 0.01）;热损伤后EdU阳性率随时间变化趋势同S期比例变化;S期细胞热损伤后需经37 ℃正常孵育一定时间方可观察到“彗星 拖尾”现象,且随着正常孵育时间延长,反映DNA双链断裂的尾力矩值越大;台盼蓝拒染实验显示S期细胞受热后7.5 h内死亡 率保持较低水平,之后细胞死亡加速;热损伤后ATM磷酸化先增多后减少,热损伤导致DNA结合RAD18明显减少。结论细 胞热损伤后可发生S期阻滞,阻滞期间因复制继续、DNA损伤修复抑制而延迟形成的致死性DNA双链断裂是S期细胞热敏感 的可能原因。     

经静脉移植间充质干细胞在脊髓损伤鼠体内的迁移

目的：观察^67Ga-Oxine标记间充质干细胞的可行性，检测经静脉移植的间充质干细胞在脊髓损伤鼠体内的迁移和分布。方法：实验于2004—01／2005—01在北京大学干细胞研究中心完成。①从人脐带血分离培养间充质干细胞，体外进行^67Ga-Oxine和Hoechst33342标记。（2）SD大鼠40只随机分为两组，实验组（脊髓损伤大鼠20只）和对照组（正常大鼠20只）均经尾静脉注射相同标记细胞悬液。③分别于1d和1周后取材，新鲜组织（脊髓、肺、肝、脾、肾、骨髓、静脉血）称湿重后伽玛计数仪检测其放射性，计算肺、肝、脾、肾、骨髓分别与静脉血单位质量放射性计数的比值，两组比较分析；实验组损伤脊髓和对照组相同部位脊髓分别与其临近正常脊髓放射性计数的比值之间比较。相应组织做冷冻切片（包括骨髓涂片），荧光显微镜观察Hoechst33342标记细胞在各组织内的分布。结果：40只SD大鼠全部进入结果分析。①体外间充质干细胞的^67Ga-Oxine标记率为82．5％，放射活性为15．26MBq／10^6细胞，标记48h后细胞存活率〉95％。（2）移植1d和1周后肺、肝、脾、肾、骨髓与静脉血单位质量放射性计数的比值，实验组与对照组对比差异均无显著性（P〉0．05）。实验组损伤脊髓和对照组相同部位脊髓分别与其临近正常脊髓放射性计数的比值之间比较，1d后差异无显著性（P〉0．05），1周后实验组明显高于对照组（1．441&;#177;0．038，1．003&;#177;0．022，P〈0．01）。（3）相应组织连续冷冻切片荧光显微镜观察显示移植初期Hoechst33342标记细胞主要集中于肺部，而后在肝、脾、骨髓逐渐增加可持续到1周后。移植1d后脊髓未见明显标记细胞，1周后实验组损伤脊髓部位标记细胞明显增加并相对聚集于灰质。结论：间充质干细胞可在体外应用^67Ga—Oxine成功标记，为核素显像示踪移植间充质干细胞的相关研究提供了依据。经静脉移植的间充质干细胞可以迁移到损伤脊髓，为应用间充质干细胞移植治疗脊髓损伤提供了一种可能的无创性移植方法。     

新乡市荧光屏透视机的使用现状

目的:掌握新乡市医疗机构荧光屏透视机使用现状,了解应用质量和存在的问题.方法:对新乡市辖区内的医疗机构进行普查,对X射线设备逐台登记,对荧光屏透视机进行质量控制检测.结果:新乡市有荧光屏透视机单位140家,涉及荧光屏透视机142台,占全市现有医用诊断X线机总数(355台)的40%.抽检的24台荧光屏透视机,全部检测项目合格的有5台,占总检测台数的20.8%.结论:荧光屏透视机使用状况和应用质量不容乐观,应加强对荧光屏透视机的管理,并制定逐步淘汰计划