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1.
神经再生素对背根神经节细胞GAP—43和NF—L基因表达的影响   总被引:23,自引:4,他引:19  
目的:观察中药有效组分神经再生素作用于神经细胞生长过程中,相关基因的表达变化。探讨神经再生素促神经生长的分子生物学机制。方法:采用RT-PCR法,观察神经再生素在促大鼠背根神经节生长过程中(4h,12h,24h),生长相关蛋白43(GAP-43)和神经丝蛋白(NF-L)基因表达的变化。结果:神经再生素可使背根神经节细胞GAP-43和NF-LmRNA物表达量增加。结论:神经再生素可作用于体外培养的神经细胞,使神经生长相关基因表达上调。  相似文献
2.
壳聚糖与神经干细胞生物相容性的研究   总被引:10,自引:0,他引:10  
目的 探讨生物降解材料壳聚糖与神经干细胞的生物相容性。方法 取SD大鼠胚胎(孕14-16d)大脑皮层组织制成单细胞悬液在无血清培养液中进行培养,获得大量的神经干细胞,再将所获神经干细胞在不同条件下移植接种至壳聚糖膜上联合培养1周,在倒置显微镜下观察神经干细胞生长增殖情况及形态变化,并对其分别进行免疫组化染色,电镜观察,了解壳聚糖对神经干细胞生长,增殖,分化的影响。结果 在无血清联合培养条件下,神经干细胞仍然维持其原有的干细胞特性;在含血清的培养液中,神经干细胞能分化成多种形态的神经细胞,并且在壳聚糖膜上生长良好。结论 壳聚糖与神经干细胞具有良好的生物相容性。  相似文献
3.
小鼠脊髓发育遗传参数的研究   总被引:7,自引:3,他引:4  
目的:进行小鼠脊髓发育形态学数据测定,研究遗传参数。方法:取4种近交系小鼠,A/J;C57BL/6J;DBA/2J;129xl/SvJ以及A/J与C57BL/6J杂交的F1和F2代重组个体,多聚甲醛灌注后进行脊髓重量、颈膨大截面积、灰质百分比的测定。结果:数据显示在4个近交系中,A/J与C57BL/6J脊髓发育差别最大,A/J为小脊髓(平均重65.21mg,截面积2.69mm^2;C57BL/6J为大脊髓,平均重81.58mg,截面积3.06mm^2)。在该近交系与重组小鼠中,脊髓发育的遗传度为30%~40%,最少控制基因数为2~4。结论:小鼠中脊髓发育存在超显性现象,通过小鼠脊髓形态测定获得了发育相关的遗传参数,为脊髓发育数量性状基因座(QTL)和控制基因的确认提供了资料。  相似文献
4.
神经再生素对皮层细胞基因表达影响的基因芯片研究   总被引:6,自引:0,他引:6  
目的:采用基因芯片技术,观察神经再生素对体外培养的胚鼠大脑皮质细胞基因表达的影响。方法:取ICR胚鼠(15d)大脑皮层细胞,无血清培养。实验组加入神经再生素(2μg/ml),对照组加入等量基础培养液。培养6h后,抽提实验组和对照组皮层细胞总RNA,经反转录分别用Cy5、Cy3荧光标记成cDNA探针。将荧光标记的cDNA与MGEC-40s基因表达谱芯片杂交,芯片扫描、数据处理。结果:实验组与对照组大脑皮质细胞出现64条差异性表达的基因。呈现上调的基因有:钙调素结合蛋白、锌指蛋白激酶、核糖体蛋白等基因;下调基因有:抑制细胞分裂因子等基因。结论:神经再生素可作用于体外培养的胚鼠大脑皮层细胞,从基因调控水平促进脑细胞生长。  相似文献
5.
目的:为了进一步了解间歇性气囊挤压法(Intermittent pneumatic compression, IPC)挤压大鼠腿部与一氧化氮(NO)的关系.方法:检测了大鼠骨骼肌中3种一氧化氮合酶(NOS)同工酶:神经型NOS(nNOS);诱导型NOS(iNOS)和内皮细胞型NOS(eNOS)mRNA在IPC作用后的表达变化.25只SD大鼠被随机分为3个模拟实验组和4个IPC实验组.每只鼠取右侧胫前肌(AT)和提睾肌(CM)作为正常对照.IPC组挤压0.5,1,和5h,及挤压5h加等待4h,模拟实验组除不挤压外,其他操作均与实验组相同,然后分离左侧AT和CM作为处理后样品.所有样品应用RT-PCR进行NOS mRNA测定.以样品中看家基因2,3-二羟基丙醛-3-磷酸脱氢酶(GAPHD)cDNA为内参,与NOS cDNA 共同扩增.PCR产物电泳条带密度用NIH图像分析软件定量,并以与正常对照的对比值作为变化比率.结果:在IPC作用0.5、1和5h后,eNOS mRNA显著上升,在AT中分别达到正常对照的1.2,1.8和2.6倍;在CM中分别达到1.2,1.8和2.7倍,而其他NOS,除5hIPC组的nNOS外,总体表现下调.在IPC作用1h加等待4h组中,eNOS mRNA回复至正常对照水平.结论:该结果证实了IPC产生的机械压力至少部分增加了血管壁的剪切压,使内皮细胞增加了NO产物的释放量,导致了挤压部位及远端肌肉的血管扩张和改善了微循环.  相似文献
6.
dd—PCR法研究中草药促神经生长过程中的基因差异表达   总被引:5,自引:1,他引:4  
目的 :为探讨中药促神经生长的分子机理提供实验依据。方法 :采用 dd-PCR方法 ,从体外培养大鼠背根神经节细胞加中药组和不加中药组中获得两者的差异表达片段 ,并克隆测序分析。结果 :获得 7个差异条带 ,其中 2个条带的 c DNA序列分别与酪氨酸磷酸酶受体 ( PTPR) m RNA、促生长素抑制素受体 ( SSTR) m RNA的序列部分同源。结论 :在中药促神经生长过程中 ,神经元基因具有选择性表达的变化  相似文献
7.
原核表达融合蛋白的亲和层析法纯化   总被引:4,自引:0,他引:4  
目的 :以T7·TagAffinityPurificationKit纯化原核表达Tropic 180 8基因编码的融合蛋白 ,并进行免疫印迹检测。方法 :以 0 .4mmol/LIPTG诱导含pET -2 1a -180 8重组质粒的BL2 1(DE3)大肠杆菌 ,T7·TagAffinityPurifica tionKit纯化菌体上清液 ,SDS -PAGE分析 ,将SDS -PAGE蛋白区带转移至NC膜进行免疫印迹检测。结果 :外源性Tropic 180 8基因在大肠杆菌中表达的融合蛋白可经T7·TagAffinityPurificationKit进一步纯化 ,纯化后的蛋白为单一条带 ,分子量约为 32 .0kDa ,其免疫印迹反应结果提示该蛋白为Tropic 180 8基因编码的融合蛋白。结论 :在大肠杆菌中表达的融合蛋白可以免疫亲和法进行纯化和鉴定。  相似文献
8.
雪旺氏细胞体外培养方法研究   总被引:4,自引:0,他引:4  
为在短时期内培养大量的雪旺氏细胞,本文对目前常用的两种培养方法进行了比较。方法:采用植块反复种植法和酶消化法分别进行雪旺氏细胞的体外培养。结果表明两种方法都能得到雪旺氏细胞。但酶消化所培养的雪旺氏细胞生长相同条件下达到一定细胞数量所需时间短于植块反复种植法。酶消化法比植块反复种植法更适用于大量雪旺氏细胞的培养。  相似文献
9.
脑组织提取液对体外培养雪旺氏细胞影响的观察   总被引:3,自引:0,他引:3  
目的:了解脑组织提取液对体外培养雪旺氏细胞的影响。方法:酶消化法培养的雪旺氏细胞分烃 加脑组织提取液组,对细胞形态和数量进行观察比较。结果:体外培养的五氏细胞在加入脑组织提取液后细胞增殖加快,并出现细胞突出起细长(为对照组的2-3倍),互相延伸等形态学改变。结论:雪旺氏细胞在接触脑组织提取液后,表现为细胞增殖加快,突起生长明显的功能活跃状态。  相似文献
10.
局灶脑缺血/再灌注后nNOS、iNOSmRNA的表达   总被引:3,自引:0,他引:3  
目的:了解nNOS mRNA和iNOSmRNA在局灶性脑梗死表达中的时程变化与细胞定位。方法,鼠局灶性脑缺血/再灌注模型;用原位杂交技术进行缺血/再灌注后1,3,5天nNOSmRNA、iNOSmRNA表达的细胞定位并用点杂交方法测量不同时间段梗死半球与非梗死半球内nNOSmRNA、iNOSmRNA水平。结果:正常鼠nNOSmRNA以神经元表达为主,iNOSmRNA无表达,梗死后iNOSmRNA表达以小胶质细胞为主,梗死区未见nNOSmRNA;nNOSmRNA表达从4h就开始下降,1~3天最低,5天左右又上升,iNOSmRNA在缺血再灌注后12h开始表达,1天左右升至高峰,3天左右缓慢下降。结论:nNOSmRNA在缺血损伤后有一短暂表达增高,而在缺血损伤4h后就开始缓慢下降;而iNOSmRNA在缺血/再灌注后12h开始表达,高峰在1天左右,3天左右开始下降,其细胞定位以小胶质细胞为主。  相似文献
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