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1.
目的:研究毛乳头细胞的凝集性生长方式与其产生的细胞外基质之间的关系。方法:用人头皮分离的低传代毛乳头细胞与毛发上皮细胞共同培养形成的毛乳头细胞凝集性生长区及非凝集生长区的毛乳头细胞进行阿新蓝、过碘酸雪夫氏染色,观察染色反应的强弱。结果:新分离的毛乳头,阿新蓝和过碘酸雪夫氏染色均呈强阳性,培养的毛乳头细胞凝集性生长区阿新蓝-过碘酸雪夫氏染色亦显示强阳性,而非凝集区的毛乳头细胞显色呈弱阳性。结论:培养的毛乳头细胞凝集性生长后,合成分泌细胞外基质的功能较非凝集生长的毛乳头细胞明显增强。  相似文献
2.
毛乳头细胞凝集性生长对诱导毛囊样结构形成能力的影响   总被引:7,自引:1,他引:6  
目的 以细胞外基质成分纤维连接蛋白促进培养的人头皮毛乳头细胞凝集性生长行为 ,观察毛乳头细胞的凝集性生长对诱导毛囊形成能力的影响。方法 传代培养的人头皮毛乳头细胞经细胞外基质纤维连接蛋白预处理后 ,促进形成凝集性生长团 ,再与毛囊上皮细胞共同移植于裸鼠皮下 ,分别于 8、12周进行组织学检查 ,观察毛囊形成及分化程度。结果  8周后纤维连接蛋白预处理的毛乳头细胞组可见有毛囊样结构形成 ,未处理组仅见松散细胞团 ;12周后两组均可见有毛囊样结构形成 ,但纤维连接蛋白预处理组较未处理组诱导形成毛囊样结构分化更成熟 ;真皮成纤维细胞组未见有毛囊样结构形成。结论 毛乳头细胞的凝集性生长特性对其诱导毛囊形成的能力有密切的关系 ,细胞呈凝集性生长后 ,其生物学功能增强。  相似文献
3.
硫酸软骨素、硫酸肝素对毛乳头细胞粘附及生长的影响   总被引:6,自引:0,他引:6  
目的:探讨细胞外基质在毛囊生长发育中的作用,寻持毛乳头细胞(DPC)生长的调节因素。方法:用两步酸消化法分离培养DPC,并通过免疫组化α-平滑肌肌动蛋白(Actin)染色证实。测定硫酸软骨素A,硫酸软骨素C及硫酸肝素对DPC粘附及生长的影响。结果:两步酶消化法分离培养DPC效率高,纯度高,方法简单易行。硫酸软骨素A和硫酸肝素明显促进DPC粘附及生长,而硫酸软骨素C作用不明显。结论:某些细胞外基质可调节DPC的生长,从而影响毛囊的生长发育。  相似文献
4.
目的研究真皮来源成体多能干细胞体外恶性转化现象及其相关机制.方法对分离的真皮多能干细胞克隆体外进行连续传代培养,观察其生长性状的改变,通过裸鼠皮下接种实验观察其是否恶性转化;应用基因芯片技术比较转化前后细胞基因表达谱的改变.结果经过长期体外连续传代培养后,真皮多能干细胞可发生恶性转化,在裸鼠体内形成肉瘤样组织;基因芯片技术检测显示,转化后细胞仍表达多种类型细胞特异性基因的转录子,提示其仍具有多向分化的潜能;但转化后细胞多种增殖相关基因的表达升高,代谢反应酶类基因表达升高,生长因子和受体的表达下调,符合肿瘤细胞的特征;c-ki-ras基因及其相关信号分子的表达上调可能在转化过程中起重要作用;初步筛选鉴定了一个与干细胞增殖调控相关的候选基因.结论体外长期连续传代培养可诱发真皮多能干细胞的恶性转化,深入研究这一过程的分子机制对干细胞的安全应用和肿瘤的发生机制均具有研究意义.  相似文献
5.
人毛乳头细胞凝集性生长差异表达基因cDNA文库的构建   总被引:4,自引:0,他引:4  
目的 构建毛乳头细胞凝集性生长状态下差异表达基因的消减cDNA文库。方法 分别提取凝集性生长和非凝集性生长状态下毛乳头细胞中的总RNA,应用SMART cDNA合成技术和抑制性消减杂交技术分离毛乳头细胞凝集性生长状态下差异表达基因的cDNA片段并建立消减cDNA文库;利用PCR对随机挑选的100个白色菌落进行插入片段的验证,对其中证实有插入片段的30个克隆进行cDNA斑点杂交验证。结果 所构建的消减cDNA文库扩增后得到320个阳性克隆,随机挑选的100个阳性克隆中95%的均有长度在100—600bp的插入片段,cDNA斑点杂交验证显示27个(90.0%)克隆为阳性。结论 结合SMART cDNA合成技术,应用抑制性消减杂交成功地构建了毛乳头细胞凝集性生长差异表达基因消减cDNA文库,为进一步筛选和克隆毛乳头细胞凝集性生长相关基因奠定了基础。  相似文献
6.
正常人头皮毛囊角蛋白的免疫组化研究   总被引:4,自引:0,他引:4  
目的 了解毛发角蛋白家族在正常人头皮毛囊中的分布情况。方法 采用免疫组化染色方法对毛发角蛋白家族在正常人头皮毛囊切片上进行检测,同时比较了冰冻切片与石蜡切片(含抗原热修复)上的检测差异。结果 RCK102(K5、K8)在皮脂腺、汗腺、毛干、内外根鞘中阳性,LPIK(K7)在皮脂腺、汗腺、内根鞘中阳性。RKSE60(K10)在汗腺表达,RCK107(K14)在基底层阳性。冰冻切片及石蜡切片抗原热修复  相似文献
7.
发卡样NF-κB特异性RNA干扰表达载体的构建及体外效应研究   总被引:2,自引:2,他引:0  
目的采用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术,通过构建人NF-κB p65基因的特异性siRNA真核表达载体,体外观察对NF-κB基因的沉默作用,以及对内毒素(LPS)刺激后NF-κB活性的调控作用.方法采用基因克隆技术,将合成的发卡样特异性p65 RNA干扰寡核苷酸序列插入真核表达载体(pPUR/U6),构建p65 siRNA的表达载体,转染体外ECV-304细胞,48h后观测胞内NF-κB p65亚单位蛋白水平(Western blotting)、及对LPS(10 μg/ml)刺激后NF-gB活化的抑制作用.结果①成功构建发卡样p65 siRNA(small interfere RNA)真核表达载体(pPUR/U6-p65 siRNA);②pPURyU6-p65 siRNA转染(脂质体法)ECV-304细胞,48 h后明显下调胞内P65蛋白水平;③转染pPUR/U6-p65 siRNA的细胞,明显抑制LPS(10μg/ml)刺激后NF-κB的活化.结论该RNA干扰真核表达载体能明显干扰p65蛋白的表达、释放,进而抑制NF-κB的活化,可望进一步抑制细胞的过度炎症反应,减轻创伤组织的受损程度,促进创伤后组织的修复.  相似文献
8.
本实验将带有人肿瘤坏死因子α基因(TNF-α基因)cDNA的重组表达质粒直接注入小鼠骨骼肌内,观察了外源基因在小鼠体内的表达情况。双抗体夹心法ELISA法显示,实验组小鼠肌注15d后血浆中TNF蛋白含量逐渐增高并达高峰,然后开始下降。RNA dot blot结果显示,肌注20d时实验组中ELISA阳性的小鼠,其肌注处肌肉组织有TNF-α基因表达。由此表明,直接将外源DNA导入骨骼肌细胞内是基因转移  相似文献
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