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1.
循环胸腔热灌注治疗肺癌胸水及其机制探讨   总被引:40,自引:0,他引:40  
目的 评价循环胸腔热灌注治疗肺癌胸水的综合疗效,并探讨其治疗机制。方法 采用循环胸腔43℃温生理盐水灌注60min,治疗45例肺癌胸水患者,随访观察胸水的疗效、肺原发病灶变化、副作用、生活质量以及生存期,评价其临床综合疗效。同时利用流式细胞术、光镜、电镜、末端脱氧核苷酸转移酶原位标记(TUNEL)等技术,比较了热疗前后胸液细胞学、生化学的变化以及胸膜表面癌细胞的形态学和生化学改变。结果 全组均经一次热疗后,胸水控制有效率达100%(CR93.3%+PR6.7%),仅1例于热疗后1年胸水复发,其余均无胸水复发,平均胸水消失时间达16.5个月,最长达40个月。13例热疗后1个月复但CT,发现肺部原发灶缩小者5例,基本不变者5例。无手术死亡及并发症。42例热疗后生活质量明显提高,全组中位存活期达16.8个月,1年生存率达87%,其中1例超过3年,4例达2年以上,分别存活29、30、31个月(仍存活)、40个月。热疗后胸水癌胚抗原(CEA)下降至正常、胸水中未找到瘤细胞、流式细胞术DNA倍体分析肿瘤异倍体峰消失。光镜、电镜见热疗后胸膜表面癌细胞核固缩、碎裂和凋亡小体,TUNEL见带亮黄色 荧光的凋亡阳性细胞。结论 (1)循环胸腔热灌注为一种安全、有效的治疗肺癌胸水的新方法;(2)凋亡介导的癌细胞热杀伤作用、热疗后机体免疫功能的增强和灌注液的物理冲刷作用是循环胸腔热灌注治疗癌性胸水的重要机制。  相似文献
2.
脐带源间充质干细胞的分离和生物学性状   总被引:17,自引:0,他引:17  
目的建立从脐带分离间充质干细胞的方法,并研究其生物学性状。方法脐带经酶消化后于DMEMLG/F12培养基中培养,倒置显微镜及电镜观察细胞形态学,细胞计数绘制细胞生长曲线,计数成纤维细胞集落形成单位(CFUF),流式细胞仪测定细胞周期及细胞免疫表型,免疫组织化学染色及RTPCR检测其体外诱导成脂肪和成骨分化的能力,RTPCR检测其细胞因子的分泌,与脐血来源CD34+细胞共同培养检测其支持造血的能力。结果经酶消化后,每cm脐带可得到中位数为1.01×106的有核细胞,CFUF产率为1/1609有核细胞,经贴壁传代可分离出成纤维样细胞,细胞倍增时间为(28.02±10.53)h。流式细胞仪分析细胞周期显示,>80%的细胞处于G0/G1期,S+G2+M期的细胞仅占(13.04±4.31)%。免疫表型分析显示,CD13、CD29、CD44、CD105(SH2)、CD73(SH3)、CD166和MHCI阳性,CD45、CD34、CD38、CD31和MHCⅡ阴性。体外诱导实验证实,该细胞具有成脂肪和成骨分化的能力。RTPCR显示,该细胞表达干细胞因子、血小板生成素,酪氨酸激酶受体配基、白细胞介素6、巨噬细胞集落刺激因子、白血病抑制因子、基质细胞衍生因子和血管内皮细胞生长因子,不表达白细胞介素3。与脐血来源CD34+细胞共同培养2周可见鹅卵石形成区,共培养8周证实其支持长期造血能力。结论建立从脐带中分离间充质干细胞的方法,脐带是间充质干细胞的新的来源。  相似文献
3.
温热疗法治疗肺癌癌性胸水及其机制的临床研究   总被引:12,自引:1,他引:11  
目的 评价热疗肺癌癌性胸水的综合疗效,探讨肿瘤热疗的机制。 方法 采用43±0.5℃温盐水胸腔循环灌注60 m in,治疗30 例肺癌癌性胸水患者,随访观察对胸水的疗效、肺原发病灶变化、生活质量以及生存期,评价其临床综合疗效,同时利用光镜、电镜、末端脱氧核苷酰转移酶原位标记(TUNEL)等技术,比较了热疗前后胸膜转移癌细胞的形态学和生化学改变。 结果 全组均只经一次热疗,胸水控制有效率达100% (CR96.7% + PR3.3% ),仅1 例于热疗后1 年胸水复发,余29 例分别随访2~31 个月无胸水复发。13 例热疗后复查CT,发现肺部原发灶缩小者5 例。无手术死亡及并发症。全组1 年存活率达80.0% ,3 例分别达29,24,31 个月。28例热疗后生活质量明显提高。光镜、电镜见胸膜转移癌细胞胞核固缩、碎裂和凋亡小体,TUNEL见带亮黄色荧光的凋亡阳性细胞。 结论 温盐水胸腔循环灌注是肺癌癌性胸水安全、有效的新疗法;凋亡介导的肿瘤细胞热杀伤作用是肿瘤热疗的独特机制。  相似文献
4.
人白血病细胞重度联合免疫缺陷小鼠模型的建立和监测   总被引:11,自引:0,他引:11  
目的 建立三种白血病重度联合免疫缺陷 (SCID)小鼠模型 ,探讨人体白血病细胞在 SCID小鼠体内的不同的生物学行为。 方法 在 SCID小鼠腹腔或静脉分别接种 5× 10 6 ~ 1× 10 7个 HL - 6 0、CEM、K5 6 2三种白血病细胞 ,应用 PCR、RT- PCR、流式细胞术、组织病理监测和追踪 SCID小鼠的外周血、骨髓、肝脏、脾脏的三种白血病细胞。 结果 白血病细胞 HL - 6 0、CEM、K5 6 2经过静脉或腹腔途径均可植入 SICD小鼠体内 ,形成典型白血病模型 ;CEM白血病细胞增殖和浸润最广泛。腹腔注射常能展现瘤块生长 ,生存周期比静脉注射短。 结论  SCID小鼠中白血病增殖和浸润程度反映了白血病细胞生物特性 ,可以做为人体白血病及瘤块模型  相似文献
5.
热诱导人肺腺癌细胞凋亡的实验研究   总被引:8,自引:1,他引:7  
我们以体外人肺腺癌细胞系SPC.AI为研究对象,观察温热对肺癌细胞的杀伤效应,并从细胞形态学和生化学两方面,着重探讨细胞凋亡在热杀伤体外Spe-AI细胞过程中的作用,期望进一步丰富和发展肺癌热疗的生物学机制,为肺癌热疗的临床应用提供新的理论依据。一、材料与方法1细胞培养:人肺腺癌细胞系Spe.AI引自中国科学院上海细胞库。常规用含质量分数为10%的灭活小牛血清的RPMI-lop培养液(pH7.2-74,Gibeo,USA),单层培养于对℃、含体积分数为0.历的C02的培养箱中。以质量分数为0.石坑胰蛋白酶(D矗。。,1:250)和质量…  相似文献
6.
造血细胞生长因子对脐血CD34+细胞短期体外扩增的作用   总被引:8,自引:1,他引:7  
目的 探讨造血细胞生长因子(HGF)的不同组合对脐血CD34 细胞短期体外扩增的作用.方法 用免疫磁珠法分高纯化脐血CD34 细胞,培养于无血清培养液中。加入不同的细胞因子,于第4,7,10,14天检测CD34 细胞百分率和有核细胞(NC)总数。结果 和对照组相比,各组的NC扩增倍数随着培养时间的延长虽不同程度的增加,干细胞在FL、TPO,GM-CSF、SCF、IL-6、G-CSF、EPO和IL-3等因子作用下,NC扩增倍数在培养第14天达高峰,为328.96倍;而CD34 细胞扩增倍数在培养第7天达最高峰,但在FL、TPO、GM-CSF、SCF,IL-6、G-CSF等因子作用下,CD34 细胞扩增倍数最大,7d后达25.23倍,而后随着培养时间的延长而逐渐下降。结论 脐血CD34 细胞在HGF作用下,扩增时间以7-10d为最佳。  相似文献
7.
以血浆置换术为主治疗血栓性血小板减少性紫癜10例   总被引:6,自引:0,他引:6  
血栓性血小板减少性紫癜 (thrombotic thrombocytopenicpurpura,TTP)为一少见的微血管血栓 -出血综合征 ,是一种有多系统损害的严重疾病 ,起病多急骤 ,常易误诊 ,且死亡率高。在血浆置换术应用于临床之前 ,其死亡率高达 6 6 .6 %~ 95 %。自从推广了血浆置换疗法以后 ,TTP的预后明显改善 ,治疗的有效率达 80 %~ 90 % [1 - 2 ] 。笔者总结 1997~ 2 0 0 2年两院治疗的 TTP患者 10例 ,以血浆置换术为主治疗 ,疗效满意 ,报道如下。1 临床资料1.1 一般资料  1997~ 2 0 0 2年收治的 TTP患者 10例 ,男性1例 ,女性 9例 ;中位年龄 33岁 (1…  相似文献
8.
脐带源间充质干细胞促进造血细胞在NOD/SCID小鼠归巢   总被引:4,自引:0,他引:4  
目的探讨脐带源间充质干细胞(hUC-MSC)在促进造血细胞归巢,提高造血干细胞植入中的作用. 方法 RT-PCR检测经体外培养扩增所得hUC-MSC归巢相关分子的表达;将hUC-MSC和CFDA-SE荧光标记的人脐带血单个核细胞(MNC)植入NOD/SCID小鼠建立共移植模型,分离共移植24 h后小鼠骨髓有核细胞,用流式细胞仪和荧光倒置显微镜观察脐带血造血细胞在NOD/SCID小鼠骨髓中含量的变化. 结果 hUC-MSC表达SDF-1及其受体CXCR-4以及相关黏附分子CD11a/ICAM-1、CD49d/VCAM-1;在hUC-MSC共移植情况下,流式细胞仪检测和荧光显微镜下细胞计数均发现人脐带血MNC在小鼠骨髓中的含量与单独脐带血移植相比较有显著提高[(145±59)/1×105vs (298±72)/1×105;(755±158)/5×105vs (1598±227)/5×105个骨髓有核细胞;n=9,P<0.05)]. 结论 hUC-MSC具有表达化学趋化因子及相关黏附分子的特性,有利于实现自身的归巢定位并引导造血干祖细胞的有效归巢与植入;动物模型的建立进一步证实其引导脐带血MNC在NOD/SCID小鼠体内向造血龛--骨髓富集(归巢)的作用.  相似文献
9.
增殖细胞核抗原反义核酸对人肝癌细胞增殖的抑制作用   总被引:4,自引:1,他引:3  
目的 观察增殖细胞核抗原(PCNA)反义核酸对人肝癌细胞的抑增殖效应。方法 设计针对PCNAmRNA的18个碱基的反义核酸,分反义组、正义组和空白组作用于HepG-2肝癌细胞,MTT法和^3H-TdR掺入法观测肝癌细胞的生长抑制情况,流式细胞仪检测细胞周期的改变。结果 反义组肝癌细胞生长受到明显抑制,抑制作用于培养48h达高峰,达50%左右,72h后减弱,96h已基本消失。反义组肝癌细胞与空白对照  相似文献
10.
大剂量Bcl-2反义硫代磷酸寡核苷酸对细胞系的毒性作用   总被引:3,自引:0,他引:3  
目的 探讨大剂量Bcl-2反义硫代磷酸寡脱氧核苷酸(AS-PS-ODN,ASPO)对HL60细胞系的毒性作用,同时了解毒性与剂量的关系。方法 应用四氮唑蓝比色法、台盼蓝拒染试验,CFU-HL60克隆培养法观察大剂量Bcl-2 ASPO对HL60细胞的毒性作用,同时应用免疫细胞化学染色及流式细胞仪检测P26 Bcl-2蛋白表达,吖啶橙染色及DNA片段电泳对细胞凋亡的观察。并以其正义PSODN(SPO  相似文献
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